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文檔簡介

1、關(guān)于菊花的組織培養(yǎng)第一張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月課題1 菊花的組織培養(yǎng)第二張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第三張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月1、熟悉植物組織培養(yǎng)的基本過程2、了解植物組織培養(yǎng)的影響因素3、掌握植物組織培養(yǎng)的操作過程 示 標(biāo)第四張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月什么是細(xì)胞分化?細(xì)胞分化的原因和結(jié)果?.植物組織培養(yǎng)應(yīng)用的理論基礎(chǔ)是什么?愈傷組織是怎樣形成的?有什么特點?組織培養(yǎng)的過程?脫分化、再分化?植物組織培養(yǎng)的基本過程影響組織培養(yǎng)的因素?菊花組織培養(yǎng)的過程,及注意的問題?躬 學(xué)第五張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月1、細(xì)胞分

2、化2、細(xì)胞的全能性3、愈傷組織4、脫分化5、再分化6、外植體需要了解的幾個概念第六張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月1、細(xì)胞分化:植物的個體發(fā)育過程中,細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上都會出現(xiàn)穩(wěn)定性的差異,形成這些差異的過程就叫做細(xì)胞分化。細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。2、細(xì)胞的全能性:已分化的植物細(xì)胞仍然具有發(fā)育成為完整個體的潛能。3、愈傷組織:由離體的植物器官、組織或細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下經(jīng)過脫分化過程形成的組織,就叫愈傷組織,愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則,是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。4、脫分化:由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程,稱為脫分化,又叫去分化。5

3、、再分化:脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng),又可以重新分化成根或芽等器官,這個過程叫做再分化。6、外植體:用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。 第七張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 愈傷組織:離體的植物器官、組織或細(xì)胞通過脫分化形成的疏松而無規(guī)則的,高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的,未分化的薄壁細(xì)胞2-3周,愈傷組織開始形成。第八張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 再分化:愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng),重新分化成根和芽等器官的過程。3-5周之后,誘導(dǎo)出的新葉片和芽。第九張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月離體的植物器官、組織、細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化根芽植物體植物組織培養(yǎng)的基本過程第十張,

4、PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月(二)影響植物組織培養(yǎng)的因素 材料的選擇、營養(yǎng)成分、激素、一定的外界因素(溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的PH、適時光照等)。第十一張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月MS固體培養(yǎng)基成分及比例同微生物培養(yǎng)基相比,MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同?第十二張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同,MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng),無機鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。閱讀課文,思考以下問題1. 同微生物培養(yǎng)基相比,MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同?2、你認(rèn)為組織培養(yǎng)過程中,成功的關(guān)鍵有哪些?這些

5、步驟的適宜條件是什么?組織的脫分化及愈傷組織的再分化。植物組織培養(yǎng)過程中,影響植物細(xì)胞脫分化、再分化的最重要因素是植物激素。第十三張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月激素配比對組織培養(yǎng)的影響在培養(yǎng)基中需要添加生長素和細(xì)胞分裂素等植物激素,其濃度、使用的先后順序、用量的比例等都影響結(jié)果。 高 利于根分化、抑制芽的形成生長素/細(xì)胞分裂素 低 利于芽的形成適中 利于愈傷組織的形成 第十四張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月活動2:用自己的話把菊花組織培養(yǎng)的操作流程給描述出來?(提示:怎樣配制MS培養(yǎng)基?外植體消毒應(yīng)如何進行?接種、培養(yǎng)、移栽時應(yīng)注意什么問題? )第十五張,PPT共三十二頁

6、,創(chuàng)作于2022年6月二、實驗操作(一)制備MS培養(yǎng)基(二)外植體消毒(三)接種(四)培養(yǎng)(五)移栽(六)栽培實驗操作流程:第十六張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月2、實驗具體操作二、實驗操作(1)制備MS固體培養(yǎng)基 實驗室一般使用_保存的配制好的培養(yǎng)基母液來制備配制各種母液 配制母液時,大量元素濃縮_ ,微量元素濃縮_ ,常溫保存。激素類、維生素類以及用量比較小的有機物可以按照_的質(zhì)量濃度單獨配制母液。 用母液配制培養(yǎng)基時,需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù),計算用量。1mg/ml410倍100倍第十七張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月二、實驗操作配制培養(yǎng)基。2、實驗具體操作(1).

7、制備MS固體培養(yǎng)基實驗室一般使用_保存的配制好的培養(yǎng)基母液來制備4植物激素在菊花組織培養(yǎng)中,可以不添加_ ,原因是菊花莖段組織培養(yǎng)_ 。比較容易配制培養(yǎng)液調(diào)PH培養(yǎng)基的分裝 第十八張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月二、實驗操作滅菌將分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進行_。2、實驗具體操作(1).制備MS固體培養(yǎng)基實驗室一般使用_保存的配制好的培養(yǎng)基母液來制備4高壓蒸汽滅菌第十九張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月2、實驗具體操作二、實驗操作(2)外植體消毒 選取菊花莖段時,要取 _。流水沖洗酒精無菌水氯化汞無菌水消毒流程:濃度_搖動_次時間_s濃度_時間_min至少清洗_次漂凈_生

8、長旺盛的嫩枝70%23670.1%123消毒液第二十張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 不是。對外植體進行表面消毒時,既要考慮到消毒效果,又要考慮到植物的耐受能力。 在外植體消毒過程中,是不是強度越大越好,為什么? 思 考?第二十一張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月2、實驗具體操作二、實驗操作(3)接種 前期準(zhǔn)備:用_消毒工作臺,點燃酒精燈。所有工作都必須在酒精燈旁進行,器械使用前后都要用_滅菌。接種操作:插入外植體時_端朝上,每個錐形瓶接種_個外植體。70的酒精火焰灼燒形態(tài)學(xué)上68第二十二張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月你打算做幾組重復(fù)?你打算設(shè)置對照實驗嗎?思 考

9、? 每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對照實驗可以取用一個經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng),用以說明培養(yǎng)基制作合格,沒有被雜菌污染。第二十三張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月2、實驗具體操作二、實驗操作(4)培養(yǎng) 接種后的錐形瓶最好放在_中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間定期進行_,溫度控制在_,并且每天用日光燈光照_h。無菌箱182212消毒了解:光照條件第二十四張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月2、實驗具體操作二、實驗操作(5)移栽 移栽生根的試管苗之前,應(yīng)先打開封口膜,在培養(yǎng)間生長幾日;然后用流水清洗_,將幼苗移植到_等環(huán)境中生活一段時間,進行壯苗。最后進

10、行露天栽培。根部培養(yǎng)基消過毒的蛭石或珍珠巖第二十五張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月1、培養(yǎng)基的滅菌(高壓蒸汽滅菌)2、外植體的消毒(酒精、氯化汞)3、接種的無菌操作(酒精、酒精燈灼燒)4、無菌箱中的培養(yǎng);5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。在整個操作過程中,是如何來實現(xiàn)無菌環(huán)境的?思 考?第二十六張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月三、結(jié)果分析與評價(一)對接種操作中污染情況的分析(二)是否完成了對植物組織的脫分化和再分化(三)是否進行了統(tǒng)計、對照與記錄(四)生根苗的移栽是否合格第二十七張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月外植體在培養(yǎng)過程中可能會被污染,你認(rèn)為造成污染的原因有哪些?污染物如何處理?思 考?第二十八張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作于2022年6月1、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時帶入4、環(huán)境不清潔結(jié)合錄像外植體滅菌與接種操作,談?wù)劷M織培養(yǎng)污染的主要途徑及怎樣預(yù)防污染?第二十九張,PPT共三十二頁,創(chuàng)作

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