雞卵類粘蛋白的制備及活力測定_第1頁
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文檔簡介

雞卵類粘蛋白的制備及活力測定1一、實驗?zāi)康恼莆諒碾u蛋清中提取卵類粘蛋白的方法了解凝膠層析法的工作原理，掌握其基本操作技術(shù)掌握離子交換纖維素柱層析的基本操作技術(shù)掌握測定雞卵類粘蛋白活力的方法2二、實驗原理（一）雞卵類粘蛋白的特性1.糖蛋白2.在中性及偏酸性溶液中對熱及高濃度的脲、有機(jī)溶劑都有較高耐受性；堿性溶液不穩(wěn)定3.在50%丙酮或10%三氯乙酸溶液中仍有較好的溶解度3（二）凝膠過濾（分子篩層析）的基本原理4（三）離子交換層析的基本原理5（四）活力測定原理雞卵類粘蛋白具有強(qiáng)烈的抑制胰蛋白酶的作用；胰蛋白酶能水解酯鍵、酰胺鍵和肽鍵，利用這一性質(zhì)用人工合成的底物或天然的蛋白質(zhì)可以測定胰蛋白酶的活力，由此可計算卵類粘蛋白的活力。6三、實驗流程卵類粘蛋白的抽提（活力測定）分子篩層析（凝膠預(yù)處理裝柱平衡上樣洗脫收集蛋白峰活力測定）離子交換層析（活力測定）透析丙酮沉淀離心(活力測定) 7四、操作方法參見實驗講義8五、思考題1.利用凝膠層析法分離混合樣品時，怎樣才能得到較好的分離效果？2.通過本實驗，指出酶活力測定對于酶的分離提純有何意義？9

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