動植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶tostudents

1、關(guān)于動植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶tostudents第一張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月 植物、動物、微生物細胞的特性比較細胞種類植物細胞微生物細胞動物細胞細胞大小/um20030011010100倍增時間/h120.3-615營養(yǎng)要求簡單簡單復(fù)雜光照要求大多數(shù)要求不要求不要求對剪切力敏感大多數(shù)不敏感非常敏感主要產(chǎn)物色素、藥物、香精、酶等醇、有機酸、氨基酸、抗生素、核苷酸、酶等疫苗、激素、單克隆抗體、酶等第二張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月三者之間的差異主要有：植物細胞動物細胞微生物細胞。動物細胞、植物細胞的生產(chǎn)周期比微生物長。植物細胞和微生物細胞的營養(yǎng)要求較簡單。植物細胞的生長以及

2、次級代謝物的生產(chǎn)要求一定的光照。植物細胞和動物細胞對剪切力敏感。植物、微生物和動物細胞的主要目的產(chǎn)物各不相同。第三張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月雪蓮中黃酮類化合物為主要成分。黃酮類化合物以黃酮（2-苯基色原酮）為母核而衍生的一類黃色色素。黃酮化合物具有多種生物活性，抗菌、消炎、抗突變、降壓、清熱解毒、鎮(zhèn)靜，在抗氧化、抗癌、防癌等方面也有顯著效果；是大多數(shù)氧自由基的清除劑，對治療冠心病、心絞痛、高血壓等有顯著效果；對降低舒張壓，防治心律失常、心血管病和活血化瘀也起重要作用。自然資源有限，生長條件苛刻，很難人工栽培。通過水母雪蓮細胞培養(yǎng)生產(chǎn)黃酮有著重要意義。第四張，PPT共四十六頁，創(chuàng)

3、作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶本章主要內(nèi)容動植物細胞中酶生物合成的調(diào)節(jié)植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶植物細胞及其培養(yǎng)特點植物細胞培養(yǎng)及產(chǎn)酶的工藝控制動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶動物細胞及其培養(yǎng)特點動物細胞培養(yǎng)及產(chǎn)酶的工藝控制第五張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶第一節(jié) 動植物細胞中酶生物合成的調(diào)節(jié)從基因到蛋白質(zhì)有關(guān)微生物細胞中酶合成的調(diào)節(jié)理論也基本適用于動植物細胞動植物細胞具有比微生物更多的調(diào)節(jié)方式轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)翻譯水平調(diào)節(jié)激素、神經(jīng)調(diào)節(jié)第六張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動植物細胞中酶生物合成的調(diào)節(jié)一、細胞分化改

4、變酶的生物合成 端粒（telomere）端粒是真核生物染色體的末端結(jié)構(gòu)由富含 G、T 的 DNA 簡單重復(fù)序列不斷重復(fù)而成人端粒序列：TTAGGG保護真核生物染色體免遭破壞犧牲自我，填補 DNA 復(fù)制后在5-端留下的空隙端粒隨細胞年齡的增長而逐漸縮短端粒酶（telomerase） 催化端粒合成和延長核糖核蛋白，其中的 RNA 部分含核苷酸模板序列，可構(gòu)建端粒重復(fù)序列端粒酶一般存在于分化程度較低的細胞中第七張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動植物細胞中酶生物合成的調(diào)節(jié)二、基因擴增加速酶的生物合成通過增加基因的數(shù)量調(diào)節(jié)基因表達，可以發(fā)生在個體發(fā)育某一階段或

5、細胞分化某一過程細胞的一種應(yīng)急方式基因擴增可以由選擇壓力引起耐藥性細胞的抗藥性產(chǎn)生例：CHO（中國田鼠卵巢）細胞為對抗氨甲基喋呤對二氫葉酸還原酶的抑制，編碼這種酶的基因急劇擴增第八張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動植物細胞中酶生物合成的調(diào)節(jié)三、增強子促進酶的生物合成增強子（modulator） 能高效增強或促進基因轉(zhuǎn)錄的一段DNA 序列增強子能促進同源或異源啟動基因的轉(zhuǎn)錄活性，可高效增強某些酶基因的表達具有細胞或組織特異性，在不同細胞或組織中增強效果不同第九張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月抗原和抗體 當(dāng)外源物性物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、毒素、糖蛋白、

6、脂蛋白、核酸、多糖、顆粒（細菌、細胞、病毒）進入人或動物體內(nèi)時，機體的免疫系統(tǒng)便產(chǎn)生相應(yīng)的免疫球蛋白（immune globin），并以之結(jié)合，以消除異物的毒害。此反應(yīng)稱為免疫反應(yīng)，此異物便是抗原，此球蛋白便是抗體?？贵w酶（Abzyme)是具有酶催化功能的抗體分子。 本質(zhì)為免疫球蛋白，在可變區(qū)被賦予了酶的屬性。 四、抗原誘導(dǎo)抗體酶的生物合成第十張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動植物細胞中酶生物合成的調(diào)節(jié)四、抗原誘導(dǎo)抗體酶的生物合成抗體酶（abzyme）：催化性抗體，是具有生物催化功能的抗體分子，是人工改造的對抗體可變區(qū)賦予催化特性的特殊抗體修飾法在抗

7、體與抗原結(jié)合部位引進催化基團誘導(dǎo)法（主要方法）半抗原誘導(dǎo)酶蛋白誘導(dǎo)第十一張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶植物來源物質(zhì)的生產(chǎn)方法有兩種：1、提取分離法：原料有限2、細胞培養(yǎng)法在人工控制條件的植物細胞反應(yīng)器中進行優(yōu)質(zhì)細胞培養(yǎng)，從而獲得各種所需產(chǎn)物。植物材料提取分離純化產(chǎn)品第十二張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶1902年，Haberlandt首次提出分離植物單細胞并培養(yǎng)成植株的設(shè)想植物細胞的全能性Haberlandt哈勃蘭德第十三張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植

8、物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶一、植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶種類產(chǎn)酶植物細胞產(chǎn)酶品種胡蘿卜細胞糖苷酶紫苜蓿細胞-半乳糖苷酶甜菜細胞過氧化物酶、酸性/堿性轉(zhuǎn)化酶、糖化酶大豆細胞過氧化物酶、苯丙氨酸裂合酶花生細胞苯丙氨酸裂合酶假挪威槭細胞漆酶利馬豆細胞-葡萄糖苷酶番木瓜細胞木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶大蒜細胞超氧化物歧化酶菠蘿細胞菠蘿蛋白酶劍麻細胞劍麻蛋白酶第十四張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶植物細胞結(jié)構(gòu)第十五張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶二、植物細胞的主要特點體積較大：比動物細胞和微生物細胞都大細胞生

9、長速率和代謝速率低于微生物細胞，生長周期長營養(yǎng)要求較動物細胞簡單細胞生長及合成次級代謝產(chǎn)物需要光照條件對剪切力較敏感主要用于產(chǎn)天然產(chǎn)物、色素、香精等有機物（次級代謝物）第十六張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶三、植物細胞培養(yǎng)的優(yōu)勢提高目標(biāo)物的產(chǎn)率縮短生產(chǎn)周期木瓜蛋白酶：木瓜生長期8個月，木瓜細胞培養(yǎng)約1個月易于管理，不受自然因素控制可以提高產(chǎn)物質(zhì)量通過嚴(yán)格的培養(yǎng)條件控制，減少植株病蟲害和污染四、缺點培養(yǎng)條件要求高 光照、剪切力影響顯著植物細胞生長緩慢 相對于微生物第十七張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月五、工藝條件及控制1、工藝

10、流程外植體 獲取細胞（誘導(dǎo)愈傷組織）細胞培養(yǎng)分離純化酶第十八張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月外植體： 從植株取出，經(jīng)過預(yù)處理后，用于植物組織培養(yǎng)的植物組織（包括根、莖、葉、芽、花、果實、種子等）片段或小塊。愈傷組織：一種能迅速增殖、無特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細胞團 將上述外植體植入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，于25左右培養(yǎng)一段時間，從外植體的切口部位長出小細胞團。第十九張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶植物細胞培養(yǎng) 外植體選擇和處理外植體（explant）從植株取出，經(jīng)預(yù)處理后用于組織和細胞培養(yǎng)的植物組織片段或小塊根、莖、葉、芽、花、果實、種子

11、等選擇：無病蟲害、生長旺盛、生長有規(guī)則切片：0.51 cm消毒70% 乙醇5% 次氯酸鈉 / 10% 漂白粉0.010.1% HgCl2水稻的外植體（幼胚）第二十張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶植物細胞培養(yǎng) 獲取植物細胞：直接分離法直接分離法即直接從外植體中分離機械法將外植體搗碎，過濾或離心分離細胞質(zhì)壁未分離；細胞破碎率高，完整細胞數(shù)量少酶解法利用果膠酶、纖維素酶等處理外植體，分離具有代謝活性的細胞能降解細胞壁，必須對細胞給予滲透壓保護第二十一張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶

12、植物細胞培養(yǎng) 獲取植物細胞：愈傷組織誘導(dǎo)法愈傷組織（callus）由外植體組織增生的細胞產(chǎn)生的團狀不定型的疏散排列的薄壁細胞群體；本意是指植物體的局部受到創(chuàng)傷刺激后，在傷口表面新生的可幫助傷口愈合的組織誘導(dǎo)過程配制半固體誘導(dǎo)培養(yǎng)基滅菌、植入外植體13周后繼代培養(yǎng)第二十二張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶植物細胞培養(yǎng) 獲取植物細胞：原生質(zhì)體再生法一般采用酶解法分離原生質(zhì)體，使用纖維素酶和果膠酶混合物保持溶液的高滲狀態(tài)防止原生質(zhì)體脹裂滲透壓穩(wěn)定劑：糖、鹽、甘露醇、山梨醇等原生質(zhì)體培養(yǎng)，再生細胞壁第二十三張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年

13、6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶植物細胞培養(yǎng) 懸浮培養(yǎng)將游離的單細胞或細胞團按照一定的細胞密度懸浮在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的方法懸浮培養(yǎng)的細胞一般來源于愈傷組織，選擇較松散的為宜植物細胞培養(yǎng) 產(chǎn)物分離純化收集培養(yǎng)液，從中獲得所需的產(chǎn)物第二十四張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月2、培養(yǎng)基的特點 （1）需大量無機鹽 （2）需維生素和生長激素：硫胺素、吡哆素、鹽酸、肌醇、 生長素、分裂素等 （3）一般為無機氮源：硝酸鹽和銨鹽 （4）一般以蔗糖為碳源第二十五張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶3、工藝條件及其控制溫度室

14、溫范圍（25 oC左右）最適產(chǎn)酶溫度和最適生長溫度不同pH微酸性（pH 56）細胞培養(yǎng)時，pH一般變化不大溶解氧植物細胞需氧量不高，供氧不宜過量對剪切力敏感，通風(fēng)攪拌不宜太劇烈第二十六張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶工藝條件及其控制光照光照對植物細胞的生長和產(chǎn)物合成具有重要影響（植物特色）光照有時也抑制產(chǎn)物合成添加前體前體：處于目的代謝物代謝途徑上游的物質(zhì)添加前體相對于添加了反應(yīng)的底物刺激劑（elector）引導(dǎo)物質(zhì)朝特定的代謝方向進行，強化次級代謝產(chǎn)物的生物合成常用微生物細胞壁碎片和果膠酶、纖維素酶等胞外酶第二十七張，PPT共四十六

15、頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶六、產(chǎn)酶實例 大蒜細胞培養(yǎng)產(chǎn) SOD超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD，EC 1.15.1.1）生物體內(nèi)清除超氧化物陰離子自由基（O2-）的重要金屬酶類SOD 和過氧化氫酶 (catalase)、過氧化物酶 (peroxidase，POD) 一起構(gòu)成了生物體內(nèi)重要的酶促反應(yīng)防御體系，從而維護生物體內(nèi)細胞正常的生理代謝和生化反應(yīng)第二十八張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶產(chǎn)酶實例 大蒜細胞培養(yǎng)產(chǎn) SOD大蒜愈傷組織的誘導(dǎo)選取結(jié)實、飽滿、無

16、病蟲害的大蒜蒜瓣，去除外皮先用70% 乙醇消毒 20 s，再用0.1%升汞消毒 10 min，然后無菌水漂洗3次在無菌條件下，切成0.5 cm3 的小塊，植入含有3 mg/L 2,4-D （2,4-二氯苯氧乙酸）和1.2 mg/L 6-BA （卞基腺嘌呤）的半固體 MS 培養(yǎng)基中25 oC，600 lux，12 h/d光照條件下培養(yǎng)18天，誘導(dǎo)得到愈傷組織，每18天繼代一次第二十九張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶產(chǎn)酶實例 大蒜細胞培養(yǎng)產(chǎn) SOD大蒜細胞懸浮培養(yǎng)將上述在半固體 MS 培養(yǎng)基上培養(yǎng)18天的愈傷組織，在無菌條件下轉(zhuǎn)入含有3

17、mg/L 2,4-D 和 1.2 mg/L 6-BA 的液體 MS 培養(yǎng)基中，加入滅菌的玻璃珠，25 oC，600 lux，12 h/d光照條件下振蕩培養(yǎng)1012天，使愈傷組織分散成為小細胞團或單細胞無菌條件下，經(jīng)過篩網(wǎng)將小細胞團或單細胞轉(zhuǎn)入含有3 mg/L 2,4-D和1.2 mg/L 6-BA 的液體 MS 培養(yǎng)基中，25 oC，600 lux，12 h/d光照條件下振蕩培養(yǎng)18天SOD 分離純化收集細胞，破碎，用pH 7.8 磷酸鹽緩沖液提取第三十張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月七、現(xiàn)狀： 1、產(chǎn)率低 2、周期長，易染菌 3、光照難控制，放大難 4、成本高，生產(chǎn)高價值產(chǎn)品第三十

18、一張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶第二節(jié) 動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶動物細胞特性沒有細胞壁，細胞脆弱（區(qū)別于植物和微生物）體積比微生物細胞大幾千倍，但稍小于植物細胞在肌體內(nèi)相互粘連，以群體形式存在在培養(yǎng)時具有群體效應(yīng)、貼壁依賴性、接觸抑制性、功能全能性營養(yǎng)要求復(fù)雜（血清培養(yǎng)基）第三十二張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶動物細胞培養(yǎng)的特點主要用于生產(chǎn)蛋白質(zhì)生長緩慢容易受污染（細菌、支原體），培養(yǎng)過程中需添加抗生素對剪切力特別敏感（胞外缺少保護結(jié)構(gòu)）大部分具有貼壁依賴性 貼壁培養(yǎng)培養(yǎng)基成分復(fù)雜，價格高昂細胞

19、生命有限，一般最多繼代培養(yǎng)50代即退化死亡第三十三張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶動物細胞培養(yǎng)方式 懸浮培養(yǎng)適用于非貼壁依賴型細胞雜交瘤細胞、腫瘤細胞、體液（血液、淋巴液）細胞類似于微生物細胞的深層發(fā)酵，但工藝條件有較大差別對通氣、攪拌耐受性差對氧氣的要求較微生物低，培養(yǎng)時需通入一定比例 CO2優(yōu)點（相對于貼壁培養(yǎng)）細胞在培養(yǎng)液中均勻分散，生長情況良好傳代培養(yǎng)容易，無需消化分散細胞培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分利用率高第三十四張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶動物細胞培養(yǎng)方式 貼壁培養(yǎng)適用于

20、貼壁依賴型細胞上皮細胞、成纖維細胞細胞在培養(yǎng)容器表面迅速鋪展并分裂滾瓶培養(yǎng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)簡單，但比表面積小微載體培養(yǎng)系統(tǒng)由葡聚糖凝膠等聚合物制得的微球兼具單層培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)的優(yōu)勢細胞生長環(huán)境均一第三十五張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶動物細胞培養(yǎng)方式 固定化培養(yǎng)貼壁或非貼壁依賴型細胞均適用吸附法載體為多孔性顆粒，如陶瓷顆粒、玻璃珠及硅膠顆粒貼壁型細胞的微載體培養(yǎng)即屬此類包埋法將細胞包埋于瓊脂、瓊脂糖、膠原及血纖維等海綿狀基質(zhì)中細胞不易脫落固定化培養(yǎng)優(yōu)點細胞損傷程度低，可重復(fù)使用產(chǎn)物分離容易第三十六張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動

21、 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶動物細胞培養(yǎng)過程種質(zhì)細胞體細胞（動物體內(nèi)組織取出）雜交瘤細胞基本工藝過程第三十七張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶培養(yǎng)基（1）加血清或代用品（2）水用雙蒸水（3）用無機鹽調(diào)節(jié)滲透壓（4）一般加抗生素（青霉素&鏈霉素）第三十八張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶動物細胞培養(yǎng)的工藝條件及其控制溫度哺乳動物細胞培養(yǎng)一般控制在 36.50.25 oC溫度也影響 CO2 溶解度，從而影響培養(yǎng)液 pH 值滲透壓保持細胞內(nèi)外等滲狀態(tài)，一般70085

22、0 kPa溶解氧供氧不足：細胞生長受抑制過量供氧：容易產(chǎn)生較多氧自由基，殺傷細胞用混合氣代替空氣（空氣、O2、N2、CO2）第三十九張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶動物細胞培養(yǎng)的工藝條件及其控制pH 值與 CO2 濃度動物細胞培養(yǎng)液 pH 在 7.07.6 之間，以 pH 7.4 為最佳最常用的緩沖體系為 CO2 / HCO3-動物細胞培養(yǎng)時缺少 CO2，培養(yǎng)液中的 HCO3- 會被耗盡；CO2 保持了 HCO3- 的濃度，以提供穩(wěn)定的緩沖環(huán)境通常 CO2 濃度維持在 210% 之間指示劑：酚紅第四十張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于202

23、2年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶動物細胞培養(yǎng)的工藝條件及其控制pH 值 HEPES 緩沖體系HEPES：4-羥乙基哌嗪乙磺酸4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazine-1-ethanesulfonic acidHEPES is a zwitterionic organic chemical buffering agent. HEPES is widely used in cell culture, largely because it is better at maintaining physiological pH despite changes

24、 in carbon dioxide concentration (produced by cellular respiration) when compared to bicarbonate buffers, which are also commonly used in cell culture. HEPES is like water in that its dissociation decreases as the temperature decreases. This makes HEPES a more effective buffering agent for maintaini

25、ng enzyme structure and function atlow temperatures.第四十一張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶相關(guān)問題 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代傳代培養(yǎng)：將原代培養(yǎng)的細胞分離、稀釋并接種到新培養(yǎng)基上繼續(xù)擴大培養(yǎng)的階段體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長當(dāng)細胞鋪滿培養(yǎng)器皿的表面時，正常的細胞停止生長，但是轉(zhuǎn)化（即發(fā)生遺傳物質(zhì)突變）的、對接觸抑制不敏感的細胞會繼續(xù)生長如果不及時傳代，這些轉(zhuǎn)化的細胞就會逐步取代正常的細胞，導(dǎo)致正常細胞的退化動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶?第四十二張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月動 植 物 細 胞 培 養(yǎng) 產(chǎn) 酶動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶產(chǎn)酶實例 人黑色素瘤細胞培養(yǎng)生產(chǎn) tPA（組織纖溶酶原激活劑催化纖溶酶原水解，生成纖溶酶。纖溶酶催化血栓中的血纖維蛋白水解，對血栓性疾病有顯著療效）Tissue plasminogen activator (abbr. tPA) is a protein involved in the breakdown of blood clots. It is a serine