光合儀使用說明及注意事項(xiàng)

1、LI-6400便攜式光合儀的使用說明儀器使用功能LI-6400并非單一用于研究植物光合作用，他同時(shí)包括光合、呼吸（分為植物呼吸和土壤呼吸）、蒸 騰、熒光等多項(xiàng)測(cè)量功能，多項(xiàng)功能的完全集成使得LI-6400成為生態(tài)學(xué)研究領(lǐng)域上重要的必不可少的基礎(chǔ) 研究設(shè)備。其測(cè)量參數(shù)包括：凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs）、蒸騰速率（Ts）、細(xì)胞間隙CO2濃度 （Ci）、大氣CO2濃度（Ca）、光量子通量密度（PFD）、葉溫（TL）、相對(duì)空氣濕度（RH）。如果配備 6400-40葉綠素?zé)晒馊~室，可測(cè)試以下參數(shù)：最大熒光（Fm）、初始熒光（Fo）、可變熒光（Fv）、光化 學(xué)猝滅（qP）、非化學(xué)猝滅（qN）。此外

2、，進(jìn)行自動(dòng)測(cè)量的基礎(chǔ)上還可以進(jìn)一步計(jì)算飽和點(diǎn)、補(bǔ)償點(diǎn)等多 項(xiàng)重要生理生態(tài)指標(biāo)。表1 LI-6400參數(shù)表（主機(jī)顯示屏測(cè)量菜單顯示的參數(shù)說明，A-L是行號(hào)）ACO2R uml參出室 CO2 濃度(umol CO2 mol-1)GPrss kPa大氣壓力（kPa）CO2S uml樣本室 CO2 濃度(umol CO2 mol_1)ParIn um葉室內(nèi)光合作用有效輻射（umol m-2 s_1）H2ORmml參比室 H2O濃度(mmol H2O mol_1)ParOutum外界光合作用有效輻射（umol m-2 s-i）H2OS mml樣本室 H2O 濃度(mmol H2O mol-1)BLC m

3、ol總?cè)~片邊緣層導(dǎo)度（mol m2s1）BCO2_umlCO2變化量（樣本-參比）（umol CO2 mol_1）HTblockC冷卻器溫度（C）H2O_mmlH2O變化量（樣本-參比）（mmol H2O mol_1）TairC樣本室溫度（C）Flow uml樣本室內(nèi)氣流速率（umol s_1）TleafC葉片溫度（C）RHS%樣本室內(nèi)相對(duì)濕度（%）CPhoto光合作用諫率(umol CO2 m-2 s-1)IHH:MM:SS實(shí)時(shí)時(shí)鐘Cond氣孔導(dǎo)度(mol H2O m-2 s-1)Proaram自動(dòng)測(cè)量程序狀態(tài)Ci胞間 CO2 濃度(umol CO2 mol_1)CHPWMFStatus w

4、ord (summary of line J)Trmmol蒸騰諫率(mmol H2O m_2s_1)Batterv電池電壓（V）DCi/Ca胞間CO2/環(huán)境CO2JCO2CO2 IRGAs 狀態(tài)VpdL葉溫下蒸氣壓虧缺（kPa）H2OIRGAs狀態(tài)VpdA氣溫下蒸氣壓虧缺（kPa）Pump泵狀態(tài)Flow流速控制器狀態(tài)MixrCO2混合器狀態(tài)Fan葉室風(fēng)扇狀態(tài)EtotalCV%.CO2CV_%, . CV_%,及Flow_CV%總變異系數(shù)KProgram顯示自動(dòng)測(cè)量程序狀態(tài)CO2CV_%CO2_uml (%)變異系數(shù)ProgPrgsAutoProgram step counterH2OCV %H

5、2O mml (%)變異系數(shù)FwMxCrLpNumerical summary of the four stability flagsFlow_CV%Flow_uml (%)變異系數(shù)totalCV%See totalCV% under E aboveFRH_R_%參比室相對(duì)濕度（%）LCRagc_mvReference CO2 AGC (automatic gain control) signal, in mVRHS%樣本室相對(duì)濕度（%）CSagc mvSample CO2 AGC signalTd R %參比室露點(diǎn)溫度（C）HRagc mvReference H2O AGC signalTd

6、_S_%樣本室露點(diǎn)溫度（C）HSagc_mvSample H2O AGC signal硬件組成與存放正確的硬件連接與存放對(duì)于使用和維護(hù)來說是至關(guān)重要的。關(guān)于儀器的連接請(qǐng)與培訓(xùn)人員聯(lián)系學(xué)習(xí)。圖1儀器在主機(jī)箱內(nèi)的安放位置與名稱(請(qǐng)注意安放的方式)關(guān)閉葉室，確定葉室關(guān)閉緊密，接上電池插頭，開主機(jī)儀器使用流程儀器安裝連接，并連接好進(jìn)氣管緩沖瓶。打開位于主機(jī)右側(cè)的電源開關(guān)。儀器在啟動(dòng)后將顯示“Is the IRGA connected?(Y/N)” 選擇Y葉室配置選擇：選擇目前安裝的葉室配置，如已經(jīng)安裝了標(biāo)準(zhǔn)葉室，請(qǐng)選擇Factory default，然后回車。如果安裝了熒光葉室，請(qǐng)選擇6400-40

7、Default Flurometer，然后回車。如果安裝了土壤葉室，請(qǐng)選擇6400-09 soil Chamber，然后回車。其他葉室方法相同，只需要選擇不同的葉室就可以了。調(diào)零向SCRUB方向擰緊堿石灰管和干燥管上端的螺母。關(guān)閉葉室，即壓下黑色手柄，并旋緊固定螺絲即可。在主菜單按F3按鈕選“Calib Menu”項(xiàng)選“Flow Meter Zero”項(xiàng)（調(diào)氣流量為零），回車等待流速的電壓讀數(shù)基本穩(wěn)定，用F1、F2上下調(diào)節(jié)，至讀數(shù)基本穩(wěn)定，且在一范圍內(nèi)，按EXIT按鈕退出。選“ IRGA Zero ”（紅外線氣體分析儀探頭調(diào)零），回車等待CO2濃度和H2O濃度的下降，至讀數(shù)基本穩(wěn)定（一般在20

8、分鐘左右），按F3 “Auto All ”進(jìn)行自動(dòng) 調(diào)節(jié)，結(jié)束后“ Exit ”退出。選“View Store Zeros Spans”，回車后按F1 “Store”來保存，按“Y”來確定后按F5 “Exit ”退出。 按“ escape ”，回到主菜單。手動(dòng)測(cè)量按F4 “New Measurements”菜單進(jìn)入測(cè)量菜單。設(shè)定文件：按F1 “Open Logfile”建立新文件?；剀嚭筝斎胱约涸O(shè)定的文件名。當(dāng)顯示屏出現(xiàn)提示“Enter Remark”時(shí)，輸入需要的標(biāo)記（英文，用于標(biāo)記樣地、植物種類、樣品號(hào)等）。繼續(xù)回車，文件設(shè)置結(jié) 束。在夾入葉片之前如果光合值大于或小于，那么應(yīng)該按F5 “M

9、atch”進(jìn)行匹配。測(cè)量：選取需要測(cè)量的植物葉片（3-5次重復(fù)）。測(cè)量時(shí)間請(qǐng)盡量選擇晴朗的天氣條件，上午10： 00-11：30左右最好，如果您的植物葉片是處于溫室內(nèi)、室內(nèi)或生長(zhǎng)箱內(nèi)，由于其葉片氣孔沒有完全開放，需要先用 飽和光強(qiáng)來進(jìn)行氣孔誘導(dǎo)，方法可以是采用大瓦數(shù)的燈泡來照射（大致需要20分鐘的時(shí)間），或者在室外 有光條件下活化（會(huì)小于20分鐘），也可采用6400-02B或6400-40熒光葉室來進(jìn)行氣孔的誘導(dǎo)開放（這 種方法有其缺點(diǎn)，因?yàn)槲覀兺枰芏啻沃貜?fù)和樣地，這樣會(huì)多花很多時(shí)間。）。向Bypass方向擰緊堿石灰管和干燥管上端的螺母。夾上葉片（盡量讓葉片充滿整個(gè)葉室空間，此時(shí)測(cè) 量的

10、植物葉片面積為6cm2，如果無法充滿，需要用葉面積儀來確定葉面積，并在測(cè)量菜單狀態(tài)下按數(shù)字“3”并按F1來修改葉片面積），關(guān)閉葉室（即壓下黑色手柄），并旋緊固定螺絲即可（切記不要過緊）。等待C行PHOTO讀數(shù)穩(wěn)定后即可記錄（大約在30秒-1分鐘左右，判斷標(biāo)準(zhǔn)是小數(shù)點(diǎn)后最后一位數(shù)字 的波動(dòng)在左右，注意，如果是室內(nèi)測(cè)量，波動(dòng)會(huì)大一些）。記錄方法是按F1 “LOG ”按鈕或者按分析儀手 柄上的黑色按鈕2秒即可記錄一組數(shù)據(jù)。換葉片進(jìn)行下一次測(cè)量。重復(fù)。自動(dòng)測(cè)量與環(huán)境條件控制LI-6400可以控制的環(huán)境條件包括溫度、CO2濃度、光強(qiáng)等。一般而言，需要控制環(huán)境條件的實(shí)驗(yàn)有兩 種情況。一種是環(huán)境變化劇烈，無

11、法準(zhǔn)確進(jìn)行同等環(huán)境條件的測(cè)量。另一種情況是進(jìn)行光曲線和ACI曲線測(cè) 量。第一、簡(jiǎn)單環(huán)境控制。只需要在手動(dòng)測(cè)量時(shí)，按數(shù)字來切換菜單。具體各菜單情況如下圖所示。Edito1. 00GRAPHWhat-*Stable記錄控制,匹配ERGA葉室環(huán)境控制曜（流速/濕度.C02.濕度7光照）葉面積沮定，氣比率設(shè)定，葉室風(fēng)扇速度等實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)曲線囹白助測(cè)空程序控制：定義記錄內(nèi)容丈本顯示控制用戶君定義區(qū)測(cè)量模式下功能鍵分布圖圖2測(cè)量菜單下功能鍵分布圖溫度控制：按數(shù)字2,按F4菜單控制溫度（輸入需要的溫度回車即可，注意溫度控制范圍是環(huán)境溫度的 上下6度）。光強(qiáng)控制：本功能在標(biāo)準(zhǔn)葉室配置下無法完成，此時(shí)需要連接640

12、0-02B紅藍(lán)光源。并重新啟動(dòng)機(jī)器選 擇6400-02B CHAMBER配置。啟動(dòng)后其他同標(biāo)準(zhǔn)葉室。在測(cè)量菜單下按數(shù)字“2”，按F5按鈕選擇 “Quantum Flux ”回車，輸入您需要的光強(qiáng)值即可。CO2控制：需要連接上CO2注入系統(tǒng)，并在主菜單下選擇F3Calib”按鈕進(jìn)入校準(zhǔn)菜單。此時(shí)應(yīng)該 把葉室關(guān)閉擰緊，把CO2過濾管的螺絲擰到“SCRUB”狀態(tài)。利用上下箭頭選擇“CO2 Mixer Calibrate，回車后，等待系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)行校準(zhǔn)后，回到測(cè)量菜單，按數(shù)字2,按F3設(shè)置REF CO2濃度即 可進(jìn)行測(cè)量。測(cè)定完成后，關(guān)閉氣流、溫度、光強(qiáng)控制，退到主菜單。第二、自動(dòng)測(cè)量。光曲線：夾上葉片

13、氣孔開放后的葉片，建立新文件后，匹配。測(cè)量菜單下按數(shù)字5,按F1,選擇LIGHT CURVE，回車，并輸入光強(qiáng)梯度（例如 2000 1500 1200 1000 800 600 400 200 100 50 20 0）。進(jìn) 一步輸入最小等待時(shí)間（例如120秒）和最大等待時(shí)間（240秒）。輸入匹配值（例如20PPM），回車， 機(jī)器即進(jìn)入自動(dòng)測(cè)量，測(cè)量后關(guān)閉文件。退出。（注意此測(cè)量要求CO2濃度變化不大，否則應(yīng)該控制其濃 度）。ACI曲線：同于光曲線，不同點(diǎn)是選擇“ACI CURVE”，設(shè)置濃度梯度舉例（380 300 200 100 50 380 380 400 600 800）。其他相同。.數(shù)據(jù)輸出將計(jì)算機(jī)與儀器連接，把儀器狀態(tài)調(diào)整（主菜單下按F5 “UTILITY”進(jìn)入應(yīng)用菜單，選擇“FILEEXCHANGE”，回車即可。）取出隨機(jī)帶的軟件光盤，在計(jì)算機(jī)上安裝WINFX軟件。安裝完畢后啟動(dòng)此軟件。并選擇CONNECT。后把 LI-6400內(nèi)的“USER”文件夾下的數(shù)據(jù)文件拖到計(jì)算機(jī)中的某個(gè)文件夾下即可。使用此文件時(shí)只需要打開 EXCEL軟件，文件擴(kuò)展名選擇所有文件，選擇分隔符為逗號(hào)，并打開文件，即可使用數(shù)據(jù)。關(guān)閉儀器按“ESCAP