金邊瑞香活性成分瑞香黃烷Ⅰ瑞香素對SMMC7721和 MCF7細胞作

1、金邊瑞香活性成分瑞香黃烷-，瑞香素對SMMC-7721和 MCF-7細胞作【摘要】目的研究金邊瑞香活性成分瑞香黃烷-(E002)、瑞香素(E003)抗腫瘤活性，為進一步研究抗腫瘤機制提供根據(jù)。方法用噻唑藍(TT)法檢測不同濃度E002、E003對S-7721和F-7細胞的抑制率。結果E002、E003濃度為2501.95g/l時,作用S-7721細胞，兩者的抑制率為：(86.92.2)%(50.80.6)%。E002濃度為25062.5g/l時,作用F-7細胞，其抑制率為：(72.32.1)%(52.481.65)%。E002對S-7721和F-7細胞的I50值分別為：(1.960.03)和(

2、22.893.04)g/l;E003對S-7721細胞的I50值為：(1.230.11)g/l。結論金邊瑞香活性成分瑞香黃烷-對S-7721、F-7細胞,瑞香素對S-7721細胞的增殖均有顯著抑制作用，且呈現(xiàn)良好的劑量依賴性?！娟P鍵詞】金邊瑞香;抗腫瘤;噻唑藍法Abstrat：bjetiveTstudytheantiturativityfDaphnedrvar.arginataextrats-E002(daphndrinI)andE003(daphnetin)invitr.ethdsF-7andS-7721ellseretreatedrespetivelyithE002andE003atdif

3、ferentnentratins,thegrthinhibitryeffetsfE002,E003ereassessedusingtheTTassay.Results(1)Bthinhibitinrate(%)erefr86.92.2t50.80.6,henS-7721ellseretreatedithE002,E003inthenentratinrangef2501.95(g/l).(2)Inhibitinrate(%)erefr72.32.1t52.481.65,henF-7ellseretreatedithE002inthenentratinrangef25062.5(g/l).(3)I

4、50valueE002nS-7721andF-7ells(g/l)ere1.960.03and22.893.04;I50valueE003nS-7721ells(g/l)as:1.230.11.nlusinDaphndrinIhassignifiantinhibitryeffetnF-7andS-7721ellsinadse-dependentinvitr.DaphnetinhassignifiantinhibitryeffetnS-7721ellinadse-dependentinvitr.Keyrds：Daphnedrvar.arginata;Antitur;TTassay金邊瑞香(Dap

5、hnedravar.arginata)，又名睡香，具有抗炎、抑菌、鎮(zhèn)痛、調節(jié)免疫、抗缺氧、抗脂質過氧化延緩衰老等藥理活性17，其主要活性成分為雙黃酮類和香豆素類化合物8。本研究中所用瑞香黃烷-(E002)、瑞香素(E003)系從金邊瑞香中提取的兩種單體化合物，前者為雙黃酮類化合物，后者為香豆素類化合物。本研究觀察了E002、E003對兩種人實體瘤細胞人肝癌S-7721細胞及人乳腺癌F-7細胞的增殖抑制作用，為進一步研究抗腫瘤機制提供根據(jù)。1材料1.1藥物藥物E002(瑞香黃烷，daphndrinI，純度99.7%)和E003(瑞香素，daphnetin，純度99.6%)均為由南昌大學分析化學系

6、采用高速逆流色譜技術從金邊瑞香中進展別離純化并提供的單體化合物(分子構造見圖1)。其中瑞香黃烷是首次從該種植物中別離得到。藥物濃度均為1g/l，臨用前用1640培養(yǎng)液行12個梯度倍比稀釋，使終濃度為250，125，62.5，31.25，15.62，7.81，3.90，1.95，0.97，0.48，0.24，0.12g/l。圖1E002、E003分子構造1.2細胞F-7細胞株購自南京凱基生物公司，S-7721細胞株由江西省醫(yī)學科學研究所提供，采用常規(guī)培養(yǎng),培養(yǎng)液為含10%小牛血清的RPI1640，在37,5%2飽和濕度的孵箱中培養(yǎng),細胞處于對數(shù)生長期時用于實驗。2方法2.1細胞培養(yǎng)將細胞復蘇后，

7、接種于已加有67l含1640完全培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中，置于37，5%2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每兩天換液一次，當細胞生長至密度70%80%時，用0.25%胰蛋白酶消化傳代。待細胞養(yǎng)至第3代后，消化細胞調整到所需濃度備用。2.2抑瘤實驗采用TT比色法，取1.0105/l的對數(shù)生長期細胞，以每孔100l接種于96孔培養(yǎng)板中。12h后，于各實驗孔中參加不同濃度相應藥物100l/孔，每個濃度設3個平行孔;同時設陽性對照孔(參加12.5g/l阿霉素)、細胞對照孔、溶劑對照孔和空白對照孔。培養(yǎng)至44h時，每孔參加5g/l的TT20l。繼續(xù)培養(yǎng)4h后，棄去全部上清，每孔參加150l二甲基亞楓(DS)，振蕩后，在酶標

8、儀492n波長處測D值，實驗重復兩次。然后計算細胞生長抑制率：抑制率(%)=(1-加藥孔平均D值/對照孔平均D值)100%;然后計算出半數(shù)抑制濃度(I50)。2.3統(tǒng)計學方法采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，進展統(tǒng)計學分析。轉貼于論文聯(lián)盟.ll.3結果E002、E003為250，125，62.5，31.25，15.62，7.81，3.90，1.95g/l濃度時，作用于S-7721細胞，前者的抑制率(%)為：85.133.72，83.060.56，80.881.67，74.231.12，67.630.90，62.581.09，56.151.68，50.80.63;后者的抑制率(%)為：86.92.2

9、3，83.42.47，80.352.22，78.010.41，74.533.46，69.052.83，60.012.68，51.461.63。見圖2A。取E002為：250，125，62.5g/l濃度時，作用于F-7細胞，其抑制率(%)為：72.32.10，54.312.43，52.481.65。(見圖2B);E003對F-7細胞增殖抑制作用不明顯。E002作用于S-7721和F-7細胞的I50值(g/l)分別為：1.960.03和22.893.04;E003作用于S-7721細胞的I50值(g/l)為：1.230.11。4討論瑞香素(Daphnetin)系香豆素類化合物，具有強心、抗血栓形成

10、、鎮(zhèn)痛、抗炎、鎮(zhèn)靜催眠、抗瘧疾、殺蚜蟲及抗菌等多種作用。瑞香黃烷系雙黃酮類化合物。已有研究說明：雙黃酮類化合物和香豆素類化合物均具有良好的抗腫瘤活性9，10。但關于瑞香黃烷-和瑞香素的抗腫瘤活性卻鮮有報道。本實驗采用TT法，用從我省盛產(chǎn)植物金邊瑞香中提取的瑞香黃烷和瑞香素作用于人的兩種實體瘤細胞人肝癌S-7721細胞及人乳腺癌F-7細胞，觀察其是否具有抗腫瘤作用。結果說明瑞香黃烷-對S-7721、F-7細胞,瑞香素對S-7721細胞的增殖均有顯著抑制作用，且呈現(xiàn)良好的劑量依賴性;瑞香素對F-7細胞抑制作用不明顯。提示瑞香黃烷和瑞香素均具有一定的體外抗腫瘤活性，其詳細抗瘤機制還有待進一步深化研究

11、，而其抗腫瘤作用是否具有實用價值，還需動物試驗進一步證實?！緟⒖嘉墨I】1葉和楊，曾靖，楊敬格，等.金邊瑞香的抗炎癥作用J.贛南醫(yī)學院學報，2002，22(1)：7.2徐靜，傅穎媛.金邊瑞香對小鼠免疫細胞的影響J.廣東醫(yī)學，2022，26(9)：1207.3葉和楊，曾靖，胡曉，等.金邊瑞香的耐缺氧作用J.贛南醫(yī)學院學報，2002，22(4)：329.4葉和楊，汪秀榮，胡志萍，等.金邊瑞香對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用J.贛南醫(yī)學院學報，2022，25(5)：579.5葉和楊，熊小琴，王中平，等.金邊瑞香提取液鎮(zhèn)痛作用的實驗研究J.贛南醫(yī)學院學報，2022，24(5)：505.6葉和楊，周俐，曾靖，等.金邊瑞香對小鼠SD活性及DA含量的影響J.贛南醫(yī)學院學報，2022，23(3)：246.7陳水親，徐靜，黃彬紅，等.植物藥金邊瑞香對小鼠腸道Peyers法