雞骨草膠囊中梔子苷的含量測(cè)定

1、雞骨草膠囊中梔子苷的含量測(cè)定【摘要】目的建立雞骨草膠囊中梔子苷的hpl測(cè)定方法。方法采用lihrspher18色譜柱(5,4.6250)；以乙腈-0.1%磷酸溶液(1090)為流動(dòng)相；流速：1.0l/in,檢測(cè)波長(zhǎng)：238n,柱溫：35。結(jié)果梔子苷在0.141.68g范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,回歸方程為：y=1552.15x-6.42,r=0.9999；回收率為97.53%(rsd=1.24%,n=6)。結(jié)論方法穩(wěn)定、可靠,可用于該制劑的質(zhì)量控制?！娟P(guān)鍵詞】高效液相色譜法；雞骨草膠囊；梔子苷deterinatinfgenipsideinjiguaapsulebyhplangyan-hng,hen

2、xianguangxiyulinpharaeutial.ltd.,yulin537001,hinakeyrds：hpl；jiguaapsule；genipside雞骨草膠囊具有疏肝利膽、清熱解毒之功,用于急、慢性肝炎和膽囊炎屬肝膽濕熱證者,由雞骨草、梔子、茵陳等藥味組方。雞骨草為方中君藥,但由于該味藥的植物化學(xué)研究工作較薄弱,尚未有符合含量測(cè)定要求的對(duì)照品,無法對(duì)其進(jìn)展含量控制。茵陳為方中臣藥,綠原酸為其消炎利膽的主要有效成分1,但據(jù)資料顯示,方中另一味臣藥梔子也含有綠原酸2,由于該成分不具有唯一性,故未作為含量測(cè)定指標(biāo)。我們采用hpl法測(cè)定了梔子中梔子苷的含量,結(jié)果顯示,方法準(zhǔn)確可靠,可用于

3、本品的質(zhì)量控制。1儀器、試劑與樣品上海必能信bug-40型超聲清洗儀；agilent1100系列高效液相色譜儀(g1379adegasser、g1311aquatpup、g1313aals、g1316al、g1314avd)。梔子苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所提供,批號(hào)0749-9404,供含量測(cè)定用)。乙腈為色譜純,水為高純水,其它試劑均為分析純。雞骨草膠囊及缺梔子的陰性對(duì)照樣品由玉林制藥有限責(zé)任公司提供。2方法學(xué)考察及含量測(cè)定2.1色譜條件lihrspher18色譜柱(5,4.6250)；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液(1090)；流速：1.0l/in；檢測(cè)波長(zhǎng)：238n；柱溫：35；進(jìn)

4、樣量為10l。2.2溶液的制備精細(xì)稱取梔子苷對(duì)照品適量,加70%甲醇溶解制成每1l含梔子苷50g的溶液,即得。取裝量差異項(xiàng)下的本品研細(xì),取0.5g,精細(xì)稱定,加70%甲醇50l,稱重,超聲處理(功率500,頻率50khz)30in,放冷,用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,用微孔濾膜(0.45)濾過,取續(xù)濾液,即得。2.3線性與范圍精細(xì)稱取梔子苷對(duì)照品14.0g,置50l量瓶中,加甲醇使溶解并稀釋至刻度,搖勻,備用。分別精細(xì)汲取以上對(duì)照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0l,分別置10l量瓶中,加70%甲醇稀釋至刻度,搖勻,進(jìn)樣測(cè)定。以對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)

5、、峰面積積分值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為：y=1552.15x-6.42,r=0.9999。結(jié)果說明,梔子苷進(jìn)樣量在0.141.68g范圍內(nèi),與峰面積呈良好的線性關(guān)系。2.4精細(xì)度試驗(yàn)對(duì)同一梔子苷對(duì)照品溶液(濃度為56g/l),按正文擬訂的色譜條件,連續(xù)測(cè)定6次,結(jié)果峰面積平均值為864.1,rsd=0.69%。結(jié)果說明,本法的精細(xì)度較好。2.5重復(fù)性試驗(yàn)對(duì)同一批樣品(批號(hào)625020),按正文擬訂的方法平行測(cè)定6份,結(jié)果梔子苷的平均值為2.590g/粒(rsd=1.07%,n=6)。結(jié)果說明,本法的重復(fù)性較好。2.6穩(wěn)定性考察對(duì)同一供試品溶液(批號(hào)625020),在23h內(nèi),每隔一定

6、時(shí)間測(cè)定1次,共測(cè)定6次,試驗(yàn)說明,被測(cè)物穩(wěn)定。6次測(cè)定結(jié)果的平均值為2.597g/粒,rsd=0.69%。說明本柱穩(wěn)定性較好。2.7加樣回收率測(cè)定精細(xì)稱取含量(梔子苷的含量為2.590g/粒)的雞骨草膠囊(批號(hào)625020,平均粒重0.5010g)約0.25g,分別精細(xì)參加一定量的梔子苷對(duì)照品溶液,揮干溶劑后,按正文擬訂的方法提娶測(cè)定,計(jì)算回收率。結(jié)果梔子苷平均回收率為97.53%,rsd=1.24%(n=6),符合定量分析的要求,見表1。表1梔子苷加樣回收率測(cè)定結(jié)果略2.8專屬性試驗(yàn)按本品處方、制法制成不含梔子的陰性樣品。取缺梔子的陰性樣品,按供試品溶液制備項(xiàng)下的方法提取,測(cè)定。結(jié)果在梔子

7、苷峰相應(yīng)的保存時(shí)間幾乎無吸收峰,說明處方中其它成分對(duì)測(cè)定無干擾(見圖1)。2.9樣品測(cè)定按擬訂的含量測(cè)定方法,測(cè)定了本品5批樣品中的梔子苷含量,結(jié)果見表2。表25批樣品含量測(cè)定結(jié)果略3討論3.1流動(dòng)相的選擇本試驗(yàn)參照相關(guān)文獻(xiàn)2-7,結(jié)合本品的實(shí)際情況,以乙腈-水(1585)、乙腈-0.1%磷酸溶液(1090)、甲醇-0.1%磷酸溶液(2080)為流動(dòng)相試驗(yàn),結(jié)果乙腈-0.1%磷酸溶液(1090)能使所測(cè)成分梔子苷峰形較好,且與雜質(zhì)到達(dá)基線別離,別離度1.5,到達(dá)分析要求,應(yīng)選擇乙腈-0.1%磷酸溶液(1090)為流動(dòng)相。3.2測(cè)定波長(zhǎng)的選擇參照2022年版?中國(guó)藥典?(一部)梔子項(xiàng)下【含量測(cè)定

8、】項(xiàng)所使用波長(zhǎng)238n選擇作為測(cè)定波長(zhǎng)2。3.3提取條件的選擇本試驗(yàn)參照有關(guān)文獻(xiàn)2-6,對(duì)提取溶劑、提取時(shí)間進(jìn)展優(yōu)化選擇,結(jié)果采用70%或50%、30%的甲醇溶液超聲處理30in均可將梔子苷提取完全,50%、30%甲醇提取液較難濾過,故本試驗(yàn)選擇70%甲醇超聲處理30in作為提取條件?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1尉芹,馬希漢.綠原酸及其提取別離方法評(píng)述j.中成藥,2001,23(2)：135138.2鄔曉鷗,魯靜.高效液相色譜法測(cè)定梔子中綠原酸的含量j.中國(guó)中藥雜志,1996,21(10)：620621.3國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(一部)s.北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2022.173.4黃雪梅,蒙大平.rp-hpl測(cè)定龍膽瀉肝口服液中梔子苷的含量j.中成藥,2001,23(7)：489491.5蘆柏震,李心泓.hpl測(cè)定中肝合劑中芍藥苷及梔子苷的含量j.中