同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科ISO15189體系文件02甲肝抗體（HAV-IgM）測定

1、同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫組項(xiàng)目操作指導(dǎo)書TJYYJYKMY/XMZ202第2版標(biāo)題：甲肝抗體（HAV-IgM）測定第2章 第02號第 PAGE 4 頁 共 NUMPAGES 4 頁1. 目的：檢測血清標(biāo)本中的抗HAV-IgM抗體。2. 適用范圍：同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室。3. 項(xiàng)目名稱：甲肝抗體測定4. 檢測方法：酶免疫分析法。5. 檢測原理：采用兔抗-人IgM鏈包被反應(yīng)板，加入待測標(biāo)本，同時(shí)加入HAVAg、抗 -HAV-HRP，如待測標(biāo)本中含有抗-HAV-IgM時(shí)，就能與包被兔抗-人IgM鏈結(jié)合，并且與HAVAg、抗-HAV-HRP結(jié)合成復(fù)合物，加入TMB底物產(chǎn)生顯色反應(yīng)，反之則無顯色反應(yīng)

2、。6. 試劑：6.1 品牌：科華實(shí)業(yè)公司。6.2 包裝規(guī)格：48人份。6.3 內(nèi)含物：每盒試劑含以下成分：6.3.1 微孔反應(yīng)條：12孔X4；6.3.2 酶結(jié)合物：3.2mlX1瓶；6.3.3 陽性對照：1mlX1瓶；6.3.4 陰性對照：1mlX1瓶；6.3.5 洗滌液 (用前以蒸餾水作25倍稀釋)：30mlX1瓶；6.3.6 顯色劑A：4.0mlX1瓶；6.3.7 顯色劑B：4.0mlX1瓶；6.3.8 終止液：3.5mlX1瓶；6.3.9 HAVAg: 2.2mlX1瓶；6.3.10封片：3片；6.3.11說明書：1份；7 儀器品牌、型號：意大利Alisei全自動(dòng)酶免分析儀。8 操作步驟

3、：8.1 打印工作單:8.1.1 打開電腦及打印機(jī)電源，8.1.2 雙擊齊效檢驗(yàn)系統(tǒng)，登陸工號與密碼；8.1.3 雙擊報(bào)告處理，單擊標(biāo)本申請信息打開標(biāo)本申請明細(xì)信息查詢，打開左上角的所有信息，選擇未生成報(bào)告信息。8.1.4 在檢驗(yàn)項(xiàng)目處選擇HAV執(zhí)行查詢，點(diǎn)擊打印申請單，打印出工作單。8.2 排列待測標(biāo)本:根據(jù)工作單上的庫位號從標(biāo)本架中找出相應(yīng)標(biāo)本，并按工作單上的順序排列在Alisei全自動(dòng)酶免分析儀的樣本架上。8.3 裝載試劑：開啟Alisei，根據(jù)待測標(biāo)本數(shù)量，點(diǎn)擊編輯工作列表，出現(xiàn)試劑及酶標(biāo)板界面。按照屏幕所示放好洗板液，洗針液，標(biāo)本試管，預(yù)稀釋管和試劑。8.4 裝載酶標(biāo)板：點(diǎn)擊Alis

4、ei界面的裝卸反應(yīng)板按鈕進(jìn)行裝載反應(yīng)板，按項(xiàng)目順序進(jìn)行裝載。等所有項(xiàng)目酶標(biāo)板裝載完成后，點(diǎn)擊開始按鈕，機(jī)器開始檢測。8.5 Alisei分析儀檢測參數(shù)：試劑空 白陽性對照陰性對照標(biāo) 本（生理鹽水1：1000稀釋）單 孔雙 孔雙 孔單 孔100ul/孔37，20分鐘洗滌，洗滌液350ul/孔 5次抗原試劑50ul/孔酶結(jié)合物50ul/孔混勻，37，20分鐘洗滌，洗滌液350ul/孔 5次A液50ul/孔B液50ul/孔混勻，37，10分鐘終止液50ul/孔450/630mn讀取OD值8.6 結(jié)果：儀器自動(dòng)記錄OD值并可打印測定結(jié)果，同時(shí)傳入LIS中，發(fā)送報(bào)告詳見免疫報(bào)告發(fā)送程序。 8.7 結(jié)果判

5、斷：（陽性樣品OD值）（陰性對照平均OD值）2.1判斷為陽性，否則陰性。陰性對照OD值低于0.05作0.05計(jì)算。9. 參考范圍：正常人陰性。10 . 臨床意義：抗-HAV-IgM在亞臨床期即已出現(xiàn)，其滴度在感染后3個(gè)月維持1:1000以上，己被公認(rèn)為早期診斷甲型肝炎的依據(jù)。11. 病人準(zhǔn)備、標(biāo)本要求：標(biāo)本為血清時(shí)最好空腹采血，脂血、溶血不可使用。12.1 使用前試劑應(yīng)搖勻。12.2 試劑盒應(yīng)置28中保存。12.3 試劑盒內(nèi)容物及標(biāo)本從冷藏環(huán)境中取出，在37平衡30分鐘后方可使用。12.4 待測標(biāo)本不可用NaN3防腐。12.5 結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。12.6 不同批號的試劑不可混用。12.7 手工操作時(shí)，封片