免疫測定室內質控血清的應用

1、免疫測定室內質控血清的應用張 瑞衛(wèi)生部臨床檢驗中心第一頁，共二十一頁。免疫測定用室內質控血清的調整 隨著臨床實驗室檢驗水平的不斷提高和檢測試劑質量的不斷改進，原有的室內質控物已經不能滿足室內質控工作的需要，因此部中心對免疫測定用室內質控血清的含量進行了調整，同時改進了包裝。第二頁，共二十一頁。針對的檢測工程HBsAg抗HCV抗HIV梅毒螺旋體抗體提供不同含量的質控物是為了實驗室根據不同試劑的檢測值選擇適宜的質控物，使質控物的檢測值S/CO值在1.54之間。第三頁，共二十一頁。HBsAg質控血清定值的調整HBsAg定值單位改變：2004年，WHO研制了第二代HBsAg標準物質，并將定值單位從ng

2、/ml改為IU/ml?，F1IU/ml0.5ng/ml定值（調整前）定值（調整后）調整原因0.2IU/ml用于一些靈敏度較高的試劑0.5IU/ml0.5ng/ml1IU/ml 1ng/ml 2IU/ml 2ng/ml 4IU/ml5ng/ml 濃度較高1萬ng/ml “鉤狀效應”第四頁，共二十一頁。HBsAg室內質控品的選用定值適用試劑0.2IU/mlMurex，生物梅里埃試劑0.5IU/mlOrtho，Bio-Rad試劑，雅培i2000和Axsym檢測系統(tǒng)和配套試劑1IU/ml國產試劑盒（萬泰、新創(chuàng)、科華），血站和醫(yī)院用2IU/ml國產試劑盒（萬泰、新創(chuàng)、科華），醫(yī)院用4IU/ml國產試劑盒（

3、萬泰、新創(chuàng)、科華），醫(yī)院用第五頁，共二十一頁。抗HCV質控血清定值的調整及選用定值（調整前）定值（調整后）適用試劑1NCU/ml國產試劑盒（萬泰、新創(chuàng)、科華、麗珠）和DiaSorin的試劑1NCU/ml2NCU/mlMurex、Ortho等試劑2NCU/ml 4NCU/ml雅培i2000和Axsym檢測系統(tǒng)和配套試劑現1NCU/ml0.5NCU/ml第六頁，共二十一頁?？笻IV質控血清定值的調整及選用定值（調整前）定值（調整后）適用試劑1NCU/ml國產試劑盒（萬泰、新創(chuàng)、科華、麗珠）1NCU/ml2NCU/mlBio-Rad等試劑2NCU/ml 4NCU/ml進口試劑及配套儀器4NCU/ml

4、8NCU/ml進口試劑及配套儀器現1NCU/ml0.5NCU/ml1NCU/ml確實定：參考國際單位定值方法，采用5種或以上試劑盒，結果63的試劑盒按泊松分布計算檢測結果為陽性的值為1NCU/ml。第七頁，共二十一頁。梅毒螺旋體抗體定值的調整及選用定值（調整前）定值（調整后）適用試劑1NCU/ml（特異）國產試劑盒2NCU/ml（特異）國產試劑盒2NCU/ml（特異） 4NCU/ml（特異）進口試劑及/或配套儀器2NCU/ml（非特異）2NCU/ml（非特異）RPR、TRUST現1NCU/ml0.25NCU/ml第八頁，共二十一頁。本卷須知室內質控物僅用于相應工程的室內質量控制，不能用于陰陽性

5、結果的判斷。定值質控物不適合評價試劑盒整體性能是否合格,但可用于試劑的批內、批間變異和測定下限的評價質檢。如果需要對試劑進行比較評價和全面質檢請選用相應工程的臨床考核血清盤。第九頁，共二十一頁。臨床考核血清盤項目規(guī)格支數/套HBsAg0.5ml/支40抗HCV0.25ml/支40梅毒螺旋體抗體 0.5ml/支40第十頁，共二十一頁。HBsAg血清盤靈敏度特異性HBsAg變異的檢測能力：如G145R等Hook效應導致的假陰性第十一頁，共二十一頁。樣本編號含量(IU/ml)A（S/CO)B（S/CO)C（S/CO)D （S/CO)E（S/CO)1680.20.40.49.57.328101.00.

6、70.49.814.910200000040.837.636.227.124.116約160000040.043.941.047.135.08陰性20.91.50.40.70.719陰性9.47.719.20.40.427陰性16.60.30.80.50.6360.5-1.01.61.62.97.38.5370.5-1.01.11.33.03.86.838約0.20.60.81.82.43.9390.2-0.50.20.60.91.13.0HBsAg血清盤第十二頁，共二十一頁?？笻CV血清盤不同試劑廠家的ELISA試劑盒所用包被抗原的差異：目前抗HCV檢測ELISA試劑盒均采用HCV的基因工程

7、或合成多肽抗原核心區(qū)、NS3、NS4和NS5等包被固相，以間接法進行測定，上述HCV抗原的組合、來源及用量等方面的差異而造成檢測結果不一致。 抗HCV ELISA出現假陽性的主要原因有： 1.類風濕因子RF的干擾 2.高免疫球蛋白血癥 3.標本中超氧化物歧化酶SOD的干擾 4.用于固相包被的HCV基因工程抗原不純第十三頁，共二十一頁。抗HCV血清盤樣本編號ABCDEFGRIBANS4NS3CNS5281.221.870.650.780.770.670.3+337.8311.96.324.286.24.760.62+340.920.680.610.841.140.650.3+356.414.11

8、1.862.992.812.040.34+381.62.061.860.681.682.051.38+152.42 0.820.550.650.5 0.50.5第十四頁，共二十一頁。檢測方法1.檢測非特異性抗體-使用類脂質抗原的血清學試驗 ：RPR、TRUST2.檢測特異性抗體-使用密螺旋體抗原的血清學試驗：FTA-ABS、TPHA、TPPA 、ELISA 、WB梅毒螺旋體抗體血清盤第十五頁，共二十一頁。梅毒螺旋體抗體血清盤TP14TP17TP45TP47EUIgMEUIgGA(OD值)BC(OD值)D(OD值)RPR膠體金1+0.090.7363.19927.353.7763.604+4+

9、+0.3350.964.04127.612.1692.006+7+ +0.2561.120.65431.241.2150.978+23+/-+/-+0.2251.133.94830.241.8971.367+33+0.1600.082 1.329 0.90 0.027 0.662 +Hook效應 第十六頁，共二十一頁。原倍1：101：201：401：801：16013.3572.9462.0991.4280.9360.49042.2772.2561.9701.6151.0600.60371.7033.0662.9383.0233.1252.289232.3603.0892.8842.9752.

10、2581.481梅毒螺旋體抗體血清盤1、4、7、23號血清稀釋結果顯示存在hook效應。第十七頁，共二十一頁。IgM抗體漏檢梅毒螺旋體抗體血清盤TP14TP17TP45TP47EUIgMEUIgGA(OD值)BC(OD值)D(OD值)RPR膠體金1+0.090.7363.19927.353.7763.604+4+ +0.3350.964.04127.612.1692.006+7+ +0.2561.120.65431.241.2150.978+23+/-+/-+0.2251.133.94830.241.8971.367+33+0.1600.082 1.329 0.90 0.027 0.662 +第十八頁，共二十一頁。使用方法質控血清都經過滅活處理，但仍應按照有潛在生物傳染性樣本對待。HBsAg，抗HCV，抗HIV，梅毒螺旋體抗體的質控血清加樣時按待測病人原始樣本對待，依照試劑盒說明書進行操作。實驗室收到血清后應將血清保存在18以下，保質期為1年。使用時將血清在室溫復融，應注意待血清完全融化后平衡至室溫并充分混勻。復融后的血清如果當日未使用完且無污染，可保存在28，限1周內用完，防止反復凍融和重新分裝質控血清樣本。第十九頁，共二十一頁。謝 謝！第二十頁，共二十一頁。內容總結免疫測定室內質控血清的應用。隨著臨床實驗室檢驗水平的不斷提高和