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1、同濟大學附屬同濟醫(yī)院檢驗科血液組項目操作指導書TJYYJYKMY/XMZ131第2版標題: 糖元(PAS)染色第1章 第31節(jié)第 PAGE 4 頁 共 NUMPAGES 4 頁 目的:保證糖原染色檢測結(jié)果準確、可靠。 適用范圍:糖原染色 項目名稱:糖原(PAS)染色 檢測方法:過碘酸-雪夫反應法 原理:過碘酸能使細胞內(nèi)乙二醇基氧化成二醛,醛基和雪夫氏溶液起反應,使無色品 紅結(jié)合呈紅色反應,沉著含有糖元的細胞結(jié)構(gòu)上。標本上所能顯紅色的糖類主要為糖包括糖元,糖蛋白,粘蛋白,粘多糖和糖脂等。 試劑:6.1 品牌:上海虹橋樂翔醫(yī)用試劑技術公司6.2 貨號:6.3 包裝規(guī)格:5人份/盒6.4 內(nèi)含物:固
2、定液(保存于4)冰箱 1瓶過碘酸溶液 1管 雪夫氏溶液 15ml 儀器:顯微鏡8 操作步驟8.1 涂片滴加固定液固定35分鐘,水洗,晾干。8.2 滴加過碘酸于涂片上氧化10分鐘,水洗,晾干。8.3 放入雪夫氏溶液中,置37水溫箱510分鐘。8.4 取出后流水沖洗1020分鐘,晾干,鏡檢。8.5 可用1甲綠或蘇木精復染。8.6 結(jié)果:PAS 陽性物紅色顆粒或彌散狀,定位于細胞漿中。紅色的深度因所含糖元的量有關,量少呈淡紅色,量多呈深紅色。 線性范圍:無10 參考范圍:胞漿呈紅色或胞漿內(nèi)出現(xiàn)紅色顆粒為陽性反應,胞漿無紅色或胞漿內(nèi)無紅色顆粒為陰性反應。 臨床意義:正常血細胞的染色反應11.1 粒細胞
3、系統(tǒng):原始粒細胞為陰性反應,自早幼粒細胞至中性分葉核粒細胞均呈陽性反應,并隨細胞的成熟陽性反應的程度逐漸增強。嗜酸性粒細胞的顆粒本身不著色,而顆粒之間的胞漿呈紅色。嗜堿性粒細胞為陽性反應,陽性反應物質(zhì)為大小不一的紫紅色顆粒。 陽性反應程度的標準如下:():胞漿無色。():漿呈粉紅色,無顆粒。():漿呈紅色。():漿呈暗紅色。():漿呈紫紅色,顆粒極密。11.2 紅細胞系統(tǒng):幼紅細胞和紅細胞均呈陰性反應。紅白血病及紅血病時,幼紅細胞,甚至紅細胞可出現(xiàn)陽性反應。陽性反應程度的標準如下:():胞漿內(nèi)無紅色顆?;虬麧{無反應。():胞漿呈淺紅色或有少量紅色顆粒。():胞漿呈彌散紅色或有較粗大紅色顆粒。(
4、):胞漿呈深紅色或有粗大紅色顆粒。():胞漿呈紫紅色或有粗大塊狀紅色顆粒。11.3 單核細胞系統(tǒng):原始單核細胞為陰性反應,幼單核細胞為()陽性性反應,單核細胞為()()陽性反應,有時在胞漿的邊緣處陽性反應顆粒較粗大。陽性反應程度的標準同粒細胞系統(tǒng)。11.4 淋巴細胞:大多數(shù)淋巴細胞為陰性反應,少數(shù)淋巴細胞漿內(nèi)可出現(xiàn)顆粒狀陽性反應物質(zhì)。陽性反應程度的標準如下:():胞漿內(nèi)無紅色顆粒。():胞漿內(nèi)有少數(shù)(9個)紅色顆粒。():胞漿內(nèi)有粗大紅色顆?;蛏贁?shù)紅色塊狀物質(zhì)。():胞漿內(nèi)有多數(shù)粗大紅色顆粒并有紅色大塊狀物質(zhì)。11.5 巨核細胞系統(tǒng):巨核細胞為陽性反應,陽性反應物質(zhì)為紅色顆粒狀,有時為紅色塊狀。 血小板為陽性反應,陽性反應物質(zhì)為細顆粒狀,有時為紅色小塊狀。11.6 其他細胞:漿細胞一般為陰性反應,少數(shù)可呈陽性反應,陽性反應物質(zhì)為紅色細顆粒狀,巨噬細胞可呈陽性反應,陽性反應物質(zhì)為紅色細顆粒狀。 病人準備標本要求:采取病人末梢血 注意事項:13.1 標本新鮮13.2 染色時間要充分
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