同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科ISO15189體系文件07血凝常規(guī)檢測(cè)操作規(guī)程

1、同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科血液組項(xiàng)目操作指導(dǎo)書(shū)TJYYJYKMY/XMZ107第2版標(biāo)題：血凝常規(guī)檢測(cè)操作規(guī)程第1章 第7節(jié)第 PAGE 4 頁(yè) 共 NUMPAGES 4 頁(yè)1 目的：保證血凝常規(guī)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。2. 適用范圍：PT、APTT、TT、FBG 項(xiàng)目名稱：PT、APTT、TT、FBG 檢測(cè)方法：血漿凝固法5. 檢測(cè)原理：凝血酶原時(shí)間測(cè)定：在受檢血漿中加入組織浸出液和適當(dāng)鈣離子，觀察血漿凝固時(shí)間。如受檢血漿中凝血酶原、因子X(jué)、VII、V、纖維蛋白原總?cè)魏我环N物質(zhì)缺乏或存在抗凝物質(zhì)均可致凝固時(shí)間延長(zhǎng)?；罨糠帜蠲笗r(shí)間測(cè)定：如果血漿中存在內(nèi)源性凝血系統(tǒng)所需凝血因子加入適量的白陶土

2、腦磷脂懸液及鈣離子，白陶土可激活因子X(jué)II，驅(qū)動(dòng)內(nèi)源凝血系統(tǒng)，腦磷脂代替血小板第3因子，通過(guò)鈣離子作用可使血漿凝固。如果內(nèi)源系統(tǒng)發(fā)生障礙，凝固時(shí)間延長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)是檢測(cè)內(nèi)源凝血系統(tǒng)較敏感篩選試驗(yàn) 凝血酶時(shí)間測(cè)定：在凝血酶作用，纖維蛋白原轉(zhuǎn)為纖維蛋白。于血漿中加入標(biāo)準(zhǔn)化凝血酶溶液后，血漿凝固時(shí)間即為凝血酶時(shí)間。纖維蛋白原測(cè)定：根據(jù)因子I與凝血酶作用最終形成不溶性纖維蛋白的原理。以國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品為參比血漿制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，用凝血酶來(lái)測(cè)定血漿凝固時(shí)間與血漿中纖維蛋白原濃度呈負(fù)相關(guān)，從而得到纖維蛋白原的含量。6. 試劑6.1 品牌： DADE公司6.2 貨號(hào)：凝血酶原（凍干） OUHP49 白陶土腦磷脂混懸液 B

3、4218-2 25mmol/L CACL2溶液 自配 凝血酶（凍干） OWI-M13 纖維蛋白原 B4233-25 CLEAN I 清洗液 GSA500A6.3 包裝規(guī)格：凝血酶原（凍干） 10瓶/盒 每瓶10mL蒸餾水溶解 白陶土腦磷脂混懸液 10瓶/盒 5mmol/L CACL2溶液 自配 凝血酶（凍干） 10瓶/盒 每瓶5mL稀釋液溶解 纖維蛋白原（簡(jiǎn)裝） 10瓶/盒 每瓶1mL蒸餾水溶解 纖維蛋白原（套裝） 6瓶/盒 CLEAN I 清洗液 50mL/瓶 內(nèi)含物： 凝血酶原試劑盒組成 ：凝血酶原凍干粉 10瓶 白陶土腦磷脂混懸液試劑盒： 白陶土腦磷脂混懸液 10瓶 凝血酶試劑盒：凝血酶

4、凍干粉 10瓶稀釋液（25mL）1瓶 纖維蛋白原（簡(jiǎn)裝）：纖維蛋白原凍干粉 10瓶 纖維蛋白原（套裝）：纖維蛋白原凍干粉 6瓶 稀釋液（15mL）3瓶 定標(biāo)血漿凍干粉 1瓶（1mL蒸餾水溶解 ） 7. 儀器型號(hào)：SYSMEX CA15008. 操作步驟：8.1 標(biāo)本：前綴為02的條形碼真空管采集的血液標(biāo)本。血液凝固后，3000rpm離心10分鐘。8.2 質(zhì)控品I、質(zhì)控品II的稀釋?zhuān)好科考尤胝麴s水1mL，輕輕混勻，放置室溫10分鐘后， 上機(jī)測(cè)試（見(jiàn)凝血分析儀操作規(guī)程）。8.3 正常人標(biāo)本：在檢測(cè)前的標(biāo)本中，選取無(wú)凝血疾病障礙至少20位以上的血漿標(biāo)本，制成混合血漿，作為正常人對(duì)照標(biāo)本，結(jié)果輸入血凝

5、分析儀（見(jiàn)凝血分析儀操作規(guī)程）。 SYSMEX CA1500凝血分析儀標(biāo)本上機(jī)操作（見(jiàn)凝血分析儀操作規(guī)程）。注意：測(cè)定 標(biāo)本前必須先測(cè)定質(zhì)控品，未見(jiàn)失控才可測(cè)試標(biāo)本，若有失控查找原因并記錄。8.5 儀器測(cè)試完畢自動(dòng)把結(jié)果傳入電腦，接收數(shù)據(jù)見(jiàn)凝血分析儀電腦操作程序。9. 線形范圍：纖維蛋白原濃度0.25g/L_ 10g/L10. 參考范圍： PT: 9.7s12.7s APTT: 19.8s31.8s TT: 13.3s18.1s Fbg: 24.5g/l11. 臨床意義11.1 PT延長(zhǎng)： 見(jiàn)于先天凝血酶原、因子、和因子的單獨(dú)和聯(lián)合缺合或明顯減低，以及低（無(wú)）纖維蛋白原血癥；獲得性見(jiàn)于DIC、

6、原發(fā)性纖溶癥、維生素K缺乏癥、血循環(huán)中有抗凝物質(zhì)如口服抗凝劑、肝素和FDP存在。PT縮短：見(jiàn)于先天性因子V增多癥、口服避孕藥和血栓性疾病。11.2 APTT延長(zhǎng)：見(jiàn)于因子VIII、IX、XI、VII缺乏癥，且見(jiàn)于嚴(yán)重因子V、X，凝血酶原缺乏。血循環(huán)中有抗凝物質(zhì)時(shí)本試驗(yàn)也可延長(zhǎng)?？s短見(jiàn)于因子VII和因子V活性增高，DIC高凝期、血栓形成性疾病。11.3 TT延長(zhǎng)：見(jiàn)于血循環(huán)中FDP增高，血漿中肝素或肝素物質(zhì)增高，前置胎盤(pán)，羊塞，腫瘤播散，嚴(yán)重感染及DIC。11.4 Fbg含量增高見(jiàn)于纖溶性減低如高凝狀態(tài)，血栓栓塞性疾病。Fbg含量減低，表明纖溶活性增高，見(jiàn)于原發(fā)性纖溶亢進(jìn)，重癥肝炎，肝硬化，肝移植，外科手術(shù)，前置胎盤(pán)，羊水栓塞，腫瘤播散，嚴(yán)重感染及DIC。12. 病人準(zhǔn)備、標(biāo)本要求：0.109mol/L或0.129mol/枸櫞酸鈉作抗凝劑，抗凝劑與血液比1：9體積比，標(biāo)本以3000rpm，離心10分鐘13. 注意事項(xiàng)：13.1 嚴(yán)格按抗凝劑與血液比為1：9。13.2 血