苧麻根腐線蟲(chóng)綜合防控技術(shù)規(guī)程

1、第 PAGE11 頁(yè) 共 NUMPAGES11 頁(yè)苧麻根腐線蟲(chóng)綜合防控技術(shù)規(guī)程ICSDB43 湖 南 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn) DB43/T2022苧麻根腐線蟲(chóng)病綜合防控技術(shù)規(guī)程 Regulation for Integrated Prevention and Control Technology of Ramie root rot nematode disease2022-發(fā)布 2022-實(shí)施 湖南省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā) 布DB43/T2022I 目次前言 1 1 范圍 2 2 規(guī)范性引用文件 2 3 術(shù)語(yǔ)和定義 2 4 苧麻根腐線蟲(chóng)病發(fā)生流行規(guī)律 2 5 苧麻根腐線蟲(chóng)病害診斷 3 6 苧麻根腐線蟲(chóng)的

2、綜合防控方法 3 7 建立防治檔案 4 附錄 A（資料性附錄）苧麻根腐線蟲(chóng)病癥狀 5 附錄 B（規(guī)范性附錄）苧麻根腐線蟲(chóng)形態(tài)學(xué)鑒定、分子生物學(xué)檢測(cè)方法 6 附錄C （資料性附錄）苧麻根腐線蟲(chóng)病防治檔案 8DB43/T2022 1 前言 本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1-2022給出的規(guī)則起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。本標(biāo)準(zhǔn)由湖南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。本標(biāo)準(zhǔn)由湖南省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：湖南省植物保護(hù)研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：朱春暉、張德詠、劉勇、成飛雪、程菊娥、解嘯、孫書(shū)娥、王東偉 DB43/T2022 2苧麻根腐線蟲(chóng)病綜合防控技

3、術(shù)規(guī)程 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了苧麻根腐線蟲(chóng)病的術(shù)語(yǔ)和定義、發(fā)生流行規(guī)律、病害診斷、綜合防控方法、防治檔案等技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于苧麻根腐線蟲(chóng)病的綜合防控。2 規(guī)范性引用文件 下列文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB 4285農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn) GB 8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則 3 術(shù)語(yǔ)和定義 下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1 綜合防控技術(shù) Integrated Prevention and Control Technology 綜合防控是基于“預(yù)防為主、綜合防治”的植保方針，

4、以確保農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量和農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境安全為目標(biāo)，以減少農(nóng)藥使用為目的，優(yōu)先采取生態(tài)調(diào)控、生物防治、物理防治和科學(xué)用藥等資節(jié)約型、環(huán)境友好型技術(shù)來(lái)控制農(nóng)作物病蟲(chóng)害的植物保護(hù)措施。3.2 苧麻根腐線蟲(chóng)病 Ramie Root Rot Nematode Disease 由咖啡短體線蟲(chóng)引起的苧麻根腐線蟲(chóng)病。3.3 陽(yáng)性對(duì)照 Positive Control 凡是確定可以出現(xiàn)預(yù)期結(jié)果的處理，稱為陽(yáng)性對(duì)照。3.4 陰性對(duì)照 Negative Control 凡是確定不會(huì)出現(xiàn)預(yù)期結(jié)果的處理，稱為陰性對(duì)照。3.5 空白對(duì)照 Blank Control 凡是不加處理因素的處理，稱為空白對(duì)照。4 苧麻根腐線蟲(chóng)

5、病發(fā)生流行規(guī)律 DB43/T2022 3 苧麻根腐線蟲(chóng)病苧麻根腐線蟲(chóng)病是導(dǎo)致苧麻敗蔸的主要病害，苧麻根腐線蟲(chóng)的主要病原是咖啡短體線蟲(chóng)。病原線蟲(chóng)生活的適宜溫度為25-28，田間土壤溫度是影響其孵化和繁殖的重要條件，溫度高于33時(shí)繁殖量大大下降，溫度高于40或低于4時(shí)就很少活動(dòng)，65下10分鐘可導(dǎo)致死亡。苧麻根腐線蟲(chóng)在干燥或過(guò)濕土壤中，活動(dòng)受到抑制，而地勢(shì)高、土壤質(zhì)地疏松、鹽分低土壤適宜線蟲(chóng)活動(dòng)，所以砂土土壤往往發(fā)病較重。由于根腐線蟲(chóng)的入侵，引起根部皮層細(xì)胞產(chǎn)生壞死傷痕，從而極易遭受其它病原菌如鐮刀菌屬（Fusarium）、腐霉屬（Pythium）、以及黑腐霉（Thielaviopsis）等真菌的

6、侵害，形成復(fù)合感染，加重對(duì)苧麻的危害。5 苧麻根腐線蟲(chóng)病害診斷 5.1 病害田間診斷 苧麻根腐線蟲(chóng)病主要是由短體屬線蟲(chóng)為害而引起的，主要為害苧麻根部，特別是苧麻的蘿卜根。受害麻株初期根常出現(xiàn)黑褐色不規(guī)則病斑，稍凹陷，后漸擴(kuò)大為黑褐色大病斑，并深入木質(zhì)部使之變黑褐色海綿狀朽腐，質(zhì)地疏松似糠狀，病灶交接處常見(jiàn)黑綠色病變。而被害麻兜地上部分常常表現(xiàn)出麻株減少且矮小，葉片發(fā)黃，干旱時(shí)凋萎，發(fā)病嚴(yán)重時(shí)整根腐爛，麻株枯死。參見(jiàn)附錄A。5.2 形態(tài)學(xué)檢測(cè) 檢測(cè)方法和檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)附錄B 5.3 分子生物學(xué)檢測(cè) 檢測(cè)方法和檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)附錄B 6 苧麻根腐線蟲(chóng)病的綜合防控方法 6.1 防治原則 苧麻根腐線蟲(chóng)病的防治以

7、預(yù)防為主，重視農(nóng)業(yè)措施，合理使用農(nóng)藥，進(jìn)行綜合防治。防治方法主要有農(nóng)藝措施、化學(xué)藥劑防治以及生物防治。以“預(yù)防為主，綜合防治”為指導(dǎo)思想，根據(jù)苧麻根腐線蟲(chóng)的發(fā)生規(guī)律及危害特點(diǎn)，從農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)整體出發(fā)，保護(hù)生物多樣性，優(yōu)化生產(chǎn)環(huán)境，盡可能消滅和減少線蟲(chóng)來(lái)，盡量減少化學(xué)農(nóng)藥的使用角度開(kāi)展綜合防控，實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)安全、生態(tài)環(huán)境安全和菜產(chǎn)品質(zhì)量安全。6.2 農(nóng)業(yè)措施防治 田園衛(wèi)生：在定植前，結(jié)合整地，清除病殘?bào)w，鏟除田間及周邊雜草。及時(shí)拔除病株，帶出田外深埋或燒毀。農(nóng)藝措施：進(jìn)行抗性育種，選用抗病品種是防治苧麻根腐線蟲(chóng)病最直接有效的方法。苧麻不同品種間抗根腐線蟲(chóng)病差異顯著，如獨(dú)山圓麻、牛耳青和湘苧二號(hào)的抗性

8、強(qiáng)而黑皮蔸和黃殼早則較易感病。此外，實(shí)行高壟栽培，適時(shí)開(kāi)溝排水，降低地下水位，也可有效降低蟲(chóng)口密度，抑制根腐線蟲(chóng)的危害。6.3 藥劑防治 藥劑使用應(yīng)符合GB 4285和 GB 8321的相關(guān)規(guī)定。藥劑防治：對(duì)重病麻園有必要進(jìn)行施用化學(xué)藥劑進(jìn)行防治。如選用噻唑膦、辛硫磷、氯唑磷等化學(xué)農(nóng)藥進(jìn)行開(kāi)溝施藥，或是在苧麻移植前利用棉隆或威百畝進(jìn)行土壤熏蒸。DB43/T2022 46.4 生物防治 生物藥、肥防治：隨著環(huán)境保護(hù)意識(shí)的加強(qiáng)，苧麻根腐線蟲(chóng)病的化學(xué)防治也逐步轉(zhuǎn)向生物防治。利用生物農(nóng)藥或微生物肥料抑制苧麻根腐線蟲(chóng)病的發(fā)生。如用阿維菌素（乳油或顆粒劑）對(duì)苧麻根腐線蟲(chóng)病有較好的防治效治。施用微生物肥料可

9、有效改善苧麻生長(zhǎng)的微生態(tài)環(huán)境，使土壤中的有益菌增多，促進(jìn)土壤中有益菌群的形成，這些有益菌群可分泌酶類物質(zhì)，抑制根腐線蟲(chóng)的存活；同時(shí)，往土壤中施入生物肥可疏松土壤，利于根系的生長(zhǎng)，根系健壯，在一定程度上可提高根系的抗線蟲(chóng)能力等。在苧麻的頭麻冒芽期，取苧麻根部的土壤用貝曼漏斗法分離鑒定土壤中的線蟲(chóng)種類和數(shù)量。用光合細(xì)菌和BT菌劑分別稀釋200倍，混合，用噴霧器噴施苧麻根部，每蔸平均噴施液體100 mL，選在藥后12小時(shí)無(wú)雨的當(dāng)天噴藥，每隔5-7天噴施一次，連續(xù)噴施3次。頭麻收獲后，取苧麻根部的土壤用貝曼漏斗法分離鑒定土壤中的線蟲(chóng)種類和數(shù)量。收獲當(dāng)天即可用藥，用光合細(xì)菌和BT菌劑分別稀釋200倍，混

10、合，用噴霧器噴施苧麻根部，每蔸平均噴施液體100 mL，選在藥后12小時(shí)無(wú)雨的當(dāng)天噴藥，每隔5-7天噴施一次，連續(xù)噴施3次。二麻收獲后，取苧麻根部的土壤用貝曼漏斗法分離鑒定土壤中的線蟲(chóng)種類和數(shù)量。收獲當(dāng)天即可用藥，用光合細(xì)菌和BT菌劑分別稀釋200倍，混合，用噴霧器噴施苧麻根部，每蔸平均噴施液體100 mL，選在藥后12小時(shí)無(wú)雨的當(dāng)天噴藥，每隔5-7天噴施一次，連續(xù)噴施3次。苧麻冬培期，一般選在12月底或者1月初，用光合細(xì)菌和BT菌劑分別稀釋200倍，混合，用噴霧器噴施苧麻根部，每蔸平均噴施液體100 mL，選在藥后12小時(shí)無(wú)雨的當(dāng)天噴藥。7 建立防治檔案 在田間調(diào)查苧麻根腐線蟲(chóng)病發(fā)生情況時(shí)，

11、具體調(diào)查內(nèi)容參見(jiàn)附錄C。DB43/T20225 附錄 A （資料性附錄）苧麻根腐線蟲(chóng)病癥狀 苧麻根腐線蟲(chóng)病主要是由短體屬線蟲(chóng)為害而引起的，主要為害苧麻根部，特別是苧麻的蘿卜根。受害麻株初期根常出現(xiàn)黑褐色不規(guī)則病斑，稍凹陷，后漸擴(kuò)大為黑褐色大病斑，并深入木質(zhì)部使之變黑褐色海綿狀朽腐，質(zhì)地疏松似糠狀，病灶交接處常見(jiàn)黑綠色病變。而被害麻兜地上部分常常表現(xiàn)出麻株減少且矮小，葉片發(fā)黃，干旱時(shí)凋萎，發(fā)病嚴(yán)重時(shí)整根腐爛，麻株枯死。（圖 A1）。圖 圖 A1苧麻 根腐線蟲(chóng)病為害癥狀( 成飛雪 2022 年攝于湖南省沅江市) DB43/T2022 6附錄 B （規(guī)范性附錄）苧麻根腐線蟲(chóng)形態(tài)學(xué)鑒定、分子生物學(xué)檢測(cè)

12、方法一、 苧麻根腐線蟲(chóng)形態(tài)學(xué)鑒定 土壤中或者根中分離的線蟲(chóng)顯微鏡下形態(tài)圖為圖 B1。線蟲(chóng)形態(tài)的大小符合表 B1 數(shù)據(jù)，則為咖啡鍛體線蟲(chóng)引起的苧麻根腐線蟲(chóng)病害。表 表 B1 咖啡短體線蟲(chóng)形態(tài)特征測(cè)量值St (m)口針長(zhǎng)度 12.5-17.8 13.8-17.5 圖 圖 B1苧麻 根腐線蟲(chóng)病 病原咖啡短體線蟲(chóng) DB43/T20227 二、 苧麻根腐線蟲(chóng)分子生物學(xué)鑒定 取病麻兜及周圍土樣，分別采用淺盆法或蔗糖漂浮離心法分離苧麻根樣中或土樣中線蟲(chóng)。取分離的單條線蟲(chóng)用滅菌水清洗3次，放于0.2 mLPCR薄壁管中，-20冷凍10 min，加小量PKase，65消化1 h，95滅活10 min，離心上清液

13、作為PCR反應(yīng)模板。引物：5-CGTAACAAGGTAGCTGTAG-3和5-TCCTCCGCTAAATGATATG-3。94 預(yù)變性4 min，之后94變性30 sec，退火溫度62 30 sec，72延伸45 sec，28個(gè)循環(huán)，72延伸10 min。取擴(kuò)增產(chǎn)物8 L，加入到1.5%瓊脂糖凝膠（100 mL 1.5%瓊脂糖凝膠含有5 L DNAgreen）的點(diǎn)樣孔內(nèi)。電泳緩沖液1_TAE，120 V，電泳30 min。電泳結(jié)束后，取出瓊脂糖凝膠，通過(guò)凝膠成像儀觀察結(jié)果并拍照記錄，擴(kuò)增片段與預(yù)期目標(biāo)條帶大小一致，則結(jié)果判定為陽(yáng)性，未擴(kuò)增出預(yù)期大小條帶，則結(jié)果判定為陰性；若陽(yáng)性對(duì)照未擴(kuò)增出預(yù)期大小片段或空白對(duì)照擴(kuò)增出任何條帶，則檢測(cè)結(jié)果失