天山巖黃芪根中多糖的提取及含量測(cè)定

1、天山巖黃芪根中多糖的提取及含量測(cè)定【關(guān)鍵詞】天山巖黃芪根;,多糖含量;,分光光度法摘要：目的研究天山巖黃芪根中多糖的含量。方法采用分光光度法測(cè)定天山巖黃芪根中多糖的含量，以葡萄糖為對(duì)照品，以苯酚-濃硫酸為顯色劑，在486n處測(cè)定樣品溶液的吸光度。結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)曲線為A=51.654+0.0372，r=0.9998，RSD為1.28%，1.50%。結(jié)論該方法操作簡(jiǎn)單，靈敏度高。關(guān)鍵詞：天山巖黃芪根;多糖含量;分光光度法Abstrat:bjetiveTstudythequantityfPlysaharideinthertsfHedysaruseenviiRegeletHerd.ethdsUsesethd

2、inspetrphtetritdeterinethePlysaharideinthertsfHedysaruseenviiRegeletHerd.Takethegluseastheparisn,takethephenl-strngsulfuriaidasthedevelper,=486ndeterinatinsapleslutinattratstheluinsity.ResultsThestandardurveasA=51.654+0.0372,r=0.9998,RSDas1.28%and1.5%(n=5).nlusinThisethdissiple,sensitiveandaurate.Ke

3、yrds:HedysaruseenviiRegeletHerd;Plysaharide;SX-spetrphtetry豆科巖黃芪屬植物，具有補(bǔ)氣固表、利尿托毒、排膿、斂瘡生肌之功能1?，F(xiàn)代藥理研究證明其有強(qiáng)心、利尿、降壓、護(hù)肝、抗腎炎和進(jìn)步免疫等作用。該屬植物化學(xué)成分較復(fù)雜，其中具有生物活性的成分有多糖、木質(zhì)素類、黃酮類化合物、香豆苯醚類、生物堿類、皂苷類、甾體類、氨基酸、微量元素等眾多的生物活性物質(zhì)28。天山巖黃芪HedysaruseenviiRegeletHerd為豆科(Leguinsea)巖黃芪屬(HedysaruLinn.)植物，分布于新疆烏魯木齊、伊犁、阿勒泰、塔城等地區(qū)，經(jīng)過(guò)調(diào)研和

4、文獻(xiàn)查新得知，對(duì)天山巖黃芪中多糖的提取及含量測(cè)定未見(jiàn)報(bào)道。因此，為了資源開(kāi)發(fā)，我們首次對(duì)天山巖黃芪中多糖的提取及含量測(cè)定進(jìn)展研究。多糖不僅是機(jī)體的重要組成局部，還具有進(jìn)步機(jī)體免疫、抗菌、抗病毒、抗衰老、抗腫瘤、抗突變、降血脂、降血糖、防輻射以及改善動(dòng)物消費(fèi)性能等多種生物活性，同時(shí)由于它自身對(duì)細(xì)胞毒性極小，對(duì)正常細(xì)胞影響很小，因此多糖作為藥物對(duì)于治療多種免疫缺損疾病和自身免疫疾病有顯著的效果。為此，我們采用可見(jiàn)分光光度法對(duì)天山巖黃芪根中多糖的含量進(jìn)展了測(cè)定，為今后進(jìn)一步地研究、開(kāi)發(fā)該藥用植物資源提供參考。1材料與試劑1.1樣品來(lái)源天山巖黃芪6月份采自新疆烏魯木齊東山區(qū)，采后洗凈，晾干，60烘干，

5、粉碎后過(guò)60目篩備用。1.2儀器與試劑SX721分光光度計(jì)(上海第三分析儀器廠)，紫外分光光度儀，超聲儀(SK8210HP)，水浴鍋，酒精計(jì)，漏斗，分液漏斗，無(wú)水葡萄糖，苯酚分析純，濃硫酸，95%乙醇，氯仿，正丁醇，活性碳。2方法與結(jié)果2.1多糖的提取與精制9,10天山巖黃芪根粉100g加水適量超聲提取3次，30in/次，過(guò)濾，合并濾液，濃縮，加95%醇至含醇量為80%，靜置過(guò)夜4，過(guò)濾，別離出沉淀，加適量水溶解，加95%醇至含醇量為80%，再靜置過(guò)夜4，過(guò)濾，別離出沉淀，加水溶解，除蛋白氯仿正丁醇=41，共除20次，加活性炭脫色，抽濾，加95%醇至含醇量為80%，靜置過(guò)夜4，過(guò)濾，別離出沉淀

6、，冷凍枯燥得多糖0.5051g，密封備用。2.2溶液的制備2.2.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精細(xì)稱取105枯燥至恒重的葡萄糖0.1g，置100g容量瓶中，加蒸餾水至刻度，再精細(xì)汲取10l于另一容量瓶中，再加蒸餾水至刻度，搖勻備用，得0.1g/l的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。2.2.2苯酚溶液的制備稱取苯酚100g，加鋅片0.1g，NaH30.05g，蒸餾，搜集182餾分，稱取此餾分5g，加蒸餾水95l，置棕色瓶中備用，得濃度為5%的苯酚溶液。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.2.3天山巖黃芪多糖液的制備精細(xì)稱取枯燥至恒重的天山巖黃芪多糖0.1g，置100g容量瓶中，加蒸餾水至刻度，再精細(xì)汲取10l于另一容量瓶中，再加

7、蒸餾水至刻度，搖勻備用，得0.1g/l的天山巖黃芪多糖溶液。2.3最大吸收波長(zhǎng)的選擇分別配制0.1g/l的葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、醛糖溶液，分別精細(xì)汲取1l于具塞試管中，分別加苯酚試液1l，搖勻，迅速加濃硫酸5l，振搖2in后，旋轉(zhuǎn)于沸水浴中加熱15in，取出置冷水中冷卻置室溫，以苯酚-濃硫酸溶液為空白，用紫外分光光度儀在400800n范圍內(nèi)，掃描光譜圖，得上述糖溶液的最大吸收分別為486，488，479，488，479n。以同樣的方法處理天山巖黃芪多糖樣品溶液，在486n處有最大吸收。2.4葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精細(xì)汲取配制的0.1g/l的標(biāo)準(zhǔn)溶液0，0.2，0.4，0.6，0.

8、8，1.0l于具塞試管中，分別加蒸餾水1.0，0.8，0.6，0.4，0.2，0l，分別給試管編號(hào)。分別加苯酚試液1l，搖勻，迅速加濃硫酸5l，振搖2in后，旋轉(zhuǎn)于沸水浴中加熱15in，取出置冷水中冷卻置室溫，以苯酚-濃硫酸溶液為空白，于486n處測(cè)吸光度,得回歸方程A=51.654+0.0372，r=0.9998n=5，線性關(guān)系較好。2.5測(cè)定換算因子f精細(xì)稱取已枯燥至恒重的天山巖黃芪多糖4.048g于100l容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，得多糖供試品溶液。精細(xì)汲取該溶液2l，按“標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下操作，測(cè)定486n處的吸光度為2.9322，由回歸方程計(jì)算供試品中葡萄糖的含量為0.056g/

9、l，按下式計(jì)算f。f=/,式中為供試液中天山巖黃芪多糖的量4.048g，由公式得f=3.614n=3。2.7精細(xì)度實(shí)驗(yàn)精細(xì)汲取葡萄糖對(duì)照品溶液0.1g/l0.4l，5份，天山巖黃芪多糖供試液0.1g/l0.4l，5份，按“標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下的操作，分別測(cè)定486n處的吸光度，計(jì)算得RSD1=1.28%，RSD2=1.50%。3討論通過(guò)對(duì)天山巖黃芪根中多糖的含量測(cè)定，可知其中多糖含量在5.23%9.13%之間，可見(jiàn)用分光光度法測(cè)定天山巖黃芪根中多糖的含量是可行的。本方法穩(wěn)定可靠，簡(jiǎn)單易行。本實(shí)驗(yàn)可為天山巖黃芪的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)提供一定的理論根據(jù)。參考文獻(xiàn)：1國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典，部S.北京：化學(xué)工業(yè)出版社

10、，2022：104.2海力茜,梁鴻,趙玉英,等.多序巖黃芪化學(xué)成分研究J.中國(guó)中藥雜志,2002,27(11):843.3海力茜,張慶英,梁鴻,等.多序巖黃芪化學(xué)成分研究J.藥學(xué)學(xué)報(bào),2022,38(8):592.4海力茜,張慶英,趙玉英,等.多序巖黃芪化學(xué)成分研究J.中國(guó)中藥雜志,2022,29(5):432.5徐建軍,海力茜，王小青,等.新疆紅芪化學(xué)成分研究J.華西藥學(xué)雜志，2022,20(3):214.6海力茜，張，徐建軍,等.HPL法測(cè)定新疆紅芪中芒柄花素的含量J.華西藥學(xué)雜志，2022,20(3):214.7徐建軍，海力茜，凱賽爾.新疆紅芪化學(xué)成分研究J.華西藥學(xué)雜志，2022,21(1):47.8王小青,海力茜