植物葉綠素、類胡蘿卜素含量試劑盒說(shuō)明書

1、Word文檔 植物葉綠素、類胡蘿卜素含量試劑盒說(shuō)明書 規(guī)格：100 管/96 樣 植物葉綠素、類胡蘿卜素含量試劑盒說(shuō)明書 微量法 留意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做猜測(cè)定。 測(cè)定意義 植物葉綠素、類胡蘿卜素廣泛存在于綠色植物組織中，其含量與光合作用、養(yǎng)分狀況親密相關(guān)，是反應(yīng)植物生長(zhǎng)狀況的重要指標(biāo)。 測(cè)定原理 依據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見(jiàn)光譜的汲取，在某一特定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量。依據(jù)朗伯比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C 和液層厚度L成正比，即ACL式中：比例常數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可通過(guò)測(cè)定已知濃度的純物質(zhì)在不同波

2、長(zhǎng)下的吸光度而求得。假如溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)， 則此混合液在某一波長(zhǎng)下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長(zhǎng)下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。測(cè)定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量，只需測(cè)定該提取液在三個(gè)特定波長(zhǎng)下的吸光度A，并依據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測(cè)定葉綠素a、b時(shí)為了排解類胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長(zhǎng)選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大汲取峰。 自備試驗(yàn)用品及儀器 天平、研缽、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、10mL玻璃試管，錫箔紙。 試劑組成和配制 提取液：液體 1000mL，4保存。（自備，無(wú)水乙醇：丙酮=1:2） 試

3、劑一：粉劑1 瓶，4保存。 測(cè)定操作 1.稱取約新奇植物葉片或其它綠色組織，去掉中脈，稱取約 0.1g，剪碎，用蒸餾水洗潔凈。 2.加入1mL蒸餾水，少量試劑一（約 50mg），在黑暗或弱光條件下充分研磨，轉(zhuǎn)入10mL玻璃試管。 3.用提取液沖洗研缽，將全部沖洗液轉(zhuǎn)入玻璃試管，用提取液補(bǔ)充至10mL，玻璃試管置于黑暗條件下或者包上錫箔紙浸提3h，觀看試管底部組織殘?jiān)耆儼讋t提取完全，若組織殘?jiān)赐耆儼?，連續(xù)浸提至其完全變白。 4.取浸提液200L于微量石英比色皿/96孔板，提取液調(diào)零，測(cè)定663nm、645nm和470nm處吸光值，分別記為A663、A645 和A470。 計(jì)算公式 微量石

4、英比色皿計(jì)算方法： 葉綠素a含量（mg/g）=（12.7 A663-2.69A645）V 提Dm1000 = 0.01（12.7A663-2.69A645）Dm 葉綠素b含量（mg/g）=（22.9A645-4.68A663）V 提Dm1000 = 0.01（22.9A645-4.68A663）Dm 葉綠素總含量（mg/g）=（20.21A645+8.02A663）V 提Dm1000 = 0.01（20.21A645+8.02A663）Dm 類胡蘿卜素濃度（mg/g）=【（1000A470-3.27Ca-104Cb）229】V 提Dm1000 =0.01【（1000A470-3.27Ca-10

5、4Cb）229】Dm 96孔板計(jì)算方法： 葉綠素a含量（mg/g）=2（12.7 A663-2.69A645）V 提Dm1000 = 0.02（12.7A663-2.69A645）Dm 葉綠素b含量（mg/g）=2（22.9A645-4.68A663）V 提Dm1000 = 0.02（22.9A645-4.68A663）Dm 葉綠素總含量（mg/g）=2（20.21A645+8.02A663）V 提Dm1000 = 0.02（20.21A645+8.02A663）Dm 類胡蘿卜素濃度（mg/g）=2【（1000A470-3.27Ca-104Cb）229】V 提Dm1000 =0.02【（100

6、0A470-3.27Ca-104Cb）229】Dm V 提：提取液體積，10mL；D：稀釋倍數(shù)；m：樣本質(zhì)量，g 留意事項(xiàng) 1.色素對(duì)光敏感，研磨和提取等操作盡量避光或者在弱光下進(jìn)行。 2.肯定要浸提至組織殘?jiān)耆儼?，否則提取不充分。 3.用提取液沖洗研缽肯定要沖洗至全部的綠色物質(zhì)被轉(zhuǎn)移至玻璃試管。 4.測(cè)定時(shí)吸光值超過(guò) 1，可進(jìn)行適當(dāng)稀釋。 從2021年開頭我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)試驗(yàn)外包及論文潤(rùn)色服務(wù)，幫助客戶各類試驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色，是客戶您值得信任的科研合作伙伴! 假如您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無(wú)法完成您的課題討論，歡迎您與我們聯(lián)系。 試驗(yàn)代做服務(wù)： 免疫組化IHC染色試驗(yàn)服務(wù) 細(xì)胞、組織TUNEL凋亡染色試驗(yàn)服務(wù) 試劑盒免費(fèi)代檢測(cè) 試驗(yàn)室代做試驗(yàn)項(xiàng)目 透射電鏡服務(wù)試驗(yàn)服務(wù) 石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡 核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色試驗(yàn)服務(wù) 免疫共沉淀（CHIRP）試驗(yàn) RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀（RIP）試驗(yàn)代做 酶聯(lián)免疫（ELISA）技術(shù)服務(wù) 雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒 喹諾酮類快速檢測(cè)試劑盒 組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù) 染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)試驗(yàn)服務(wù) 多因子液相芯片技術(shù)（Luminex）試驗(yàn) 免疫細(xì)胞化學(xué)ICC試驗(yàn)服務(wù) ATP/ADP檢測(cè)試驗(yàn)服務(wù) 蛋白雙向(2-D)電泳試驗(yàn)服務(wù) 蛋白相互作