關(guān)于生防木霉拮抗黃瓜枯萎病菌的初步研究

1、關(guān)于生防木霉拮抗黃瓜枯萎病菌的初步研究摘要木霉是一種重要的生防菌,對(duì)黃瓜枯萎病菌有很強(qiáng)的拮抗作用,主要作用方式有:競爭、重寄生、抗生、溶菌作用。溫室盆栽試驗(yàn)顯示,木霉可顯著防治黃瓜枯萎病菌。關(guān)鍵詞木霉;黃瓜枯萎病菌;生防木霉(trihderaspp.)屬真菌界、雙核菌門、半知菌亞門、絲孢綱、叢梗孢目、叢梗孢科、真菌屬,是迄今為止研究和應(yīng)用最多的一類生防菌1。木霉的生防機(jī)制復(fù)雜,主要包括競爭、重寄生、抗生、溶菌等2。研究木霉對(duì)病原菌的作用機(jī)制及防治效果,可以優(yōu)選木霉菌株,從而進(jìn)步生防效率。1材料與方法1.1試驗(yàn)材料以病株上別離的黃瓜枯萎病菌(fusariuxyspruf.sp.uuerinu)為

2、拮抗對(duì)象,土壤中別離的木霉菌株為拮抗菌。1.2試驗(yàn)方法1.2.1競爭作用。采用對(duì)峙培養(yǎng)法3,在直徑為9的pda平板一側(cè)接種直徑為5的病原真菌菌絲塊,在平板另一側(cè)接種拮抗菌,28共培養(yǎng),觀察兩菌的生長情況。1.2.2重寄生作用。在pda培養(yǎng)基中央放置1塊2020無菌蓋玻片,在左側(cè)距蓋玻片40處接種木霉,右側(cè)距蓋玻片20處接種黃瓜枯萎病菌,28恒溫培養(yǎng)。取下蓋玻片,于顯微鏡下觀察菌絲體的作用方式。1.2.3抗生作用。在裝有100lpdb的三角瓶中接入直徑5的木霉菌塊,28、150rp培養(yǎng)6d,取濾液離心后過0.22細(xì)菌濾器。在90l、45的pda中參加10l上述濾液,搖勻倒成平板,接種直徑為5的黃

3、瓜枯萎病菌菌塊。28恒溫培養(yǎng),觀察生長情況。1.2.4溶菌作用。將培養(yǎng)4d的木霉發(fā)酵液8000rp離心10in。取15l上清液倒入培養(yǎng)皿中,接入黃瓜枯萎病菌菌塊。淺層培養(yǎng)5d后觀察生長情況。以高溫滅菌的木霉上清液中培養(yǎng)的病菌菌塊為對(duì)照。1.2.5盆栽試驗(yàn)。將黃瓜種子經(jīng)70%乙醇消毒1in,2%nal消毒5in,55溫水浸1520in,25浸泡23h,無菌水沖洗3次,2530下催芽12d。將黃瓜枯萎病菌接種到麩皮玉米粉為31的培養(yǎng)基中,28恒溫箱中培養(yǎng)至長滿整個(gè)三角瓶。將催芽根本一致的黃瓜苗在木霉菌懸液(約1108fu/l)中浸1h,取出于滅菌濾紙片上枯燥1h后,播種于拌有黃瓜枯萎病菌制劑的土壤

4、中。以無菌水浸種處理為對(duì)照。2結(jié)果與分析2.1競爭作用平皿對(duì)峙試驗(yàn)顯示,木霉生長迅速,可快速占據(jù)空間,有很強(qiáng)的生長競爭優(yōu)勢(shì),能有效抑制黃瓜枯萎病菌的生長。2.2重寄生作用顯微鏡下觀察到木霉菌絲體纏繞著黃瓜枯萎菌絲生長,并在病菌菌絲上產(chǎn)生大量分枝,產(chǎn)生寄生作用。2.3抗生作用在pda培養(yǎng)基中參加10%的木霉發(fā)酵液后,黃瓜枯萎病菌菌絲生長不旺盛,與對(duì)照有顯著的差異。2.4溶菌作用在未滅菌的木霉上清液中培養(yǎng)的黃瓜枯萎菌塊,僅有細(xì)小菌絲的生長,數(shù)量較少;而在滅菌后的上清液中,黃瓜枯萎菌生長旺盛,形成大塊菌絲團(tuán)。2.5盆栽防效試驗(yàn)盆栽試驗(yàn)結(jié)果說明,與對(duì)照相比,木霉浸種處理的黃瓜幼苗死亡率為25.0%,顯

5、著低于對(duì)照的66.7%。3結(jié)論與討論作為平安而環(huán)境友好的生防因子,木霉在田間的施用可有效地防治作物病害,從而防止大量使用農(nóng)藥導(dǎo)致病原菌抗藥性的產(chǎn)生、作物農(nóng)藥含量超標(biāo)及環(huán)境污染等問題4-6。因此,對(duì)木霉生防機(jī)制深化而全面的研究,將對(duì)綠色農(nóng)業(yè)的可持續(xù)開展產(chǎn)生重要的推動(dòng)作用。4參考文獻(xiàn)1辛雅芬,商金杰,高克詳.拮抗木霉菌的生防機(jī)制研究進(jìn)展j.東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2022,33(4):88-91.2harang,hellr,viterba,etal.trihderaspeies-pprtunisti,avirulentplantsybintsj.nature,2022(2):43-56.3蒲金基,曾會(huì)才.綠色木霉ltr12-1對(duì)黃瓜枯萎病菌防治作用機(jī)制的初步研究j.熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,22(4):22-25.4呂天