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1、實(shí)驗(yàn)八葉綠體中色素的提取和分離教學(xué)目的 初步掌握提取和分離葉綠體中色素的方法。 探索葉綠體中有幾種色素 。實(shí)驗(yàn)原理 葉綠體中的色素能溶解在丙酮( 有機(jī)溶劑 , 酒精 、 汽油 、 苯 、 石油醚等 ) 中 , 所以用丙酮可提取葉綠體中色素。 色素在層析液中溶解度不同 , 溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散得快,溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散得慢, 因而可用層析液將不同的色素分離。實(shí)驗(yàn)程序) 稱取 5g 綠色葉片并剪碎提取色素) 加入少量 sio2 、 caco3 和 5ml 丙酮 收集到試管內(nèi)并塞緊管口) 將干燥的濾紙剪成6cm 長(zhǎng) , 1cm 寬的紙條 , 剪去一端兩角
2、( 使層析液同時(shí)到達(dá)濾液細(xì)線 )制濾紙條) 在距剪角一端1cm 處用鉛筆畫線) 用毛細(xì)管吸少量的濾液沿鉛筆線處小心均勻地劃一條濾液細(xì)線濾液劃線 TOC o 1-5 h z ) 干燥后重復(fù)劃2-3 次1 ) 向燒杯中倒入3ml 層析液( 以層析液不沒及濾液細(xì)線為準(zhǔn))紙上層析 ( 2 ) 將濾紙條尖端朝下略微斜靠燒杯內(nèi)壁, 輕輕插入層析液中3 ) 用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯觀察結(jié)果 : 濾紙條上出現(xiàn)四條寬度、 顏色不同的彩帶( 如下圖 )最寬: 葉綠素a ;最窄: 葉綠素b ;相鄰色素帶最近: 葉綠素 a 和葉綠素 b ;相鄰色素帶最遠(yuǎn) : 胡蘿卜素和葉黃素。實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵如菠菜葉 、 棉花葉 、 洋槐葉等 。
3、 選材時(shí)應(yīng)注意選擇鮮嫩、 色濃綠 、 無(wú)漿汁的葉片 畫濾液細(xì)線時(shí), 應(yīng)以細(xì) 、 直 、 顏色濃綠為標(biāo)準(zhǔn), 重復(fù)畫線時(shí)必須等上次畫線干燥衙再進(jìn)行 , 重復(fù) 2-3 次 。 層析時(shí)不要讓濾液細(xì)線觸及層析液。注意事項(xiàng) 因丙酮和層析液都是易揮發(fā)且有一定毒性的有機(jī)溶劑 , 所以研磨要快, 收集的濾液要用棉塞塞住 , 層析時(shí)要加蓋, 盡量減少有機(jī)溶劑的揮發(fā) 。 在研磨時(shí)要加少許二氧化硅 , 目的是為了研磨充分 , 有利于色素的提取 ; 加少許碳 酸鈣 TOC o 1-5 h z 的目的是為了防止研磨過(guò)程中 , 葉綠體中的色素受到破壞。 分離色素時(shí), 一定不要讓濾紙條上的濾液細(xì)線接觸到層析液, 這是因?yàn)樯?/p>
4、易溶解在層析液中 , 導(dǎo)致色素帶不清晰, 影響實(shí)驗(yàn)效果?!?同類題庫(kù) 】 下列哪一種液體不能作為葉綠體中色素提取液?( c )a 丙酮溶液 b 酒精溶液 c 水溶液 d 汽油 在葉綠體中色素的提取與分離實(shí)驗(yàn)中 , 擴(kuò)散速度最快的色素是( d )a 葉綠素 ab 葉綠素 b c 葉黃素 d 胡蘿卜素 將菠菜葉表皮細(xì)胞和人的口腔上皮細(xì)胞制成裝片 , 從蓋玻片一側(cè)滴入 30%的蔗糖溶液, 另一側(cè)用吸水紙重復(fù)吸收幾次, 分別放在顯微鏡下觀察, 其結(jié)果是 (d)a 前者發(fā)質(zhì)壁分離, 后者也發(fā)生質(zhì)壁分離b 前者發(fā)生質(zhì)壁分離, 后者破裂c 前者發(fā)質(zhì)壁分離, 后者質(zhì)壁分離復(fù)原d 前者發(fā)生質(zhì)壁分離, 后者皺縮
5、如果沒有丙酮和菠菜葉, 要保證分離后色素帶清晰, 可以用來(lái)替代的最佳實(shí)驗(yàn)材料是(a)a 酒精和麥苗b 酒精和大白菜c 蒸餾水和大白菜d 蒸餾水和麥苗 用韭菜做“葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)” , 下列不能用作提取劑的是( a )a 水 b 丙酮 c 酒精 d ccl4 為了提取綠色植物葉綠體中的色素, 在研磨綠葉時(shí)加入少許碳酸鈣 , 其作用是 ( b )a 調(diào)節(jié) ph , 加速色素溶解b 調(diào)節(jié) ph , 防止葉綠素被破壞c 使綠葉研磨充分d 有利于四種色素的分開 在研磨綠葉時(shí), 下列哪種物質(zhì)不需要加入 ( b )a 丙酮b 層析液 c 碳酸鈣d 二氧化硅( 多選 ) 某學(xué)生在做“葉綠體色素的提取
6、和分離實(shí)驗(yàn)” 時(shí) , 收集到的濾液呈淡綠色, 其原因可能是( ac )a 葉片較老較黃b 加入的二氧化硅多了些c 研磨不充分d 漏斗基部塞的脫脂棉多了些 做色素提取和分離實(shí)驗(yàn)的正確裝置是圖中 ( d ) 在進(jìn)行葉綠素提取和分離實(shí)驗(yàn)時(shí), 不能讓層析液沒及濾液細(xì)線的原因是( c )a 濾紙條上幾種色素會(huì)擴(kuò)散不均勻而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果b 濾紙條上濾液細(xì)線會(huì)變粗而使色素太分散c 色素會(huì)溶解在層析液中而使結(jié)果不明顯d 濾紙條上幾種色素會(huì)混合起來(lái) 某人做葉綠體中色素分離實(shí)驗(yàn)時(shí), 使用的是圓形濾紙, 裝置如下圖 。 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)在圓形濾紙上形成四個(gè)同心色素圓環(huán), 則最內(nèi)圈所呈顏色為 ( d )a 橙黃色b 黃色c
7、藍(lán)綠色d 黃綠色 葉綠體中色素經(jīng)層析后, 出現(xiàn)在濾紙上擴(kuò)散最寬的色素帶是( a ), 最窄的色素帶是 TOC o 1-5 h z ( c ), 最整齊的色素帶是( c )a 葉綠素 ab 葉綠素 b c 胡蘿卜素 d 葉黃素 葉綠體的色素能在濾紙條上彼此分離開的原因是( c )a 色素提取液中的不同色素已分層b 陽(yáng)光的照射使不同的色素彼此分開c 濾紙對(duì)各種色素的吸附力不同 d 丙酮酸使色素溶解并彼此分離的擴(kuò)散速度不同 在葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中 :( 1 ) 研磨綠葉時(shí)為防止葉綠素被破壞而加入 caco3 的原理是。( 2 ) 定性濾紙進(jìn)行干燥處理的目的是。( 3 ) 對(duì)濾紙剪去兩角的目的
8、是。( 4 ) 所畫濾液細(xì)線越細(xì)越齊越好, 這樣可避免 以取得較好的分離效果。( 5 ) 層析裝置加蓋的目的是。( 6 ) 濾紙條上色素帶最寬的顏色是, 相鄰色素帶間距離最近的是與 。 (12 ) 使層析液在濾紙條上均勻擴(kuò)散( 3 ) 使層析液同時(shí)到達(dá)濾液細(xì)線( 4 )( 5 ) 避免層析液揮發(fā)影響效果并引起中毒 ( 6 ) 藍(lán)綠色 ; 葉綠素 a ; 葉綠素 b 某同學(xué)在做 “葉綠體中色素的提取和分離” 實(shí)驗(yàn)時(shí) , 操作情況如下所述, 結(jié)果實(shí)驗(yàn)失敗, 請(qǐng)指出其錯(cuò)誤所在 :(1 ) 將 5 克新鮮菠菜剪碎后 , 放入研缽中 , 加入酒精 、 石英砂后 , 迅速研磨 。( 2 ) 用毛細(xì)吸管吸取
9、少量濾液, 沿鉛筆細(xì)線小心均勻地劃出一道濾液細(xì)線 , 并連續(xù)迅速地重復(fù)劃 2-3 次 。3 ) 把劃好細(xì)線的的濾紙條插入層析液中并不斷振蕩, 以加快層析液在濾紙條上的擴(kuò)散。 ( 1 ) 未加碳酸鈣 , 葉綠素可能會(huì)被破壞( 2 ) 劃濾液細(xì)線時(shí), 不能連續(xù)迅速地重復(fù)劃2-3 次 , 要待干后才能劃第二次, 同樣劃第三次( 3 ) 層析時(shí)不能振蕩燒杯 , 這樣會(huì)使濾液細(xì) TOC o 1-5 h z 線上的色素部分溶解到層析液中 , 使色素帶不清晰 分別在 a 、 b 、 c 三個(gè)研缽中加入 2 克剪碎的新鮮菠菜綠葉, 并按下表所示添加試劑 ,經(jīng)研磨 、 過(guò)濾得到三種不同顏色的溶液, 即 : 深綠
10、色 、 黃綠色 ( 或褐色 ) 、 幾乎無(wú)色 。試回答 :( 1 ) a 處理得到的溶液顏色是, 原因是 。( 2 ) b 處理得到的溶液顏色是, 原因是。( 3 ) c 處理得到的溶液顏色是, 原因是。 ( 1 ) 黃綠色 ( 或褐色 ); 部分葉綠素受到破壞( 2 ) 幾乎無(wú)色 ; 葉綠素不溶于水( 3 )深綠色 ; 大量葉綠素溶于乙醇中 篇二 : 清華大學(xué)普通生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告模板葉綠體色素的提取 分離 、 理化性質(zhì)普通生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)名稱: 葉綠體色素的提取分離、 理化性質(zhì) TOC o 1-5 h z 實(shí)驗(yàn)原理:1 、 提取色素 : 葉綠體色素不溶于水, 常用有機(jī)溶劑提取 。 本實(shí)驗(yàn)采用
11、乙醇提取。2 、 分離色素 : 本實(shí)驗(yàn)采用層析法。 溶劑通過(guò)毛細(xì)管作用浸潤(rùn)薄層板, 帶動(dòng)色素向上移動(dòng), 由于吸附劑對(duì)不同的色素吸附能力不同 , 吸附力強(qiáng)的色素相對(duì)移動(dòng)要慢一點(diǎn) , 各組分有不 同的移動(dòng)速度而彼此分開。3 、 h+ 和 cu2+ 對(duì)葉綠體中 mg2+ 的取代作用 : 葉綠素中鎂可被h+ 取代 , 形成褐色去鎂葉綠素 , 去鎂葉綠素遇銅生成銅帶葉綠素 。4 、 光的破壞作用 : 葉綠素化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定, 易受強(qiáng)光破壞, 而類胡蘿卜素較穩(wěn)定 。5 、 皂化作用 : 葉綠素是由葉綠酸和甲醇與葉綠醇形成的酯, 故可與堿發(fā)生皂化反應(yīng) , 生 TOC o 1-5 h z 成甲醇和葉綠醇及葉綠酸
12、鹽, 葉綠酸鹽溶于水。 此法可將葉綠素與類胡蘿卜素分開。6 、 熒光現(xiàn)象 : 葉綠素吸收光量子轉(zhuǎn)變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 激發(fā)態(tài)分子不穩(wěn)定 , 變回到基態(tài)時(shí)發(fā)射出紅光量子, 產(chǎn)生紅色的熒光。實(shí)驗(yàn)儀器和材料:、 新鮮的菠菜葉片 。、 乙醇 ( 體積分?jǐn)?shù)95%) 、 碳酸鈣粉末、 展開劑 ( 石油醚 : 丙酮 : 苯=7:5:1, 體積比)。、 天平 , 研缽 , 漏斗 , 濾紙 , 三角瓶 , 剪刀 , 點(diǎn)樣毛細(xì)管, 層析缸 , 硅膠預(yù)制板。、 小試管 , 試管架 , 水浴鍋 , 10 毫升移液管。、 蒸餾水 , 苯 , 稀鹽酸 ( 質(zhì)量分?jǐn)?shù) 5%), 醋酸 - 醋酸銅溶液, 氫氧化鉀 - 甲醇溶液 。實(shí)驗(yàn)
13、步驟 :理化性質(zhì) :1 、 色素分離較明顯、 葉綠素 a、 葉綠素 b 、 葉黃素 ( 如圖。、 研磨時(shí)加入碳酸鈣粉末可以減少葉片中色素的破壞。 銅代葉綠素較穩(wěn)定, 故可以用 TOC o 1-5 h z h+和cu2+來(lái)制取綠色植物浸漬標(biāo)本。、 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中葉綠體色素的提取實(shí)驗(yàn)中 , 只要有幾滴濾液滴下, 就可以做分離實(shí)驗(yàn), 葉綠體色素的理化性質(zhì)中 光的破壞作用”、“h拜口 cu2+對(duì)葉綠體中mg2+的取代作用”這兩個(gè)實(shí) 驗(yàn)可以較早地進(jìn)行, 從而縮減實(shí)驗(yàn)等待時(shí)間 , 提高實(shí)驗(yàn)效率。、 葉片加入醋酸- 醋酸銅溶液90c水浴加熱的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯, 可能的原因是, 在加入水浴后沒有及時(shí)拿出并觀察到葉片
14、變成黃色的現(xiàn)象, 以至于葉片前后顏色對(duì)比不明顯。、 光對(duì)葉片的破壞作用我們組的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象并不明顯 。 可能的原因如下: 天氣多云 , 光照不是很強(qiáng)烈; 靜置時(shí)間稍短, 有些葉綠素還沒有被破壞。、 實(shí)驗(yàn)綜合感想:這一次的實(shí)驗(yàn)總體比較順利 , 剪葉片 、 研磨 、 畫線 、 點(diǎn)樣 、 層析 ? 可能因?yàn)楦咧凶鲞^(guò)一次葉綠素的提取與分離的實(shí)驗(yàn), 當(dāng)時(shí)用的是紙層析的方式, 這一次實(shí)驗(yàn)與上一次相比 , 由于支持物的不同 , 分離出了六條色素帶, 比上一次多了兩條, 說(shuō)明葉綠素提取液中的色素種類是十分多而復(fù)雜的, 老師說(shuō)更高級(jí)的分離還可以看到更多的葉綠素帶, 感覺世界好奇妙。 實(shí)驗(yàn)中 ,最感到新奇的是熒光現(xiàn)象
15、的實(shí)驗(yàn), 在試管兩側(cè)居然能夠看到完全不同的色彩, 我和恬緣都覺得真是十分神奇。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中 , 也遇到了兩人合作不力我把恬緣的皂化反應(yīng)的液體當(dāng)成廢液倒掉導(dǎo)致重做的問(wèn)題 , 但是我們的層析一次成功大大縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間 , 除了 90 c 水浴的實(shí)驗(yàn)需要時(shí)間較長(zhǎng)來(lái)不及重新實(shí)驗(yàn)和天公不作美光照不是很給力以外, 其余實(shí)驗(yàn)都得到了比較滿意的結(jié)果。 收貨頗豐 。 最后 , 感謝老師和助教在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中給予我們的幫助 !附 : 圖片圖1 圖2 圖3圖4 圖5圖6圖 7 圖 8 篇三 : 綠葉中色素的提取和分離的實(shí)驗(yàn)報(bào)告綠葉中色素的提取和分離的實(shí)驗(yàn)報(bào)告一 、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1. 學(xué)會(huì)提取和分離葉綠體中色素的方法 。 2. 比較 、 觀察葉綠體中四種色素 : 理解它們的特點(diǎn)及與光合作用的關(guān)系二 、 實(shí)驗(yàn)原理 光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上, 而葉綠體中的色素能溶于有機(jī)溶劑 中 。 故要提取色素, 要破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu), 破壞葉綠體膜, 使基粒片層結(jié)構(gòu)直接與有機(jī)溶劑接觸 , 使色素溶解在有機(jī)溶劑中 。 葉綠體中的色素有四種, 不同色素在層析液( 脂溶性強(qiáng)的有機(jī)溶劑 ) 中的溶解度不同 , 因而隨層析液的擴(kuò)散速度也不同 。三 、 材料用具 取新鮮的綠色葉片 、 定性濾紙 、 燒杯 、 研缽 、 漏斗 、 紗布 、 剪刀 、 小試管、 培養(yǎng)皿 、 毛細(xì)吸管 、
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