p53和VEGF在前列腺癌組織中的表達及臨床意義

1、53和VEGF在前列腺癌組織中的表達及臨床意義【關鍵詞】前列腺癌p53基因血管內皮生長因子免疫組織化學Theexpressinfp53andVEGFinhuanprstatiarinaandthEirlinialsignifianesKEYRDS:prstatiarina;p53gene;vasularendthelialgrthfatr;iunhistheistry前列腺腺癌(prstateaner,Pa)是老年男性常見的惡性腫瘤之一，血管形成是腫瘤生長和轉移的根底1。腫瘤血管生長的調控是一個復雜的機制，其中，血管內皮細胞生長因子(vasularendthelialgrthfatr,VEGF

2、)是目前公認為刺激腫瘤血管生長的最主要的因子。而VEGF的表達又受多種因素調節(jié)。p53基因是一種腫瘤抑制基因，近年來有學者報道，突變型p53基因通過調節(jié)腫瘤組織VEGF的表達程度，具有促進腫瘤血管形成的作用2。說明突變型p53與VEGF的表達親密相關。有關Pa中p53與VEGF表達的相關性的研究國內外報道較少。為此，我們采用免疫組織化學標記菌葡萄聚糖聚合物法(labeleddextranplyerethd,LDP法)檢測了Pa組織中p53與VEGF的表達情況，并對它們表達的關系及臨床意義作了初步討論。1資料與方法1.1臨床資料選自我院泌尿外科1997年1月至2022年1月間經病理證實的46例P

3、a患者作為研究對象，年齡51-83歲，中位年齡69歲。按H病理學分級標準，G1級6例，G2級14例，G3級26例；按國際TN臨床分期標準(UI，1997年)將46例Pa分為二組：T1-T2期15例，T3-T4期31例。另取20例良性前列腺增生癥(benignprstatihyperplasia,BPH)作為對照，所有組織均為同期手術標本(包括經尿道電切的前列腺組織塊、前列腺摘除標本、前列腺癌根治術及前列腺穿刺活檢的標本)，所有患者術前均未承受放療和化療。標本經10%(體積分數(shù))甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋，制成4厚切片備染。2022年12月終止隨訪，隨訪時間12-96個月，平均(464.2)個月

4、。1.2試劑與方法實驗用鼠抗人p53單克隆抗體(工作濃度1100)單抗VEGF(工作濃度1100)及EnvisinT試劑盒均為DAK公司產品。采用免疫組織化學LDP法進展檢測，染色步驟按試劑盒說明分別進展，分別選用陽性組織切片作陽性對照，用PBS液分別代替一抗作陰性對照。1.3結果斷定p53表達的斷定：p53蛋白陽性著色細胞表現(xiàn)為細胞核顯棕黃色，切片中陽性細胞率10%者為p53染色陽性，10%為陰性。VEGF表達的斷定：腫瘤細胞胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒即為VEGF陽性染色。我們以兩方面評分：陽性染色深度(未著色0分，輕度著色1分，中度著色2分，重度著色3分)和陽性細胞百分比(無陽性細胞0分，陽性細胞

5、25%為1分，25%-50%為2分，50%為3分)，這兩方面相加，得分0-2分者為陰性表達，3-6分者為陽性表達。1.4統(tǒng)計學處理組間比擬采用2檢驗，P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。2結果2.1p53、VEGF在Pa組織及BPH組織中的表達(表1)p53在Pa與BPH組織中表達存在統(tǒng)計學差異(P0.05，圖1、圖3-4)；VEGF在二組中表達亦具有顯著性差異(P0.01，圖2、圖5-6)。圖1前列腺增生癥(BPH)，p53呈陰性表達LDP法200略圖2前列腺增生癥(BPH)，VEGF呈陰性表達LDP法200略圖4前列腺癌，p53呈陰性表達LDP法200略圖5前列腺癌,VEGF呈陰性表達LDP法2

6、00略2.2p53、VEGF的表達與Pa臨床病理學特點的相關性(表2)p53的表達在臨床分期T3-T4期組和T1-T2期組之間差異顯著(P0.01)。在G1、G2、G3級癌組織中，各組間p53蛋白的表達比擬無統(tǒng)計學意義(P0.05)，但G1+G2組與G3組比擬差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。提示分化程度越低，p53蛋白陽性表達率越高。表1p53、VEGF在Pa與BPH組織中的表達略與BPH組織比擬*P0.05,*P0.01表2Pa癌組織中p53、VEGF的表達與Pa臨床病理特點的相關性略VEGF的表達與Pa病情開展及腫瘤細胞的分化程度關系親密，VEGF的陽性表達率隨組織學分級增高呈升高趨勢。G

7、1與G2比擬無統(tǒng)計學意義(P0.05)，G1與G3G1+G2與G3比擬，差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。高分期組(T3-T4期)VEGF表達明顯高于低分期組(T1-T2期)，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。說明Pa組織中VEGF的表達程度與Pa的病理分級和臨床分期均呈正相關。2.3Pa組織中p53表達與VEGF表達的關系(表3)連續(xù)切片比照分析發(fā)現(xiàn)，在VEGF表達較高的區(qū)域，p53表達亦較強，兩者在Pa中表達一致的符合率達60.9%，相關分析顯示，兩者表達具有相關性(P0.05)。本研究結果還發(fā)現(xiàn)，p53表達陽性的19例Pa組織中VEGF的陽性表達率為89.5%(17/19)，p53表達陰性

8、的27例Pa組織中VEGF的陽性表達率為59.3%(16/27)，前者明顯高于后者，其差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。表3p53與VEGF表達的關系略對有完好隨訪資料的患者研究說明，p53與VEGF陽性表達患者的術后生存期明顯低于p53、VEGF陰性表達者。轉貼于論文聯(lián)盟.ll.3討論3.1p53基因在Pa中表達的意義p53基因是迄今發(fā)現(xiàn)與人類腫瘤相關性最高的基因。本研究結果說明，p53蛋白陽性表達率為41.3%，提示Pa腫瘤組織中有p53蛋白存積(還可能與本組所選擇病例大多為中晚期患者有關)。并且發(fā)現(xiàn)p53蛋白陽性表達隨細胞分化惡化程度呈遞增趨勢，與病理分級親密相關，p53蛋白積累量隨著Pa

9、惡性程度的增大而逐漸增多。突變的p53的過度表達不僅提醒了Pa發(fā)生與開展的可能機制，而且與Pa細胞惡化有直接關系，更可能是腫瘤發(fā)生的晚期事件，同時，也提示p53基因表達可作為前列腺良惡性疾病鑒別的一種方法3。隨訪發(fā)現(xiàn)：治療前，腫瘤分化越差，p53蛋白陽性率越高，對治療的有效性越差，復發(fā)的可能性就越大，預后差。反之，那么治療有效性好，預后好。我們認為，p53蛋白的過度表達是Pa高度惡性和預后不良的重要指標之一4。而且p53蛋白還可能作為一個開關蛋白，上調VEGF的表達，促進腫瘤新生血管生成。3.2VEGF在Pa中表達的意義VEGF是目前的一簇最強的促血管形成物質，在許多惡性腫瘤組織中高表達。它可

10、以通過與血管內皮細胞膜上的受體結合而發(fā)揮其內皮相關功能，促進內皮細胞的分裂、游走和增殖，誘導宿主毛細血管新生并長入腫瘤組織，是腫瘤新生血管形成的決定因素之一5。而腫瘤組織中VEGF的高表達又可能為其繼續(xù)生長和轉移提供必要的內在條件。腫瘤自腫瘤血管從宿主獲得營養(yǎng)，并通過不成熟的腫瘤血管向宿主輸出大量惡性細胞，導致腫瘤不斷生長和轉移。由此可見，VEGF在腫瘤血管生長和調節(jié)腫瘤細胞增殖過程中起著非常關鍵的作用。本組研究結果顯示：VEGF在Pa組中表達強度明顯大于BPH組(P0.01)，這與VEGF能特異性的刺激血管內皮細胞增殖，并通過增加血管通透性和刺激新生血管的形成促使腫瘤生長有關6。從本組的研究結果中發(fā)現(xiàn)，VEGF在Pa中的陽性表達率為71.7%，G1、G2、G3級Pa的陽性表達率分別為16.7%、50.0%、96.2%，G1與G3級之間，G1+G2級與G3級之間比擬差異均有統(tǒng)計學意義。顯示VEGF的陽性表達率及表達強度隨著Pa組織學分級的增高而增加，說明VEGF的表達與Pa的分化程度親密相關。在臨床分期T3-T4期Pa組織