同濟(jì)大學(xué)考研 生物化學(xué)與分子生物學(xué)歷年真題+完整版答案

1、08年生化與分子一、名詞1、乳糖操縱子：乳糖操縱子是一個(gè)在大腸桿菌及其他腸道菌科細(xì)菌內(nèi)負(fù)責(zé)乳糖的運(yùn)輸及代謝的操縱子。它包含了三個(gè)相連的結(jié)構(gòu)基因、啟動(dòng)子、終止子及操縱基因。是典型的負(fù)調(diào)控可誘導(dǎo)的基因表達(dá)調(diào)節(jié)。Lac基因能編碼阻遏蛋白，組織結(jié)構(gòu)基因表達(dá)。在缺乏葡萄糖要利用乳糖時(shí)，誘導(dǎo)物異構(gòu)乳糖與阻遏蛋白結(jié)合使其失活，乳糖操縱子開啟，表達(dá)與代謝乳糖相關(guān)的一系列酶。葡萄糖的存在能抑制cAMP-CRP復(fù)合物的形成，受其調(diào)控的結(jié)構(gòu)基因就不表達(dá)，當(dāng)葡萄糖含量下降時(shí)，便促進(jìn)其表達(dá)，這種受cAMP-CRP復(fù)合物調(diào)節(jié)的方式是乳糖操縱子的正調(diào)節(jié)機(jī)制。2、磷酸戊糖途徑：葡萄糖氧化分解的一種方式，由于此途徑是由6-磷酸

2、葡萄糖(G-6-P)開始，故亦稱為己糖磷酸旁路。此途徑在胞漿中進(jìn)行，可分為兩個(gè)階段。第一階段由G-6-P脫氫生成6-磷酸葡糖酸內(nèi)酯開始，然后水解生成6-磷酸葡糖酸，再氧化脫羧生成5-磷酸核酮糖。NADP+是所有上述氧化反應(yīng)中的電子受體。第二階段是5-磷酸核酮糖經(jīng)過(guò)一系列轉(zhuǎn)酮基及轉(zhuǎn)醛基反應(yīng)，經(jīng)過(guò)磷酸丁糖、磷酸戊糖及磷酸庚糖等中間代謝物最后生成3-磷酸甘油醛及6-磷酸果糖，后二者還可重新進(jìn)入糖酵解途徑而進(jìn)行代謝。3、酮體：在肝臟線粒體中，脂肪酸氧化分解的中間產(chǎn)物乙酰乙酸、-羥基丁酸及丙酮，三者統(tǒng)稱為酮體。是饑餓或糖尿病時(shí)肝中脂肪酸大量氧化而產(chǎn)生乙酰輔酶A后縮合生成的產(chǎn)物。在饑餓期間酮體是包括腦在內(nèi)

3、的許多組織的燃料，由于血腦屏障的存在，除葡萄糖和酮體外的物質(zhì)無(wú)法進(jìn)入腦為腦組織提供能量。饑餓時(shí)酮體可占腦能量來(lái)源的25%-75%。4、電子傳遞鏈：需氧細(xì)胞內(nèi)糖、脂肪、氨基酸等通過(guò)各自的分解途徑所形成的還原性輔酶，包括NADH和FADH2通過(guò)電子傳遞途徑被重新氧化。即還原型輔酶上的氫原子以質(zhì)子的形式脫下，其電子沿一系列按一定順序排列的電子傳遞體轉(zhuǎn)移，最后轉(zhuǎn)移給分子氧并生成水，這個(gè)電子傳遞體系稱為電子傳遞鏈。由于消耗氧，故也叫呼吸鏈。包括：NADH-Q還原酶、琥珀酸-Q還原酶、細(xì)胞色素還原酶、細(xì)胞色素氧化酶。5、TCA循環(huán)：是需氧生物體內(nèi)普遍存在的代謝途徑，分布在線粒體。又稱為檸檬酸循環(huán)或者三羧酸

4、循環(huán)。丙酮酸通過(guò)檸檬酸循環(huán)進(jìn)行脫羧和脫氫反應(yīng)，羧基形成CO2，氫原子則隨著載體進(jìn)入電子傳遞鏈經(jīng)過(guò)氧化磷酸化作用，形成水分子并釋放出能量合成ATP。檸檬酸循環(huán)不僅是丙酮酸氧化的途徑，又是糖類、脂類、氨基酸氧化的途徑。6、urea cycle（尿素循環(huán)）：稱為鳥氨酸循環(huán)，肝臟中2分子氨(1分子氨是游離的，1分子氨來(lái)自天冬氨酸)和1分子CO2生成1分子尿素的環(huán)式代謝途徑。尿素循環(huán)是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的環(huán)式代謝途徑。7、CpG island（CpG 島）：CpG雙核苷酸在人類基因組中的分布很不均一，而在基因組的某些區(qū)段，CpG保持或高于正常概率，這些區(qū)段被稱作CpG島。CpG島主要存在于真核生物轉(zhuǎn)錄起始區(qū)域

5、，是一段富含GC序列，和附近的CAAT區(qū)一樣，主要控制轉(zhuǎn)錄起始頻率。8、allosteric regulation（別構(gòu)調(diào)節(jié)）：又稱別位調(diào)節(jié)或變構(gòu)調(diào)節(jié)，指酶分子的非催化部位和某些化合物可逆的非共價(jià)結(jié)合后，引起其構(gòu)象變化，由此改變其酶活性。受別構(gòu)調(diào)節(jié)的酶稱為別位酶（aIlostericenzyme），那些化合物稱為效應(yīng)物。二、填空1、生化反應(yīng)中，有三個(gè)底物水平磷酸化，分別是：1,3-二磷酸甘油酸+ADP=3-磷酸甘油酸+ATP磷酸烯醇式丙酮酸+ADP=丙酮酸+ATP琥珀酸-CoA+GDP=琥珀酸+GTP三、簡(jiǎn)答1、圖解蘋果酸-天冬氨酸穿梭途徑，并指出該途徑可以運(yùn)送哪些物質(zhì)可以運(yùn)送NADH，蘋果酸

6、，天冬氨酸，草酰乙酸，-酮戊二酸2、簡(jiǎn)述胰島素調(diào)節(jié)血糖的作用機(jī)理是主要的降血糖激素，由胰島B細(xì)胞所產(chǎn)生，其主要作用有促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖；促進(jìn)糖原合成，減少糖原分解；促進(jìn)糖氧化和分解，加速糖的利用；促進(jìn)甘油三酯的合成和儲(chǔ)存；阻止糖異生作用。高血糖、高氨基酸、胰泌素、胰升糖素和迷走神經(jīng)興奮等都可促進(jìn)胰島素的釋放。胰島素和受體結(jié)合后，可刺激細(xì)胞加強(qiáng)對(duì)葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn),使血液中的葡萄糖被轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)細(xì)胞中，從而降低血液葡萄糖濃度，同時(shí)還可以促進(jìn)細(xì)胞將葡萄糖轉(zhuǎn)化為糖原儲(chǔ)存起來(lái)，并抑制肝糖原分解為葡萄糖。3、簡(jiǎn)述HIV-1的生活簡(jiǎn)史HIV-1主要感染的細(xì)胞：富含CD4蛋白的T細(xì)胞，也可感染只帶少量CD4蛋白或無(wú)此受

7、體蛋白的細(xì)胞，包括B細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞，朗格罕氏細(xì)胞，腸上皮細(xì)胞，腦內(nèi)的星形細(xì)胞核小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞以及毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞等。以HIV-1侵染T細(xì)胞為例來(lái)簡(jiǎn)述其生活史：侵染：gp120暴露于病毒包膜外，稱為外膜糖蛋白，gp41被稱為跨膜蛋白，嵌入病毒包膜脂質(zhì)中，gp120和gp41緊密相連。當(dāng)gp120與CD4受體結(jié)合后，在一些輔助受體的作用下其構(gòu)象（gp120）發(fā)生改變，導(dǎo)致與gp41分離，獨(dú)立的gp41可插入靶細(xì)胞的細(xì)胞膜，造成膜融合使病毒核心進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。這個(gè)過(guò)程還需要靶細(xì)胞表面的一個(gè)七次跨膜G蛋白偶聯(lián)受體協(xié)助。整合：病毒核衣殼蛋白一旦進(jìn)入靶細(xì)胞，逆轉(zhuǎn)錄酶就以病毒RNA為模板合成單鏈DN

8、A，并有宿主細(xì)胞DNA聚合酶合成雙鏈DNA（原病毒），經(jīng)環(huán)化后進(jìn)入細(xì)胞核并整合到宿主的基因組上，病毒核酸隨細(xì)胞分裂而傳至子代細(xì)胞，可長(zhǎng)期潛伏。復(fù)制及釋出：原病毒利用宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄與合成系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生病毒mRNA，其中一部分編碼病毒蛋白，與基因組RNA組裝成新的病毒顆粒，從寄主細(xì)胞中釋放出來(lái)。裂解：HIV復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制使HIV感染細(xì)胞后產(chǎn)生不同的結(jié)果，在復(fù)制和表達(dá)量非常高的情況下細(xì)胞裂解死亡。 HIV從靶細(xì)胞中被釋放出來(lái)后繼續(xù)侵染其他健康細(xì)胞或被機(jī)體的細(xì)胞免疫或體液免疫清除掉，至此，HIV完成了它的整個(gè)生活史。4、簡(jiǎn)述原癌基因激活的五種方式并舉例點(diǎn)突變r(jià)as基因家族，均以點(diǎn)突變?yōu)橹?，如膀胱癌?xì)胞中

9、克隆出來(lái)的c-Ha-ras基因與正常細(xì)胞的相比僅有一個(gè)核苷酸的差異。DNA重排原癌基因在正常情況下表達(dá)水平較低，但當(dāng)發(fā)生染色體的易位或倒位時(shí)，處于活躍轉(zhuǎn)錄基因強(qiáng)啟動(dòng)子的下游，而產(chǎn)生過(guò)度表達(dá)。如Burkitt淋巴瘤細(xì)胞的染色體易位，使c-myc與IG重鏈基因的調(diào)控區(qū)為鄰，由于免疫球蛋白重鏈基因表達(dá)十分活躍，其啟動(dòng)子為強(qiáng)啟動(dòng)子，且在CH-VH之間還有增強(qiáng)子區(qū)，致使c-myc過(guò)表達(dá)。插入激活某些不含v-onc的弱轉(zhuǎn)化逆轉(zhuǎn)錄病毒，其前病毒DNA插入宿主DNA中，引起插入突變，如逆轉(zhuǎn)錄病毒MoSV感染鼠類成纖維細(xì)胞后，病毒兩端各有一個(gè)相同的冗長(zhǎng)末端重復(fù)序列（LTR），它們不編碼蛋白質(zhì)，而含有啟動(dòng)子、增強(qiáng)

10、子等調(diào)控成分，病毒基因組的LTR整合到細(xì)胞癌基因c-mos鄰近處，使c-mos處于LTR的強(qiáng)啟動(dòng)子和增強(qiáng)子作用之下而被激活，導(dǎo)致成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肉瘤細(xì)胞基因擴(kuò)增在某些造血系統(tǒng)惡性腫瘤中，癌基因擴(kuò)增是一個(gè)極常見的特征，如前髓細(xì)胞性白血病細(xì)胞系和這類病人的白血病細(xì)胞中，c-myc擴(kuò)增832倍。原癌基因的低甲基化致癌物質(zhì)的作用下，使原癌基因的甲基化程度降低而導(dǎo)致癌癥，這是因?yàn)橹掳┪镔|(zhì)降低甲基化酶的活性。5、長(zhǎng)期節(jié)食（不吃糖類）容易使血液中PH值下降，導(dǎo)致酸中毒，試簡(jiǎn)述導(dǎo)致酸中毒的原因，如何治療酸中毒是指體內(nèi)血液和組織中酸性物質(zhì)的堆積，其本質(zhì)是血液中氫離子濃度上升、PH值下降。在病理情況下，當(dāng)體內(nèi)BH

11、CO3減少或H2CO3增多時(shí)，均可使BHCO3/H2CO3比值減少，引起血液的pH值降低，稱為酸中毒。（1）原因：饑餓狀態(tài)和胰島素水平過(guò)低，都會(huì)耗盡體內(nèi)糖的存在，肝外組織不能自血液中獲取充足的葡萄糖，為了取得能量，肝中的葡萄糖異生作用就會(huì)加速，肝和肌肉中的脂肪酸氧化也會(huì)加速，同時(shí)并動(dòng)員蛋白質(zhì)的分解。脂肪酸氧化加速產(chǎn)生大量的乙酰CoA，葡萄糖異生耗盡草酰乙酸，沒(méi)有草酰乙酸帶動(dòng)乙酰CoA進(jìn)入TCA，則乙酰CoA轉(zhuǎn)向酮體生成的方向。（2）治療：糖尿病酮癥酸中毒一經(jīng)確診，應(yīng)立即進(jìn)行治療。治療目的在于糾正水和電解質(zhì)失衡，糾正酸中毒，補(bǔ)充胰島素促進(jìn)葡萄糖利用，并尋找和去除誘發(fā)酮癥酸中毒的應(yīng)激因素。一般處理

12、監(jiān)測(cè)血糖、血酮、尿酮、電解質(zhì)和動(dòng)脈血?dú)夥治?。補(bǔ)液對(duì)重癥酮癥酸中毒患者十分重要，不只利于失水的糾正，而且有助于血糖的下降和酮體的消除。補(bǔ)液量應(yīng)根據(jù)患者的失水程度因人而異。補(bǔ)充胰島素小劑量胰島素療法即可對(duì)酮體生成產(chǎn)生最大抑制，而又不至引起低血糖及低血鉀，當(dāng)血糖降至13.9mmol/L時(shí)開始輸入5%葡萄糖液，增加熱卡有利于酮體糾正。糾正電解紊亂治療過(guò)程中應(yīng)密切監(jiān)測(cè)血鉀變化，心電圖監(jiān)護(hù)可從T波變化中靈敏反映血鉀高低，有利于及時(shí)調(diào)整補(bǔ)鉀的濃度和速度。糾正酸堿平衡失調(diào)糖尿病酮癥酸中毒的生化基礎(chǔ)是酮體生成過(guò)多，而非HCO3-丟失過(guò)多，治療應(yīng)主要采用胰島素抑制酮體生成，促進(jìn)酮體的氧化，酮體氧化后產(chǎn)生HCO3-

13、，酸中毒自行糾正。過(guò)早、過(guò)多地給予NaHCO3有害無(wú)益。治療誘因?qū)νY酸中毒患者的治療除積極糾正代謝紊亂外，還必須積極尋找誘發(fā)因素并予以相應(yīng)治療，例如嚴(yán)重感染、心肌梗死、外科疾病、胃腸疾患等。其中，感染是最常見的誘因，應(yīng)及早使用敏感抗生素。四、論述1、比較原核生物和真核生物基因表達(dá)調(diào)控的異同點(diǎn)(1)共同點(diǎn): a 結(jié)構(gòu)基因均有調(diào)控序列b 表達(dá)過(guò)程都具有復(fù)雜性，表現(xiàn)為多環(huán)節(jié)c 表達(dá)的時(shí)空性，表現(xiàn)為不同發(fā)育階段和不同組織器官上的表達(dá)的復(fù)雜性(2)不同點(diǎn)：a 真核生物基因表達(dá)調(diào)控過(guò)程更復(fù)雜b 基因及基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)不同，如真核生物基因具有內(nèi)含子結(jié)構(gòu)等c 轉(zhuǎn)錄與翻譯的間斷性，原核生物轉(zhuǎn)錄與翻譯同時(shí)進(jìn)行，

14、而真核生物該兩過(guò)程發(fā)生在不同區(qū)域，具有間斷性d 真核生物在轉(zhuǎn)錄后有加工過(guò)程e 正負(fù)調(diào)控機(jī)制 f 原核生物只有一種RNA聚合酶，而真核生物有三種RNA聚合酶g 起始復(fù)合物的形成部位不同 原核生物的起始密碼子上游存在的SD序列與核糖體的16SrRNA共同決定原核細(xì)胞mRNA上的起始復(fù)合物的形成部位；真核生物的其實(shí)部位由Met-tRNAiMet對(duì)起始密碼子的識(shí)別、核糖體中的rRNA和蛋白質(zhì)共同決定h 起始因子和起始復(fù)合物大小不同2、凝膠過(guò)濾原理 凝膠過(guò)濾法又稱分子排阻法， 凝膠過(guò)濾法所用的介質(zhì)為凝膠珠，其內(nèi)部為多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。一定型號(hào)的凝膠網(wǎng)孔大小一定，只允許相應(yīng)大小的分子進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，大分子則被

15、排阻在外。洗脫時(shí)，大分子隨洗脫液從顆粒間隙流下來(lái)，洗脫液體積小，小分子則在顆粒網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中穿來(lái)穿去，歷程長(zhǎng)，后洗脫下來(lái)，洗脫體積大。 凝膠是一種多孔性的不帶表面電荷的物質(zhì)，當(dāng)帶有多種成分的樣品溶液在凝膠內(nèi)運(yùn)動(dòng)時(shí)，由于它們的分子量不同而表現(xiàn)出速度的快慢，在緩沖液洗脫時(shí)，分子量大的物質(zhì)不能進(jìn)入凝膠孔內(nèi)，而在凝膠間幾乎是垂直的向下運(yùn)動(dòng)，而分子量小的物質(zhì)則進(jìn)入凝膠孔內(nèi)進(jìn)行“繞道”運(yùn)行，這樣就可以按分子量的大小，先后流出凝膠柱，達(dá)到分離的目的。09年生化與分子一、名詞Transformation（轉(zhuǎn)化）：是某一基因型的細(xì)胞從周圍介質(zhì)中吸收來(lái)自另一基因型的細(xì)胞的DNA而使它的基因型和表現(xiàn)型發(fā)生相應(yīng)變化的現(xiàn)象

16、。該現(xiàn)象首先發(fā)現(xiàn)于細(xì)菌酸中毒：酸中毒是指體內(nèi)血液和組織中酸性物質(zhì)的堆積，引起血液中氫離子濃度上升、PH值下降稱為酸中毒。酸中毒包括代謝性酸中毒，呼吸性酸中毒。RNA干涉：指正常體內(nèi)抑制特定基因表達(dá)的一種現(xiàn)象，在進(jìn)化過(guò)程中高度保守的、由雙鏈RNA（dsRNA）誘發(fā)的、同源mRNA高效特異性降解并導(dǎo)致基因表達(dá)沉默的現(xiàn)象。蘋果酸-天冬氨酸穿梭：(malate-aspartate shuttle，也稱為蘋果酸穿梭)是真核細(xì)胞中一個(gè)轉(zhuǎn)運(yùn)在糖酵解過(guò)程中傳出的電子跨越半通透性的線粒體內(nèi)膜以進(jìn)行氧化磷酸化的生物化學(xué)體系。細(xì)胞溶液中NADH的電子由細(xì)胞溶液的蘋果酸脫氫酶?jìng)鬟f給草酰乙酸，是變成蘋果酸，同時(shí)NADH

17、氧化成NAD+，使心臟和肝臟細(xì)胞內(nèi)NADH的電子進(jìn)入到線粒體的途徑。衰減子：原核生物操縱子中能顯著減弱甚至終止轉(zhuǎn)錄作用的一段核苷酸序列。該區(qū)域能行成不同的二級(jí)結(jié)構(gòu)，利用原核生物轉(zhuǎn)錄與翻譯的偶聯(lián)機(jī)制對(duì)轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)節(jié)。反競(jìng)爭(zhēng)抑制：抑制劑只與酶-底物復(fù)合物結(jié)合，而不與游離酶結(jié)合的一種酶促反應(yīng)抑制作用。這種抑制作用使得Vmax，Km都變小，但Vmax/Km比值不變。滾環(huán)復(fù)制：（Rolling circle replication）：滾環(huán)復(fù)制是單項(xiàng)復(fù)制的特殊方式，是許多病毒、細(xì)菌因子及真核生物中基因放大的基礎(chǔ)。DNA的合成由對(duì)正鏈原點(diǎn)的專一性切割開始，所形成的自由5端從雙鏈環(huán)中置換出來(lái)并為單鏈DNA結(jié)合蛋

18、白所覆蓋，3-OH端在DNA聚合酶的作用下饒軸旋轉(zhuǎn)不斷延伸。復(fù)制過(guò)程的中間分子的形狀類似于倒寫的希臘字母，故又稱型復(fù)制。磷酸戊糖途徑：葡萄糖氧化分解的一種方式，由于此途徑是由6-磷酸葡萄糖(G-6-P)開始，故亦稱為己糖磷酸旁路。此途徑在胞漿中進(jìn)行，可分為兩個(gè)階段。第一階段由G-6-P脫氫生成6-磷酸葡糖酸內(nèi)酯開始，然后水解生成6-磷酸葡糖酸，再氧化脫羧生成5-磷酸核酮糖。NADP+是所有上述氧化反應(yīng)中的電子受體。第二階段是5-磷酸核酮糖經(jīng)過(guò)一系列轉(zhuǎn)酮基及轉(zhuǎn)醛基反應(yīng)，經(jīng)過(guò)磷酸丁糖、磷酸戊糖及磷酸庚糖等中間代謝物最后生成3-磷酸甘油醛及6-磷酸果糖，后二者還可重新進(jìn)入糖酵解途徑而進(jìn)行代謝。Cor

19、i cycle（乳酸循環(huán)）：肌肉收縮通過(guò)糖酵解生成乳酸，部分乳酸通過(guò)排尿排出，大部分乳酸通過(guò)細(xì)胞膜彌散進(jìn)入血液后，再入肝，在肝臟內(nèi)在乳酸脫氫酶作用下變成丙酮酸，接著通過(guò)糖異生生成為葡萄糖。葡萄糖進(jìn)入血液形成血糖，后又被肌肉攝取，這就構(gòu)成了一個(gè)循環(huán)(肌肉-肝臟-肌肉)，此循環(huán)稱為乳酸循環(huán)。10、Motif（膜體）：表示具有特定功能的或作為一個(gè)獨(dú)立結(jié)構(gòu)域一部分的相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)的聚合體。它一般被稱為功能膜體或結(jié)構(gòu)膜體，相當(dāng)于超二級(jí)結(jié)構(gòu)，膜體和結(jié)構(gòu)域共同構(gòu)成蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)。二、填空1、一種二肽含cys-cys，PK1=2.18，PK2=8.95，PK3=10.53，求PI=2、從大腸桿菌中提取的質(zhì)粒

20、DNA存在的形式 超螺旋閉合環(huán)狀DNA，螺旋結(jié)構(gòu)遭破壞的閉合環(huán)狀DNA，線狀DNA質(zhì)粒3、分離Pr，根據(jù)Pr在溶液中4、酶活性調(diào)節(jié)有共價(jià)調(diào)節(jié)，別構(gòu)調(diào)節(jié)兩種方式5、在lacZ失活顯色反應(yīng)篩選中，IPTG作用是誘導(dǎo)宿主的肽的合成6、TCA循環(huán)中有二次脫羧反應(yīng)，分別是由異檸檬酸脫氫酶，-酮戊二酸脫氫酶催化。7、HMG CoA是哺乳動(dòng)物體內(nèi) 膽固醇， 和細(xì)胞質(zhì)萜類化合物（植物）合成的分支點(diǎn)8、目前三個(gè)反應(yīng)物水平磷酸化1,3-二磷酸甘油酸+ADP=3-磷酸甘油酸+ATP 磷酸烯醇式丙酮酸+ADP=丙酮酸+ATP 琥珀酸-CoA+GDP=琥珀酸+GTP 底物生成ATP和GTP9、穩(wěn)定Pr膠體狀態(tài)因素 表面

21、形成水化層表面同種電荷斥力10、煤氣中毒是 COHbHbCO低氧血癥組織缺氧(主要)；CO肌紅蛋白、細(xì)胞色素3 損害線粒體功能，阻斷電子傳遞鏈或者與血紅蛋白結(jié)合，形成碳氧血紅蛋白，使血紅蛋白失去攜帶氧氣的能力；而且碳氧血紅蛋白的存在還抑制氧合血紅蛋白的解離，阻抑氧的釋放和傳遞，造成機(jī)體急性缺氧血癥 而導(dǎo)致人死亡三、簡(jiǎn)答1、原癌基因的激活有哪幾種方式，請(qǐng)舉例08年第4題2、論述激素對(duì)血糖的調(diào)節(jié)參與血糖濃度調(diào)節(jié)的激素有兩類：一類是降低血糖的激素，只有胰島素一種；一類是升高血糖的激素，這類激素包括腎上腺素、胰高血糖素、腎上腺皮質(zhì)激素、生長(zhǎng)激素等。它們對(duì)血糖濃度的調(diào)節(jié)是通過(guò)對(duì)糖代謝途徑中一些關(guān)鍵酶的誘

22、導(dǎo)、激活或抑制來(lái)實(shí)現(xiàn)的。這兩類激素的作用互相對(duì)立又互相制約，使調(diào)節(jié)效能加強(qiáng)。（1）胰島素：是主要的降血糖激素，系由胰島B細(xì)胞所產(chǎn)生，其主要作用有促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖；促進(jìn)糖原合成，減少糖原分解；促進(jìn)糖氧化和分解，加速糖的利用；促進(jìn)甘油三酯的合成和儲(chǔ)存；阻止糖異生作用。高血糖、高氨基酸、胰泌素、胰升糖素和迷走神經(jīng)興奮等都可促進(jìn)胰島素的釋放。（2）胰高血糖素：是升高血糖濃度的最重要的激素。是由胰島A-細(xì)胞合成和分泌的29個(gè)氨基酸組成的肽類激素。胰高糖素主要通過(guò)提高靶細(xì)胞內(nèi)cAMP含量達(dá)到調(diào)節(jié)血糖濃度的目的。細(xì)胞內(nèi)的cAMP可激活依賴cAMP的蛋白激酶，后者通過(guò)酶蛋白的共價(jià)修飾改變細(xì)胞內(nèi)酶的活性，即激

23、活糖原分解和糖異生的關(guān)鍵酶，促進(jìn)肝糖原分解成血糖，促進(jìn)糖異生作用。抑制糖原合成和糖氧化的關(guān)鍵酶，使血糖升高。低血糖、低氨基酸可刺激胰高血糖素釋放。（3）糖皮質(zhì)激素和生長(zhǎng)激素主要刺激糖異生作用，腎上腺素主要促進(jìn)糖原分解。這三個(gè)激素和胰高血糖素的主要作用是為細(xì)胞提供葡萄糖的來(lái)源。3、請(qǐng)問(wèn)糖代謝與脂代謝是通過(guò)哪些方式聯(lián)系起來(lái)的糖類和脂類都是以碳?xì)湓貫橹鞯幕衔?，它們?cè)诖x關(guān)系上十分密切。一般來(lái)說(shuō)，在糖供給充足時(shí)，糖可大量轉(zhuǎn)變?yōu)橹举A存起來(lái)，導(dǎo)致發(fā)胖。糖變?yōu)橹镜拇笾虏襟E為：糖經(jīng)酵解產(chǎn)生磷酸二羥丙酮，磷酸二羥丙酮可以還原為甘油；磷酸二羥丙酮也能繼續(xù)通過(guò)糖酵解途徑形成丙酮酸，丙酮酸氧化脫羧后轉(zhuǎn)變成乙酰

24、輔酶A，乙酰輔酶A可用來(lái)合成脂肪酸，最后由甘油和脂肪酸合成脂肪。可見甘油三酯的每個(gè)碳原子都可以從糖轉(zhuǎn)變而來(lái)。如果用含糖類很多的飼料喂養(yǎng)家畜，就可以獲得肥畜的效果；另外許多微生物可在含糖的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，在細(xì)胞內(nèi)合成各種脂類物質(zhì)，如某些酵母合成的脂肪可達(dá)干重的40。脂肪轉(zhuǎn)化成糖的過(guò)程：首先是脂肪分解成甘油和脂肪酸，然后兩者分別按不同途徑向糖轉(zhuǎn)化。甘油經(jīng)磷酸化生成-磷酸甘油，再轉(zhuǎn)變?yōu)榱姿岫u丙酮，后者經(jīng)糖異生作用轉(zhuǎn)化成糖。脂肪酸經(jīng)-氧化作用，生成乙酰輔酶A。在植物或微生物體內(nèi)形成的乙酰輔酶A經(jīng)乙醛酸循環(huán)生成琥珀酸，琥珀酸再經(jīng)三羧酸循環(huán)形成草酰乙酸，草酰乙酸可脫羧形成丙酮酸，然后通過(guò)糖異生作用即可形成

25、糖。但在人和動(dòng)物體內(nèi)不存在乙醛酸循環(huán)，通常情況下，乙酰輔酶A都是經(jīng)三羧酸循環(huán)而氧化成CO2和H2O，而不能轉(zhuǎn)化成糖。因此對(duì)動(dòng)物而言，只是脂肪中的甘油部分可轉(zhuǎn)化為糖，而甘油占脂肪的量相對(duì)很少，所以生成的糖量相對(duì)也很少。但脂肪酸的氧化利用可以減少對(duì)糖的需求，這樣，在糖供應(yīng)不足時(shí)，脂肪可以代替糖提供能量，使血糖濃度不至于下降過(guò)多。所以糖和脂肪不僅可以相互轉(zhuǎn)化，在相互替代供能上關(guān)系也是非常密切的。4、影響氧化磷酸化的抑制劑有哪些，作用機(jī)制是什么 氧化磷酸化抑制劑可分為三類，即離子載體抑制劑、磷酸化抑制劑和解偶聯(lián)劑。（1）離子載體抑制劑：一類脂溶性物質(zhì)，能與某些離子結(jié)合并作為它們的載體使這些離子能偶穿過(guò)

26、膜。這類抑制劑是通過(guò)增加線粒體內(nèi)膜對(duì)一個(gè)陰離子的通透性而破壞氧化磷酸化過(guò)程。（2）磷酸化抑制劑：抑制ATP的合成，也會(huì)抑制氧化，不抑制電子傳遞。例如寡霉素可與F0的OSCP結(jié)合，阻塞氫離子通道，從而抑制ATP合成。（3）解偶聯(lián)劑：使氧化和磷酸化脫偶聯(lián)，氧化仍可以進(jìn)行，而磷酸化不能進(jìn)行，解偶聯(lián)劑作用的本質(zhì)是增大線粒體內(nèi)膜對(duì)H+的通透性，消除H+的跨膜梯度，因而無(wú)ATP生成，解偶聯(lián)劑只影響氧化磷酸化而不干擾底物水平磷酸化，解偶聯(lián)劑的作用使氧化釋放出來(lái)的能量全部以熱的形式散發(fā)。常用的解偶聯(lián)劑有2，4-二硝基酚(dinitrophenol,DNP)，羰基-氰-對(duì)-三氟甲氧基苯肼(FCCP)，雙香豆素(

27、dicoumarin)等，過(guò)量的阿斯匹林也使氧化磷酸化部分解偶聯(lián)，從而使體溫升高。5、蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的類型，特點(diǎn)及其在分子整體空間結(jié)構(gòu)的作用二級(jí)結(jié)構(gòu)是通過(guò)骨架上的羰基和酰胺基團(tuán)之間形成的氫鍵維持的，氫鍵是穩(wěn)定二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要作用力。（1）-螺旋(-helix) 肽鏈主鏈繞假想的中心軸盤繞成螺旋狀，一般都是右手螺旋結(jié)構(gòu)，螺旋是靠鏈內(nèi)氫鍵維持的。每個(gè)氨基酸殘基(第n個(gè))的羰基氧與多肽鏈C端方向的第4個(gè)殘基(第n+4個(gè))的酰胺氮形成氫鍵。在典型的右手，螺旋的半徑為0.23nm。肽鏈中的全部肽鍵都可形成氫鍵，故-螺旋十分穩(wěn)定。 在水環(huán)境中，肽鍵上的酰胺氫和羰基氧既能形成內(nèi)部(-螺旋內(nèi))的氫鍵，也能與水分

28、子形成氫鍵。如果后者發(fā)生，多肽鏈呈現(xiàn)類似變性蛋白質(zhì)那樣的伸展構(gòu)象。疏水環(huán)境對(duì)于氫鍵的形成不能提供任何競(jìng)爭(zhēng)；是蛋白質(zhì)中最常見最典型含量最豐富的二級(jí)結(jié)構(gòu)元件。（2）-折疊(-sheet)又稱為-折疊片層結(jié)構(gòu)和-結(jié)構(gòu)等，是由伸展的多肽鏈組成的，折疊片的構(gòu)象是通過(guò)一個(gè)肽鍵的羰基氧和位于同一個(gè)肽鏈或相鄰肽鏈的另一個(gè)酰胺氫之間形成的氫鍵維持的。氫鍵幾乎都垂直伸展的肽鏈，這些肽鏈可以是平行排列(走向都是由N到C方向);或者是反平行排列(肽鏈反向排列)。-折疊結(jié)構(gòu)也是蛋白質(zhì)構(gòu)象中經(jīng)常存在的一種結(jié)構(gòu)方式。如蠶絲絲心蛋白幾乎全部由堆積起來(lái)的反平行-折疊結(jié)構(gòu)組成。球狀蛋白質(zhì)中也廣泛存在這種結(jié)構(gòu)，如溶菌酶、核糖核酸酶

29、、木瓜蛋白酶等球狀蛋白質(zhì)中都含有-折疊結(jié)構(gòu)。（3）-轉(zhuǎn)角(-turn) 連接蛋白質(zhì)分子中的二級(jí)結(jié)構(gòu)(-螺旋和-折疊)，使肽鏈走向改變的一種非重復(fù)多肽區(qū)，一般含有216個(gè)氨基酸殘基。含有5個(gè)氨基酸殘基以上的轉(zhuǎn)角又常稱之環(huán)(loops)。常見的轉(zhuǎn)角含有4個(gè)氨基酸殘基，有兩種類型：轉(zhuǎn)角I的特點(diǎn)是第1個(gè)氨基酸殘基羰基氧與第4個(gè)殘基的酰胺氮之間形成氫鍵；轉(zhuǎn)角II的第3個(gè)殘基往往是甘氨酸。這兩種轉(zhuǎn)角中的第2個(gè)殘基大都是脯氨酸。轉(zhuǎn)角是種簡(jiǎn)單的非重復(fù)性結(jié)構(gòu)，是比較穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),多處在蛋白質(zhì)分子的表面,在這里改變多肽鏈方向的阻力比較小。轉(zhuǎn)角的特定構(gòu)象在一定程度上取決與他的組成氨基酸,在轉(zhuǎn)角中能很好的調(diào)整其他殘基的

30、空間阻礙,因此是立體化學(xué)上最合適的氨基酸。（4）無(wú)規(guī)卷曲(randoncoil) 蛋白質(zhì)肽鏈中沒(méi)有規(guī)律的那部分肽段構(gòu)象。其結(jié)構(gòu)比較松散，與其他三個(gè)比較起來(lái)沒(méi)有確定規(guī)律。對(duì)于一些蛋白質(zhì)分子無(wú)規(guī)卷曲特定構(gòu)象是不能被破壞的，否則影響整體分子構(gòu)象和活性。它們受側(cè)鏈相互作用的影響很大。這類有序的非重復(fù)性結(jié)構(gòu)經(jīng)常構(gòu)成酶活性部位和其他蛋白質(zhì)特異的功能部位。四、論述1、論述NF-KB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)位點(diǎn)如何調(diào)節(jié)該基因表達(dá) 哺乳動(dòng)物的轉(zhuǎn)錄因子NF-kB家族由P50，P52，REL，REL-A和REL-B組成，這些蛋白質(zhì)二聚化去形成功能的NF-kB。最基本的NF-kB信號(hào)通路，包括受體和受體近端信號(hào)

31、銜接蛋白，IkB激酶復(fù)合物，IkB蛋白和NF-kB二聚體。 靜息狀態(tài)下，NF-kB二聚體在胞漿內(nèi)沒(méi)有活性，當(dāng)細(xì)胞受到各種胞內(nèi)外刺激后，IkB激酶被激活從而導(dǎo)致IkB蛋白激酶化、泛素化，然后IkB蛋白被降解，NF-kB二聚體得到釋放。然后NF-kB二聚體通過(guò)各種翻譯后的修飾作用而被進(jìn)一步激活，并轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中。在細(xì)胞核里，它與目的基因結(jié)合，以促進(jìn)目的基因的轉(zhuǎn)錄。10年生化與分子一、名詞管家基因：又稱持家基因（house-keeping genes），是指所有細(xì)胞中均要表達(dá)的一類基因，其產(chǎn)物是對(duì)維持細(xì)胞基本生命活動(dòng)所必需的。奢侈基因(Luxury gene)：即組織特異性基因(tissue-spe

32、cific genes)，是指不同類型細(xì)胞中特異性表達(dá)的基因，其產(chǎn)物賦予各種類型細(xì)胞特異的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征與功能?；蚯贸?gene knock-out)：是指一種 HYPERLINK :/baike.haosou /doc/5448112-5686480.html t _blank 遺傳工程基因修飾技術(shù)，針對(duì)某個(gè)感興趣的遺傳基因，通過(guò)一定的基因改造過(guò)程，令特定的基因功能喪失，并研究可能進(jìn)一步對(duì)相關(guān)生命現(xiàn)象造成的影響，進(jìn)而推測(cè)該基因的生物學(xué)功能。基因插入：把已知基因轉(zhuǎn)移到真核細(xì)胞，并且整合到基因組得到穩(wěn)定表達(dá)的技術(shù)。CpG島：CpG雙核苷酸在人類基因組中的分布很不均一，而在基因組的某些區(qū)段，CpG

33、保持或高于正常概率，這些區(qū)段被稱作CpG島。CpG島主要存在于真核生物轉(zhuǎn)錄起始區(qū)域，是一段富含GC序列，和附近的CAAT區(qū)一樣，主要控制轉(zhuǎn)錄起始頻率。二、填空1、氨基酸疏水性強(qiáng)弱疏水性氨基酸有酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸和丙氨酸2、在lacZ失活顯色反應(yīng)篩選中，IPTG作用是誘導(dǎo)宿主的肽的合成3、目前三個(gè)反應(yīng)物水平磷酸化1,3-二磷酸甘油酸+ADP=3-磷酸甘油酸+ATP 磷酸烯醇式丙酮酸+ADP=丙酮酸+ATP 琥珀酸-CoA+GDP=琥珀酸+GTP 底物生成ATP和GTP4、開環(huán)DNA、線性DNA、超螺旋DNA在電泳時(shí)哪個(gè)更快由快到慢：超螺旋線性DNA開環(huán)DN

34、A三、簡(jiǎn)答1、真核生物與原核生物表達(dá)調(diào)控對(duì)比08年第1題2、列舉檢測(cè)DNA和蛋白質(zhì)之間相互作用的方法（1）研究DNA-蛋白質(zhì)相互作用的實(shí)驗(yàn)方法主要包括：凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)在凝膠電泳中，由于電場(chǎng)的作用，裸露的DNA分子向正電極移動(dòng)距離的大小是同其分子量的對(duì)數(shù)成反比。如果某種DNA分子結(jié)合上一種特殊的蛋白質(zhì)，那么由于分子量的加大它在凝膠中的遷移作用便會(huì)受到阻滯，于是朝正極移動(dòng)的距離也就相應(yīng)的縮短，因而在凝膠中出現(xiàn)滯后的條帶。DNase1足跡實(shí)驗(yàn) 是一種用來(lái)檢測(cè)被特定轉(zhuǎn)錄因子蛋白質(zhì)特異性結(jié)合的DNA序列的位置及其核苷酸序列結(jié)構(gòu)的專門實(shí)驗(yàn)方法。當(dāng)DNA分子中的某一區(qū)段同特異的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合之后便可以得到保護(hù)而

35、免受DNaseI酶的切割作用，而不會(huì)產(chǎn)生出相應(yīng)的切割分子，結(jié)果在凝膠電泳放射性自顯影圖片上便出現(xiàn)了一個(gè)空白區(qū)，俗稱為“足跡”。甲基化干擾實(shí)驗(yàn) 是根據(jù)DMS（硫酸二甲酯）能夠使DNA分子中裸露的鳥嘌呤（G）殘基甲基化，而六氫吡啶又會(huì)對(duì)甲基化的G殘基作特異性的化學(xué)切割這一原理設(shè)計(jì)的另一種研究蛋白質(zhì)同DNA相互作用的實(shí)驗(yàn)方法。體內(nèi)足跡實(shí)驗(yàn)體內(nèi)足跡試驗(yàn)的原理原則上同體外DMS足跡實(shí)驗(yàn)無(wú)本質(zhì)差別，即DMS能夠使G殘基甲基化；六氫吡啶能特異的切割甲基化的G殘基；同特異轉(zhuǎn)錄因子蛋白質(zhì)結(jié)合的識(shí)別序列中的G殘基由于受到蛋白質(zhì)的保護(hù)而不會(huì)被DMS甲基化，于是不會(huì)被六氫吡啶切割；同對(duì)照的裸露的DNA形成的序列梯作比

36、較，就會(huì)發(fā)現(xiàn)活細(xì)胞DNA形成的序列梯中缺少G殘基沒(méi)有被切割的相應(yīng)條帶。（2）研究蛋白質(zhì)/ 核酸相互作用近期采用的新技術(shù)有：核酸適體技術(shù)生物信息學(xué)方法蛋白質(zhì)芯片技術(shù)以及納米技術(shù)3、看圖，說(shuō)明是哪個(gè)實(shí)驗(yàn)；看圖，講解氧化磷酸化的解偶聯(lián)和抑制；電子傳遞的抑制劑09年第4題，氧化磷酸化抑制劑4、糖代謝及其相反途徑糖代謝途徑：（1）無(wú)氧酵解（糖酵解）當(dāng)機(jī)體處于相對(duì)缺氧情況（如劇烈運(yùn)動(dòng)）時(shí)，葡萄糖或糖原分解生成乳酸，并產(chǎn)生能量的過(guò)程稱之為糖的無(wú)氧酵解。這個(gè)代謝過(guò)程常見于運(yùn)動(dòng)時(shí)的骨骼肌，因與酵母的生醇發(fā)酵非常相似，故又稱為糖酵解。1分子葡萄糖在缺氧的條件下轉(zhuǎn)變?yōu)?分子乳酸，同時(shí)伴隨著能量的產(chǎn)生，凈產(chǎn)生2分子A

37、TP；糖原開始1分子葡萄糖單位糖酵解成乳酸，凈產(chǎn)生3分子ATP。（2）有氧氧化是指葡萄糖生成丙酮酸后，在有氧條件下，進(jìn)一步氧化生成乙酰輔酶A，經(jīng)三羧酸循環(huán)徹底氧化成水、二氧化碳及能量的過(guò)程。這是糖氧化的主要方式，是機(jī)體獲得能量的主要途徑。糖的有氧氧化中通過(guò)氧化磷酸化反應(yīng)得到34（或32）分子ATP，通過(guò)底物水平磷酸化生成6分子ATP。在肝、腎、心等組織中l(wèi)分子葡萄糖徹底氧化可生成38分子ATP，而骨骼肌及腦組織中只能生成36分子ATP，這一差別的原因是由于葡萄糖到丙酮酸這階段的反應(yīng)是在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行，3-磷酸甘油醛脫氫酶的輔酶NADH+H+又必須在線粒體內(nèi)進(jìn)行氧化磷酸化，因此NADH+H+要通過(guò)

38、穿梭系統(tǒng)進(jìn)入線粒體，由于穿梭系統(tǒng)的不同，最后獲得ATP數(shù)目亦不同。從糖原的葡萄糖殘基開始氧化，則每分子糖基氧化可形成39（或37）分子ATP。（3）磷酸戊糖途徑 是葡萄糖氧化分解的另一條重要途徑，它的功能不是產(chǎn)生ATP，而是產(chǎn)生細(xì)胞所需的具有重要生理作用的特殊物質(zhì)，如NADPH和5-磷酸核糖。這條途徑存在于肝臟、脂肪組織、甲狀腺、腎上腺皮質(zhì)、性腺、紅細(xì)胞等組織中。（4）糖原合成和糖原分解糖原合成是由葡萄糖合成糖原的過(guò)程。反之，糖原分解則是指肝糖原分解為葡萄糖的過(guò)程。糖原合成及分解反應(yīng)都是從糖原分支的非還原性末端開始，分別由兩組不同的酶催化。糖原合成首先以葡萄糖為原料合成尿苷二磷酸葡萄糖UDP-

39、Glc，在限速酶糖原合酶的作用下，將UDP-Glc轉(zhuǎn)給肝、肌肉中的糖原蛋白上，延長(zhǎng)糖鏈合成糖原。其次糖鏈在分支酶的作用下再分支合成多支的糖原。在限速酶糖原磷酸化酶的催化下，糖原從分支的非還原端開始，逐個(gè)分解以-1，4-糖苷鍵連接的葡萄糖殘基，形成G-1-P。G-1-P轉(zhuǎn)變?yōu)镚-6-P后，肝及腎中含有葡萄糖-6-磷酸酶，使G-6-P水解變成游離葡萄糖，釋放到血液中，維持血糖濃度的相對(duì)恒定。（5）糖異生是指非糖物質(zhì)如生糖氨基酸、乳酸、丙酮酸及甘油等轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟腔蛱窃倪^(guò)程。糖異生的最主要器官是肝臟。糖異生反應(yīng)過(guò)程基本上是糖酵解反應(yīng)的逆過(guò)程。（5）糖原合成和糖原分解糖原合成是由葡萄糖合成糖原的過(guò)程。

40、反之，糖原分解則是指肝糖原分解為葡萄糖的過(guò)程。糖原合成及分解反應(yīng)都是從糖原分支的非還原性末端開始，分別由兩組不同的酶催化。糖原合成首先以葡萄糖為原料合成尿苷二磷酸葡萄糖UDP-Glc，在限速酶糖原合酶的作用下，將UDP-Glc轉(zhuǎn)給肝、肌肉中的糖原蛋白上，延長(zhǎng)糖鏈合成糖原。其次糖鏈在分支酶的作用下再分支合成多支的糖原。在限速酶糖原磷酸化酶的催化下，糖原從分支的非還原端開始，逐個(gè)分解以-1，4-糖苷鍵連接的葡萄糖殘基，形成G-1-P。G-1-P轉(zhuǎn)變?yōu)镚-6-P后，肝及腎中含有葡萄糖-6-磷酸酶，使G-6-P水解變成游離葡萄糖，釋放到血液中，維持血糖濃度的相對(duì)恒定。四、論述翻譯英文文獻(xiàn)，關(guān)于ips，

41、同濟(jì)生命科學(xué)網(wǎng)站，熱點(diǎn)看基礎(chǔ)生命科學(xué)關(guān)于ips11年生化與分子一、填空、名詞涉及考點(diǎn)比活力：酶的比活力（specificactivity）代表酶制劑的純度。根據(jù)國(guó)際酶學(xué)委員會(huì)規(guī)定比活力用每毫克蛋白所含的酶活力單位數(shù)（IU/mg蛋白質(zhì)）表示。對(duì)于同一種酶來(lái)說(shuō)，比活力愈大，表示酶的純度愈高。比活力大小可以比較每單位質(zhì)量蛋白質(zhì)的催化能力。比活力=活力U/mg蛋白=總活力U/mg總蛋白R(shí)NA編輯：在mRNA水平上改變遺傳信息的過(guò)程。具體說(shuō)來(lái)，指基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA分子中，由于核苷酸的缺失，插入或置換，導(dǎo)致DNA所編碼的遺傳信息發(fā)生改變，因?yàn)榻?jīng)過(guò)編輯的mRNA序列發(fā)生了不同于模板DNA的變化。不僅擴(kuò)大

42、了遺傳信息，而且是生物更好地適應(yīng)環(huán)境。呼吸鏈：需氧細(xì)胞內(nèi)糖、脂肪、氨基酸等通過(guò)各自的分解途徑所形成的還原性輔酶，包括NADH和FADH2通過(guò)電子傳遞途徑被重新氧化。即還原型輔酶上的氫原子以質(zhì)子的形式脫下，其電子沿一系列按一定順序排列的電子傳遞體轉(zhuǎn)移，最后轉(zhuǎn)移給分子氧并生成水，這個(gè)電子傳遞體系稱為電子傳遞鏈。由于消耗氧，故也叫呼吸鏈。包括：NADH-Q還原酶、琥珀酸-Q還原酶、細(xì)胞色素還原酶、細(xì)胞色素氧化酶。呼吸鏈包含15種以上組分，主要由4種酶復(fù)合體和2種可移動(dòng)電子載體構(gòu)成。其中復(fù)合體、輔酶Q和細(xì)胞色素C的數(shù)量比為1:2:3:7:63:9。酮體：肝臟中，脂肪酸氧化分解的中間產(chǎn)物乙酰乙酸、-羥基

43、丁酸及丙酮，三者統(tǒng)稱為酮體。是饑餓或糖尿病時(shí)肝中脂肪酸大量氧化而產(chǎn)生乙酰輔酶A后縮合生成的產(chǎn)物。在饑餓期間酮體是包括腦在內(nèi)的許多組織的燃料，由于血腦屏障的存在，除葡萄糖和酮體外的物質(zhì)無(wú)法進(jìn)入腦為腦組織提供能量。饑餓時(shí)酮體可占腦能量來(lái)源的25%-75%。 肝臟具有較強(qiáng)的合成酮體的酶系，但卻缺乏利用酮體的酶系。 酮體是脂肪分解的產(chǎn)物，而不是高血糖的產(chǎn)物。進(jìn)食糖類物質(zhì)也不會(huì)導(dǎo)致酮體增多。三種底物水平磷酸化：底物水平磷酸化是指：在第五被氧化的過(guò)程中，底物分子內(nèi)部能量重新分布產(chǎn)生高能磷酸鍵，由此高能磷酸鍵提供能量使ADP磷酸化產(chǎn)生ATP的過(guò)程。1,3-二磷酸甘油酸+ADP=3-磷酸甘油酸+ATP 磷酸烯

44、醇式丙酮酸+ADP=丙酮酸+ATP 琥珀酸-CoA+GDP=琥珀酸+GTP 三羧酸循環(huán)：10年第4題等電點(diǎn)：在某一pH的溶液中，氨基酸解離成陽(yáng)離子和陰離子的趨勢(shì)及程度相等，所帶凈電荷為零，呈電中性，此時(shí)溶液的pH稱為該氨基酸的等電點(diǎn)。 兩性離子所帶電荷因溶液的pH值不同而改變，當(dāng)兩性離子正負(fù)電荷數(shù)值相等時(shí)，溶液的pH值即其等電點(diǎn)。當(dāng)外界溶液的pH大于兩性離子的pl值，兩性離子釋放質(zhì)子帶負(fù)電。當(dāng)外界溶液的pH小于兩性離子的pl值，兩性離子質(zhì)子化帶正電。當(dāng)達(dá)到等電點(diǎn)時(shí)氨基酸在溶液中的溶解度最小。米氏常數(shù)（Km）：它的數(shù)值等于酶促反應(yīng)達(dá)到其最大速度Vm一半時(shí)的底物濃度S即當(dāng)V=Vm/2時(shí)，【S】=K

45、m,單位為mol/l。Km是酶極為重要的動(dòng)力學(xué)參數(shù)，其物理含義是指ES復(fù)合物的消失速度常數(shù)(k-1+k2)與形成速度常數(shù)(k1)之比。當(dāng)PH、溫度、離子強(qiáng)度不變時(shí)，Km是恒定的。9、開環(huán)DNA、線性DNA、超螺旋DNA在電泳時(shí)哪個(gè)更快由快到慢：超螺旋線性DNA開環(huán)DNA二、簡(jiǎn)答1、糖酵解及相反途徑10年第5題2、三種分離蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)（1）根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同的分離方法蛋白質(zhì)的鹽析中性鹽對(duì)蛋白質(zhì)的溶解度有顯著影響，一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高，蛋白質(zhì)的溶解度增加，此稱鹽溶；當(dāng)鹽濃度繼續(xù)升高時(shí)，蛋白質(zhì)的溶解度不同程度下降并先后析出，這種現(xiàn)象稱鹽析，將大量鹽加到蛋白質(zhì)溶液中，高濃度的鹽離子（如

46、硫酸銨的 SO4 和 NH4)有很強(qiáng)的水化力，可奪取蛋白質(zhì)分子的水化層，使之“失水”，于是蛋白質(zhì)膠粒凝結(jié)并沉淀析出。鹽析時(shí)若溶液 pH 在蛋白質(zhì)等電點(diǎn)則效果更好。由于各種蛋白質(zhì)分子顆粒大小、親水程度不同，故鹽析所需的鹽濃度也不一樣，因此調(diào)節(jié)混合蛋白質(zhì)溶液中的中性鹽濃度可使各種蛋白質(zhì)分段沉淀。等電點(diǎn)沉淀法蛋白質(zhì)在靜電狀態(tài)時(shí)顆粒之間的靜電斥力最小，因而溶解度也最小，各種蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)有差別，可利用調(diào)節(jié)溶液的 pH 達(dá)到某一蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)使之沉淀，但此法很少單獨(dú)使用，可與鹽析法結(jié)合用。低溫有機(jī)溶劑沉淀法用與水可混溶的有機(jī)溶劑，甲醇，乙醇或丙酮，可使多數(shù)蛋白質(zhì)溶解度降低并析出，此法分辨力比鹽析高，但蛋

47、白質(zhì)較易變性，應(yīng)在低溫下進(jìn)行。（2）根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小的差別的分離方法透析與超濾透析法是利用半透膜將分子大小不同的蛋白質(zhì)分開。超濾法是利用高壓力或離心力，強(qiáng)使水和其他小的溶質(zhì)分子通過(guò)半透膜，而蛋白質(zhì)留在膜上，可選擇不同孔徑的瀘膜截留不同分子量的蛋白質(zhì)。凝膠過(guò)濾法也稱分子排阻層析或分子篩層析，這是根據(jù)分子大小分離蛋白質(zhì)混合物最有效的方法之一。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝膠（Sephadex ged）和瓊脂糖凝膠（agarose gel）。（3）根據(jù)蛋白質(zhì)帶電性質(zhì)進(jìn)行分離蛋白質(zhì)在不同 pH 環(huán)境中帶電性質(zhì)和電荷數(shù)量不同，可將其分開。電泳法各種蛋白質(zhì)在同一 pH 條件下，因分子量和電荷數(shù)量不同而在

48、電場(chǎng)中的遷移率不同而得以分開。值得重視的是等電聚焦電泳，這是利用一種兩性電解質(zhì)作為載體，電泳時(shí)兩性電解質(zhì)形成一個(gè)由正極到負(fù)極逐漸增加的 pH 梯度，當(dāng)帶一定電荷的蛋白質(zhì)在其中泳動(dòng)時(shí)，到達(dá)各自等電點(diǎn)的 pH 位置就停止，此法可用于分析和制備各種蛋白質(zhì)。離子交換層析法離子交換劑有陽(yáng)離子交換劑（如：羧甲基纖維素；CM-纖維素）和陰離子交換劑（二乙氨基乙基纖維素；DEAE?FONT FACE=宋體 LANG=ZH-CN纖維素），當(dāng)被分離的蛋白質(zhì)溶液流經(jīng)離子交換層析柱時(shí)，帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質(zhì)被吸附在離子交換劑上，隨后用改變 pH 或離子強(qiáng)度辦法將吸附的蛋白質(zhì)洗脫下來(lái)。（4）根據(jù)配體特異性的分

49、離方法親和色譜法親和層析法是分離蛋白質(zhì)的一種極為有效的方法，它經(jīng)常只需經(jīng)過(guò)一步處理即可使某種待提純的蛋白質(zhì)從很復(fù)雜的蛋白質(zhì)混合物中分離出來(lái)，而且純度很高。這種方法是根據(jù)某些蛋白質(zhì)與另一種稱為配體的分子能特異而非共價(jià)地結(jié)合。3、我國(guó)學(xué)者研究砷以治療疾病，談?wù)勀銓?duì)以毒攻毒的看法，并舉例說(shuō)明其他生活中以毒攻毒的例子以毒攻毒是中醫(yī)藥學(xué)一個(gè)重要醫(yī)理和治則。我國(guó)早在1500年前就把以毒攻毒作為免疫防疫的萌芽，例如宋真宗時(shí)期，丞相王旦之子，就是因?yàn)槭孪确N了痘苗才避免死于天花大流行。所以，以毒攻毒的傳統(tǒng)中醫(yī)療法，通過(guò)與現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的結(jié)合，在防止傳染病和疑難病領(lǐng)域有良好的發(fā)展前景。例子：蜂毒具有消炎、降壓、抗菌

50、、抗病毒、抗輻射及鎮(zhèn)痛等作用，因此被廣泛應(yīng)用于治療多種疾病。蜂毒具明顯的親神經(jīng)性，具有阻斷神經(jīng)節(jié)的作用，可以明顯提高疼痛的閾值，并且能夠調(diào)節(jié)物質(zhì)的代謝，致使神經(jīng)自我修復(fù)。蜂毒對(duì)于治療神經(jīng)系統(tǒng)的疾病療效理想，如對(duì)坐骨神經(jīng)痛、面神經(jīng)炎、偏頭痛、神經(jīng)官能癥及三叉神經(jīng)痛等有良好的治療效果。用蝎毒治療神經(jīng)系統(tǒng)和心腦血管系統(tǒng)疾病。4、前一種是NAOH抑制，后一種是泛素類的，兩種農(nóng)藥誰(shuí)更毒 前一種是化學(xué)農(nóng)藥，后一種是生物農(nóng)藥，生物農(nóng)藥的毒性比化學(xué)農(nóng)藥要低。生物農(nóng)藥有幾大優(yōu)勢(shì)：生物農(nóng)藥的毒性通常比傳統(tǒng)農(nóng)藥低；選擇性強(qiáng)，它們只對(duì)目的病蟲和與其緊密相關(guān)的少數(shù)有機(jī)體起作用而對(duì)人類、鳥類、其他昆蟲和哺乳動(dòng)物無(wú)害；低殘

51、留、高效。很少量的生物農(nóng)藥即能發(fā)揮高效能作用而且它通常能迅速分解從總體上避免了由傳統(tǒng)農(nóng)藥帶來(lái)的環(huán)境污染問(wèn)題；不易產(chǎn)生抗藥性 作為病蟲綜合防治項(xiàng)目IPMP的一個(gè)組成成分，能極大地降低傳統(tǒng)農(nóng)藥的使用，而不影響作物產(chǎn)量。三、論述1、英文文章，關(guān)于2002年諾貝爾獎(jiǎng)2002年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)分別授予英國(guó)科學(xué)家悉尼布雷內(nèi)、美國(guó)科學(xué)家羅卜特霍維茨和英國(guó)科學(xué)家約翰蘇爾斯頓，以表彰他們發(fā)現(xiàn)了在器官發(fā)育和“程序性細(xì)胞死亡”過(guò)程中的基因規(guī)則?！俺绦蛐约?xì)胞死亡”是細(xì)胞的一種生理性、主動(dòng)性的自覺自殺行為，這些細(xì)胞死得有規(guī)律，似乎是按編好了的“程序”進(jìn)行的，猶如秋天片片樹葉的凋落，所以這種細(xì)胞死亡又稱為“細(xì)胞凋亡”

52、。2、細(xì)胞凋亡及三種途徑細(xì)胞凋亡是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過(guò)程，而是主動(dòng)過(guò)程，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用；它并不是病理?xiàng)l件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭(zhēng)取的一種死亡過(guò)程。按照起始caspase的不同，可將哺乳細(xì)胞的凋亡分為三種基本的途徑。一種稱為外在途徑，由細(xì)胞表面的死亡受體如Fas和腫瘤壞死因，子受體家族引發(fā)另一種稱為內(nèi)在途徑或線粒體途徑，由許多應(yīng)激條件、化學(xué)治療試劑和藥物所起始第三種途徑是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激所導(dǎo)致的caspase-12的活化，從而導(dǎo)致凋亡12年生化與分子一、名詞-

53、磷酸甘油穿梭：該穿梭機(jī)制主要在腦及骨骼肌中，它是借助于-磷酸甘油與磷酸二羥丙酮之間的氧化還原轉(zhuǎn)移還原當(dāng)量，使線粒體外來(lái)自NADH的還原當(dāng)量進(jìn)入線粒體的呼吸鏈氧化。 當(dāng)胞液中NADH濃度升高時(shí)，胞液中的磷酸二羥丙酮首先被NADH還原成磷酸甘油(3-磷酸甘油)，生成的磷酸甘油可再經(jīng)位于線粒體內(nèi)膜近外側(cè)部的甘油磷酸脫氫酶催化氧化生成磷酸二羥丙酮。線粒體與胞液中的甘油磷酸脫氫酶為同工酶，兩者不同在于線粒體內(nèi)的酶是以FAD為輔基的脫氫酶，F(xiàn)AD所接受的質(zhì)子、電子可直接經(jīng)泛醌、復(fù)合體、傳遞到氧，生成1.5分子 ATP。衰減子：原核生物操縱子中能顯著減弱甚至終止轉(zhuǎn)錄作用的一段核苷酸序列。該區(qū)域能行成不同的二

54、級(jí)結(jié)構(gòu)，利用原核生物轉(zhuǎn)錄與翻譯的偶聯(lián)機(jī)制對(duì)轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)節(jié)。-氧化：脂肪酸在羧基端的-碳原子上進(jìn)行氧化，然后-碳原子和-碳原子之間的鍵發(fā)生斷裂，-碳原子氧化成羧基生成含有兩個(gè)碳原子的乙酰CoA和比原來(lái)少2個(gè)C的脂酸。由于降解均發(fā)生在羧基端第二位的碳原子，在這一出切掉兩個(gè)碳原子單位，最后-碳原子被氧化成?；?，所以稱為-氧化。磷酸戊糖途徑：葡萄糖氧化分解的一種方式，由于此途徑是由6-磷酸葡萄糖(G-6-P)開始，故亦稱為己糖磷酸旁路。此途徑在胞漿中進(jìn)行，可分為兩個(gè)階段。第一階段由G-6-P脫氫生成6-磷酸葡糖酸內(nèi)酯開始，然后水解生成6-磷酸葡糖酸，再氧化脫羧生成5-磷酸核酮糖。NADP+是所有上述氧化

55、反應(yīng)中的電子受體。第二階段是5-磷酸核酮糖經(jīng)過(guò)一系列轉(zhuǎn)酮基及轉(zhuǎn)醛基反應(yīng)，經(jīng)過(guò)磷酸丁糖、磷酸戊糖及磷酸庚糖等中間代謝物最后生成3-磷酸甘油醛及6-磷酸果糖，后二者還可重新進(jìn)入糖酵解途徑而進(jìn)行代謝。氧化磷酸化：是指電子在沿著電子傳遞鏈傳遞過(guò)程中伴隨著的，將ADP磷酸化而形成ATP的過(guò)程。Transformation（轉(zhuǎn)化）：是某一基因型的細(xì)胞從周圍介質(zhì)中吸收來(lái)自另一基因型的細(xì)胞的DNA而使它的基因型和表現(xiàn)型發(fā)生相應(yīng)變化的現(xiàn)象。該現(xiàn)象首先發(fā)現(xiàn)于細(xì)菌魔斑核苷酸：受嚴(yán)禁控制的細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中一旦缺乏氨基酸供應(yīng)，細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生應(yīng)急反應(yīng)，使蛋白質(zhì)和RNA的合成迅速降下來(lái)。魔斑核苷酸指的就是這個(gè)過(guò)程中由大量GTP合

56、成的鳥苷四磷酸（ppGpp）和鳥苷五磷酸（pppGopp），ppGpp和pppGopp的作用可能是影響RNApol和啟動(dòng)子結(jié)合的專一性，誘發(fā)應(yīng)急反應(yīng)，幫助細(xì)菌度過(guò)難關(guān)。這兩種核苷酸在層析譜上呈現(xiàn)出斑點(diǎn)狀，所以稱為魔斑核苷酸或者超級(jí)調(diào)控子。Cori cycle（乳酸循環(huán)）：肌肉收縮通過(guò)糖酵解生成乳酸，部分乳酸通過(guò)排尿排出，大部分乳酸通過(guò)細(xì)胞膜彌散進(jìn)入血液后，再入肝，在肝臟內(nèi)在乳酸脫氫酶作用下變成丙酮酸，接著通過(guò)糖異生生成為葡萄糖。葡萄糖進(jìn)入血液形成血糖，后又被肌肉攝取，這就構(gòu)成了一個(gè)循環(huán)(肌肉-肝臟-肌肉)，此循環(huán)稱為乳酸循環(huán)。9、urea cycle（尿素循環(huán)）：稱為鳥氨酸循環(huán)，肝臟中2分子氨

57、(1分子氨是游離的，1分子氨來(lái)自天冬氨酸)和1分子CO2生成1分子尿素的環(huán)式代謝途徑。尿素循環(huán)是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的環(huán)式代謝途徑。10、基因敲除(gene knock-out)：是指一種 HYPERLINK :/baike.haosou /doc/5448112-5686480.html t _blank 遺傳工程基因修飾技術(shù)，針對(duì)某個(gè)感興趣的遺傳基因，通過(guò)一定的基因改造過(guò)程，令特定的基因功能喪失，并研究可能進(jìn)一步對(duì)相關(guān)生命現(xiàn)象造成的影響，進(jìn)而推測(cè)該基因的生物學(xué)功能。二、填空1、血紅蛋白與氧具有正協(xié)同性同促效應(yīng)2、pI=4.6，pI=5.2，pI=9.5,用EDTA纖維洗脫，最先被洗出來(lái)的是3、2型

58、內(nèi)含子與酶促剪接內(nèi)含子的兩個(gè)共同點(diǎn)都需要酶參與，套索結(jié)構(gòu)4、DNA和mRNA配對(duì)（考?jí)A基互補(bǔ)配對(duì)）5、氨對(duì)哺乳動(dòng)物有害的原因是氨會(huì)大量消耗-酮戊二酸和NADPH，破壞TCA循環(huán)和需要還原力的反應(yīng)，所以血液中過(guò)量的氨會(huì)導(dǎo)致哺乳動(dòng)物中樞系統(tǒng)紊亂6、TCA中潛在線粒體內(nèi)膜的酶：琥珀酸脫氫酶7、CAMP-CRP對(duì)乳糖操縱子的影響 衰減作用8、在肝、腎中的脫氨基方式 聯(lián)合脫氨 ，在肌肉中的脫氨基方式 以嘌呤核苷酸循環(huán)為主的聯(lián)合脫氨9、糖酵解中的脫氫方式 甘油醛-3-磷酸 變成 1,3-二磷酸甘油醛10、稀有堿基存在于 tRNA 11、乙酰COA合成膽固醇的限速酶 HMG-COA還原酶12、RNA編輯中需

59、要 gRNA 指導(dǎo)13、最適底物 Km越小越好14、蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的正確行使出 氨基酸序列 為決定因素外，還需要 分子伴娘 蛋白質(zhì)參與15、抑制作用類型競(jìng)爭(zhēng)性抑制、反競(jìng)爭(zhēng)性抑制、非競(jìng)爭(zhēng)性抑制三、簡(jiǎn)答1、lac操縱子在1.葡萄糖 2.乳糖 3.有葡萄糖有乳糖 的三類培養(yǎng)基上CAMP,CPR,阻遏蛋白，b半乳糖苷酶的各種變化葡萄糖乳糖葡萄糖和乳糖cAMP減少不變先減少后不變CPR不變不變不變阻遏蛋白增加減少先增加后減少-半乳糖苷酶減少增加先減少后增加cAMP是環(huán)腺苷酸，CPR是環(huán)腺苷酸受體，lac操縱子即乳糖操縱子主要是編碼降解乳糖所需要的酶，具有正負(fù)調(diào)控機(jī)制。（1）負(fù)調(diào)控：有乳糖分子存在時(shí)：異構(gòu)

60、乳糖與結(jié)合在操縱區(qū)上的阻遏物相結(jié)合，使后者失活而離開操縱區(qū)，開始乳糖操縱基因mRNA的生物合成；當(dāng)乳糖分子消耗完畢，由于阻遏物仍在不斷的被合成，有活性的阻遏物濃度將超過(guò)異構(gòu)乳糖的濃度，使細(xì)胞重新建立起阻遏狀態(tài)，導(dǎo)致乳糖操縱基因mRNA合成被抑制。葡萄糖的影響：乳糖代謝產(chǎn)生的葡萄糖被利用，但當(dāng)環(huán)境中有葡萄糖存在時(shí)，細(xì)菌優(yōu)先利用葡萄糖，葡萄糖的降解產(chǎn)物會(huì)抑制腺苷酸環(huán)化酶，使cAMP濃度大大降低，從而阻遏乳糖操縱基因mRNA的合成。（2）正調(diào)控：CPR與cAMP是乳糖操縱基因mRNA所必須的，細(xì)菌對(duì)cAMP-CPR復(fù)合物的需要是獨(dú)立的，與阻遏體系無(wú)關(guān)，轉(zhuǎn)錄必須要有cAMP-CPR復(fù)合物結(jié)合在DNA的