絞股藍(lán)總皂苷提取工藝研究

1、絞股藍(lán)總皂苷提取工藝研究【摘要】目的研究絞股藍(lán)總皂苷的提取工藝。方法采用正交試驗設(shè)計法,以絞股藍(lán)總皂苷提取量為考察指標(biāo),對影響絞股藍(lán)總皂苷提取工藝的因素進(jìn)展了優(yōu)眩結(jié)果提取時間、提取次數(shù)對提取效果有顯著影響,乙醇用量的影響不顯著。結(jié)論絞股藍(lán)總皂苷的最正確提取工藝為：藥材加8倍量70%的乙醇,回流提取3次,每次2h?！娟P(guān)鍵詞】絞股藍(lán)總皂苷；提取工藝；正交設(shè)計abstrat：bjetivetstudytheextratintehniquesfttalsapniningynstea.ethdardingtthettalsapninextratingrate,theextratingtehniquese

2、reptiizedbyrthgnaldesign.resultsthefatrsthatextratingtieandextratingtieshavesignifianteffetnttalsapninextratin,andtheauntfalhlslutinhasinsignifianteffetnit.nlusintheptialextratingtehniqueserea1b33,refluxingextratinfr3tiesith8fld70%ethand,2hursfreahtie.keyrds：gynsteattalsapnin；extratingtehniques；rthg

3、naldesign絞股藍(lán)(gynstea)為葫蘆科絞股藍(lán)屬多年生蔓生草本植物,主要含有皂苷、黃酮、多糖,還含有人體必須的多種氨基酸、維生素和微量元素等成分?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究說明,絞股藍(lán)具有抑制腫瘤、抗衰老、降低血脂、增強(qiáng)免疫力和保護(hù)心臟的作用1。絞股藍(lán)總皂苷片作為藥品已經(jīng)上市多年,用于高脂血癥,見有心悸氣短、胸悶肢麻、眩暈頭痛、健忘耳鳴、自汗乏力或脘腹脹滿等心脾氣虛、痰阻血瘀者。為了最大限度提取并保持絞股藍(lán)的有效成分,保證絞股藍(lán)藥材資源的充分利用,進(jìn)步經(jīng)濟(jì)效益,本研究用正交試驗優(yōu)選絞股藍(lán)提取工藝。1儀器與試藥uv-2601型紫外分光光度計(島津)；人參皂苷rb1對照品(中國藥品生物制品檢定所)。

4、冰醋酸、高氯酸、甲醇、香草醛、正丁醇、石油醚等均為分析純。樣品：七葉絞股藍(lán)莖葉混合物,產(chǎn)于四川臥龍地區(qū)。2方法2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備2精細(xì)稱取人參皂苷rb1對照品10g置5l容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為2.0g/l的儲藏液。精細(xì)量取儲藏液50、100、150、200、250l分別置15l具塞試管中,揮干甲醇,分別參加新配置的5%香草醛冰醋酸溶液0.4l、高氯酸1.6l,搖勻,密塞,置60水浴中加熱15in后取出,立即用冷水冷卻至室溫,分別精細(xì)參加冰醋酸10l,搖勻,作為供試品溶液。另精細(xì)量取甲醇溶液250l置15l具塞試管中,按照上述操作,到參加冰醋酸10l搖勻為止,作為空

5、白溶液。取供試品溶液和空白溶液,照分光光度法?中華人民共和國藥典?(一部)附錄a試驗,在560n的波長處分別測定吸收度。以人參皂苷rb1的量x(g)對吸收度a進(jìn)展回歸,得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：a=1.2757x+0.0019,r=0.9989。結(jié)果說明,當(dāng)取樣量在0.1020.510g范圍內(nèi)時,人參皂苷rb1的含量與吸收度呈良好的線性關(guān)系。2.2絞股藍(lán)總皂苷含量測定方法精細(xì)稱取絞股藍(lán)總皂苷粉末20g置5l容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻。精細(xì)量取200l置15l具塞試管中,揮干甲醇后按“2.1項下操作,測定吸收度,用標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出絞股藍(lán)總皂苷的含量。2.3絞股藍(lán)總皂苷的提取工藝將枯燥的絞股藍(lán)藥

6、材粉碎成粗粉,準(zhǔn)確稱量100g置圓底燒瓶中,用70%乙醇屢次回流提取,合并提取液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后減壓枯燥,枯燥物用1000l的熱水充分溶解,參加同體積的石油醚萃取3次,將水層溶液用同體積的水飽和的正丁醇反復(fù)萃取,至正丁醇層無色為止,合并正丁醇提取液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后減壓枯燥,即得。2.4絞股藍(lán)總皂苷提取工藝的正交設(shè)計根據(jù)初步試驗結(jié)果,選用l9(34)正交試驗表,以乙醇用量(a)、提取時間(b)、提取次數(shù)()為試驗因素,每個因素取3個程度(見表1)。取樣品,按照正交設(shè)計進(jìn)展實驗,以絞股藍(lán)總皂苷的提取量為考察指標(biāo),進(jìn)展提取工藝的優(yōu)眩表1正交試驗因素程度表略2.5絞股藍(lán)總皂苷提取工藝的穩(wěn)定性試

7、驗按照正交試驗選擇的工藝條件,重復(fù)進(jìn)展絞股藍(lán)總皂苷的提取,并依法測定絞股藍(lán)總皂苷的含量,評價正交試驗選擇的工藝條件是否穩(wěn)定。3結(jié)果3.1正交試驗結(jié)果按表1的因素程度設(shè)計,正交試驗結(jié)果見表2,方差分析見表3。由表2中極差的直觀分析法r值可以看出,因素b的極差0.56為最大,說明它是a、b、三因素中對絞股藍(lán)總皂苷提取影響最大的因素,其次是因素,它的極差為0.47,這3個因素對絞股藍(lán)總皂苷提取的影響由大到小的順序依次為ba。由表3的方差分析結(jié)果可以看出,在=0.1的程度上,b因素和因素對絞股藍(lán)總皂苷提取有顯著性影響,a因素的影響不顯著。結(jié)合表2和表3的分析可以得出最正確工藝條件為a1b33,即藥材加

8、8倍量70%的乙醇,回流提取3次,每次2h,。表2正交試驗結(jié)果略3.2絞股藍(lán)總皂苷提取工藝的穩(wěn)定性試驗結(jié)果為了驗證正交試驗優(yōu)選的工藝條件的穩(wěn)定性,稱取3份100g絞股藍(lán)藥材,分別按照最正確工藝條件a1b33操作。合并回流提取液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后減壓枯燥,枯燥物用1000l的熱水充分溶解,參加同體積的石油醚萃取3次,將水層溶液用同體積水飽和的正丁醇反復(fù)萃取,至正丁醇層無色為止,合并正丁醇提取液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器減壓枯燥濃縮。平行操作,依法測定絞股藍(lán)總皂苷的含量,結(jié)果見表4。表3方差分析表略表4絞股藍(lán)總皂苷提取工藝穩(wěn)定性試驗結(jié)果略4討論本實驗以絞股藍(lán)總皂苷提取量為參考指標(biāo),對絞股藍(lán)總皂苷的提取工藝進(jìn)展了優(yōu)選,優(yōu)選的最正確工藝條件為a1b33。按照最正確工藝條件進(jìn)展重復(fù)性試驗,試驗結(jié)果為：絞股藍(lán)總皂苷的平均提取率為(61.30.10)g/kg,rsd=1.64%。結(jié)果說明,用該工藝提取有較高的絞股藍(lán)總皂苷提取率,且穩(wěn)定性良好。因甲醇毒性較大,本實驗使用乙醇作為提取介質(zhì),有利于減少提取液中的雜質(zhì),增加溶出度；采用水浴恒溫減壓提