臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢

1、臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第1頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日主要內(nèi)容標(biāo)本采集的意義和原則標(biāo)本的運(yùn)送與拒收原則血液標(biāo)本采集尿標(biāo)本采集糞便標(biāo)本采集痰標(biāo)本采集咽拭子標(biāo)本采集第2頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日臨床感染性疾病的診斷和治療應(yīng)用良好的檢測技術(shù)和方法，提供準(zhǔn)確的結(jié)果或報(bào)告正確規(guī)范的采集和運(yùn)送標(biāo)本正確地選擇檢查目的和方法第3頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日 標(biāo)本采集是指采集患者體內(nèi)的一小部分血液、體液、排泄物、分泌物以及組織細(xì)胞等標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)，以反映機(jī)體正常的生理現(xiàn)象和病理改變。 標(biāo) 本 采 集第4頁，共64頁，2022

2、年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日 標(biāo) 本 采 集標(biāo)本采集正確與否與檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性有密切的關(guān)系因此，我們應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法。第5頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日協(xié)助明確疾病診斷推測病程進(jìn)展 制定治療措施觀察病情標(biāo)本采集的意義第6頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日 遵照醫(yī)囑充分準(zhǔn)備 嚴(yán)格查對 正確采集 及時送檢標(biāo)本采集的原則第7頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日一、按醫(yī)囑采集標(biāo)本醫(yī)生填寫檢驗(yàn)申請單檢驗(yàn)單應(yīng)標(biāo)明姓名、性別、住院號、床號、標(biāo)本種類、檢驗(yàn)?zāi)康暮退蜋z日期等。第8頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星

3、期日二、評估(充分準(zhǔn)備、嚴(yán)格查對)采集標(biāo)本前應(yīng)先評估患者的病情、 心理反應(yīng)與合作程度。根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇相應(yīng)的標(biāo)本容器在容器外貼上檢驗(yàn)單的副聯(lián)第9頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日二、評估(充分準(zhǔn)備、嚴(yán)格查對)向患者解釋采集標(biāo)本的目的方法、 以消除顧慮，取得合作。采集時認(rèn)真核對床號、姓名、檢 驗(yàn)項(xiàng)目等第10頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日三、掌握正確的標(biāo)本采集方法 為保證標(biāo)本的質(zhì)量，獲得陽性結(jié)果，應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法、采集量和采集時間并應(yīng)及時送檢，特殊標(biāo)本還需注明采集時間。 第11頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日四、及時送

4、檢 采集標(biāo)本后應(yīng)及時送檢，一般情況下，用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本保存時間不應(yīng)超過24h，最好2h內(nèi)能送檢，越快越好，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。第12頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日標(biāo)本的運(yùn)送原則所有的標(biāo)本都必須立即送往實(shí)驗(yàn)室，最好在2h內(nèi),保存時間不應(yīng)超過24h.最佳的臨床標(biāo)本送檢首先取決于所獲取標(biāo)本的量.量少的標(biāo)本應(yīng)在采集后15-30min內(nèi)送檢.對環(huán)境敏感的微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌（對低溫敏感）應(yīng)立即處理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、內(nèi)耳道標(biāo)本。第13頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日標(biāo)本的拒收原則無標(biāo)簽不檢測，并與送檢的醫(yī)生和護(hù)士聯(lián)系。送檢

5、延誤不接收，提醒送檢者，要求重新采集。送檢容器不當(dāng)或滲漏不接收，告知送檢者，要求重新采集。第14頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日標(biāo)本的拒收原則標(biāo)本不符合要求不接收，聯(lián)系送檢者，指出不符合要求之處，要求重新采集符合試驗(yàn)要求的標(biāo)本.同一天內(nèi)收到同一檢測目的的相同標(biāo)本（血液標(biāo)本除外）不檢測，與送檢者聯(lián)系并說明標(biāo)本重復(fù)不予處理，并在報(bào)告單上注明 第15頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日標(biāo)本拒收原則制訂的目的我們必須重視標(biāo)本的質(zhì)量，對不規(guī)范采集、保存和運(yùn)送的標(biāo)本要采取糾正措施。如果檢測不合格的標(biāo)本，那么得出的結(jié)果會給醫(yī)生提供錯誤的信息，導(dǎo)致誤診和治療不當(dāng)。因

6、此，實(shí)驗(yàn)室必須制訂并嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)本接收和拒收準(zhǔn)則 第16頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日臨床常見標(biāo)本血液（生化、免疫及微生物檢驗(yàn)）尿液糞便痰及上呼吸道標(biāo)本穿刺液標(biāo)本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本生殖道標(biāo)本組織標(biāo)本第17頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日血標(biāo)本檢驗(yàn)的意義血液是臨床最常見的檢驗(yàn)項(xiàng)目它可以反映血液系統(tǒng)本身的病變還可判斷病人病情進(jìn)展程度為治療疾病提供參考。 第18頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日 血標(biāo)本采集方法（一）靜脈血標(biāo)本（最常用）（二）動脈血標(biāo)本(血?dú)夥治?（三）毛細(xì)血管標(biāo)本（血常規(guī)）第19頁

7、，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日 靜脈血標(biāo)本分類及目的全血標(biāo)本血清標(biāo)本血培養(yǎng)標(biāo)本 血沉、血常規(guī)、凝血機(jī)制檢測等血清酶、脂類、電解質(zhì)、肝功能血中的致病菌第20頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日靜脈血采集操作步驟及要點(diǎn) 攜用物至床邊，核對床號、姓名、解釋 戴手套，選擇靜脈，常規(guī)系止血帶、 消毒皮膚，囑患者握拳 行靜脈穿刺、取血、松止血帶、囑患者松拳、按壓針眼、迅速拔針穿刺點(diǎn)按壓23min 第21頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日血液注入標(biāo)本瓶內(nèi)方法 血清標(biāo)本： 取下針頭，將血液順試管壁緩慢注入干燥試管（最常用）內(nèi)。 第22頁，共64

8、頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日 注入血標(biāo)本的方法第23頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日注意事項(xiàng)（1）嚴(yán)禁在輸液、輸血的針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果。（最好在對側(cè)采集）第24頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日注意事項(xiàng)（2）若同時抽取幾個項(xiàng)目的血標(biāo)本，一般注入容器的順序?yàn)椋貉囵B(yǎng)瓶抗凝瓶干燥試管. 動作要迅速準(zhǔn)確，避免溶血。第25頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日 血標(biāo)本的微生物學(xué)檢查1.采血時間及次數(shù)：一般應(yīng)在抗生素治療前，發(fā)熱初期或高峰時抽血。 傷寒患者應(yīng)在發(fā)熱1-2周內(nèi)抽血 化膿性腦膜炎、鼠疫或野兔熱患者

9、應(yīng)在發(fā)熱1-2d內(nèi)抽血 急性敗血癥應(yīng)在24小時內(nèi)抽血3次或更多次，并可在不同部位，如左、右手臂或頸部 第26頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日采血時間及次數(shù)不明原因發(fā)熱應(yīng)不定期多次、多部位采樣送檢。24小時內(nèi)不超過3次，如培養(yǎng)陰性應(yīng)繼續(xù)采樣送檢 急性心內(nèi)膜炎應(yīng)在治療前1-2小時內(nèi)分別在3個不同部位抽血，分別進(jìn)行培養(yǎng)。亞急性心內(nèi)膜炎及布魯菌感染的患者，除在發(fā)熱采血外，并要多次抽血（24h內(nèi)3-4次）和增加抽血量（可增至10ml）。 第27頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日 血標(biāo)本2.抽血部位及抽血量 以無菌方法從患者肘靜脈采血。采血量以培養(yǎng)基的1/51

10、/10為宜，成人一次采血5-10ml，兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml。血液抽出后，立即以無菌手續(xù)注入血培養(yǎng)瓶，充分混合后送檢。第28頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日骨髓標(biāo)本的微生物學(xué)檢查 采集部位：骨髓穿刺法從髂骨采集標(biāo)本。 采集時間：在用藥前、發(fā)熱初期或高熱期 當(dāng)骨髓炎時或長期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽性率遠(yuǎn)高于血液培養(yǎng) 第29頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日全自動血培養(yǎng)儀BacT/Alert 120 第30頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日培養(yǎng)基的選擇： 普通需氧培養(yǎng)瓶：采血量4ml,用于未使用抗菌素患者的需氧培

11、養(yǎng)。主要用于小兒。 第31頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日建 議不管患者是否使用過抗生素，是做細(xì)菌培養(yǎng)還是真菌培養(yǎng)成人 采血量5ml 小兒 采血量4ml第32頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日注意事項(xiàng) 嚴(yán)格做好患者抽血部位的無菌操作。嚴(yán)禁在輸液、輸血的針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果（要在對側(cè)采集）。注入標(biāo)本后的血培養(yǎng)瓶務(wù)必立即送至臨床細(xì)菌室，如因某種原因不能立即送檢時，應(yīng)將已接種樣本的培養(yǎng)瓶放在室溫，切勿放冰箱存放。 第33頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日注意事項(xiàng)每次領(lǐng)培養(yǎng)瓶不宜過多，以防過期，未使用的培養(yǎng)瓶亦應(yīng)室溫保存（

12、15-30），切勿放冰箱保存。第34頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日 二、尿液標(biāo)本的采集 留取尿液標(biāo)本作物理、化學(xué)、細(xì)菌和顯微鏡等檢查以助診斷和觀察療效。 第35頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日尿液標(biāo)本采集時間： 一般原則 通常應(yīng)采集晨起第一次尿液送檢。原則上應(yīng)選擇在抗菌藥物應(yīng)用之前采集尿液。第36頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日尿液標(biāo)本的采集時間結(jié)核分枝桿菌感染 留取晨尿或24小時尿的沉渣部分10-15ml作涂片檢查，若為培養(yǎng)，患者應(yīng)停藥1-2天后再采樣，以提高陽性率 沙門菌、鉤端螺旋體感染 感染后2周左右采集 第37頁

13、，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日采集方法 中段尿采集方法 （最常用）集尿法 結(jié)核分枝桿菌檢查時，可用一清潔容器，留24小時尿取其沉渣10-15ml送檢 導(dǎo)尿法、腎盂尿采集法、膀胱穿刺采集法 第38頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日中段尿采集方法 女性：成年女性外陰部先以肥皂水清洗，再以無菌水沖洗，然后排尿棄去前段尿，留取中段尿10ml左右于無菌試管內(nèi)送檢 男性：先用肥皂水清洗尿道口，后用清水沖洗，留取中段尿 兒童、嬰兒：先以無菌生理鹽水清洗外陰部或外生殖器，將無菌試管對準(zhǔn)尿道口，待尿排出后送檢 第39頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，

14、星期日注意事項(xiàng) 嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，因?yàn)槟蛞簶?biāo)本的采集和培養(yǎng)中最大的問題是污染雜菌 通常應(yīng)取晨起第一次尿液送檢 多數(shù)藥物均通過尿液排泄，因此采集尿液應(yīng)在用藥前進(jìn)行 第40頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日三、糞便標(biāo)本的采集 收集糞便標(biāo)本，做實(shí)驗(yàn)室檢查，有助于評估病人排泄功能及準(zhǔn)確評估疾病。第41頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日糞便標(biāo)本采集時間： 1采樣原則 腹瀉病人應(yīng)在急性期采集（3天以內(nèi)），以提高檢出率，亦最好在用藥之前。2沙門菌感染 腸熱癥在2周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便 第42頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星

15、期日采集方法 自然排便采集法 自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內(nèi)或保存液中送檢 直腸拭子方法 如不易獲得糞便時，或排泄困難的患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤后，插入肛門內(nèi)4-5cm（幼兒2-3cm）輕輕轉(zhuǎn)動取出，插入無菌試管內(nèi)送檢。第43頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日注意事項(xiàng) 雖糞便含有多種雜菌，但應(yīng)盡量采用無菌容器（一次性無菌平皿）。 為提高檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應(yīng)挑取其膿血、 粘液部分。 第44頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日四、痰及上呼吸道標(biāo)本的采集 采

16、集痰標(biāo)本作細(xì)菌培養(yǎng)，或涂片后經(jīng)特殊染色以檢查細(xì)菌、真菌或抗酸桿菌等，以助診斷；從咽部及扁桃體采取分泌物作細(xì)菌培養(yǎng)或病毒分離第45頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日痰及上呼吸道標(biāo)本 采集時間: 痰：一般以晨痰為好；支氣管擴(kuò)張癥患者，清晨起床后進(jìn)行體位引流，可采集大量痰標(biāo)本。咽拭標(biāo)本：時間上雖無嚴(yán)格限制，但應(yīng)于抗菌藥物治療前為好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集為宜 第46頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日采集方法： 痰液標(biāo)本： 自然咳痰法：患者清晨起床后，先用朵貝爾氏液（復(fù)方硼砂溶液）漱口，再以開水或生理鹽水漱口，以減少口腔常居菌群的污染，

17、然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無菌痰懷內(nèi)送檢 第47頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日采集方法：小兒取痰法：用壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，送檢 第48頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日采集方法： 上呼吸道標(biāo)本（咽拭子） 采集上呼吸道標(biāo)本通常采用無菌棉拭子。采集前患者應(yīng)用開水或生理鹽水反復(fù)漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子通過舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)，涂抹數(shù)次，但拭子要避免接觸口腔和舌粘膜 第49頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日注意事項(xiàng)： 1

18、采集標(biāo)本以清晨為佳，以減少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。2 做結(jié)核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)的標(biāo)本若不能及時送檢，應(yīng)放4冰箱保存，以免雜菌生長。（血培養(yǎng)瓶室溫）3 作結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24小時痰液，以提高陽性檢出率。第50頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日穿刺液標(biāo)本 腦脊液 采集時間： 懷疑為腦膜炎的病人，應(yīng)立即采集腦脊液，最好在用藥前采集 采集方法：用腰穿方法采集腦脊液3-5ml，一般放入3個無菌試管，每個試管1-2ml.如果用于檢測細(xì)菌或病毒，應(yīng)1ml，如果用于檢測真菌或抗酸桿菌，應(yīng)2ml 第51頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，

19、星期日注意事項(xiàng)： 如果用于檢測細(xì)菌，收集腦脊液后，最好能在常溫下15-30分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿。腦脊液標(biāo)本不可置冰箱保存，否則會使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟菌（能產(chǎn)生自溶素迅速自溶）、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌 。第52頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日注意事項(xiàng)：如果只采集了一管腦脊液，應(yīng)先送細(xì)菌室做細(xì)菌培養(yǎng)，再做腦脊液生化、常規(guī)等檢查腰穿時應(yīng)嚴(yán)格無菌操作 不需要加入防腐劑 作腦脊液培養(yǎng)時，建議同時作血培養(yǎng) 第53頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日穿刺液標(biāo)本其他穿刺液（胸腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等） 采集時間：當(dāng)懷疑感染存在，應(yīng)盡早采集標(biāo)本，一般在患者使

20、用抗菌藥物之前或停止用藥后1-2日采集 采集方法：采用無菌方法用注射器抽取體內(nèi)可疑感染部位的液體，注入無菌試管立即送檢 第54頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日注意事項(xiàng)： 一般要求常溫下15-30分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿，尤其是腦脊液和心包液；除了做結(jié)核桿菌、真菌培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)在4下保存外，做其他項(xiàng)目的應(yīng)常溫保存。嚴(yán)格無菌穿刺。第55頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日注意事項(xiàng)：為了防止穿刺液的凝固，最好在無菌試管中預(yù)先加入滅菌肝素，再注入穿刺液 盡可能采集更多的液體，至少1ml第56頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本 采集方法： 開放性膿腫和膿性分泌物 先以無菌鹽水沖洗潰瘍表面，用2支無菌棉拭子拭取潰瘍深處的分泌物后插入無菌試管送檢。一支為涂片檢查用，另一支作培養(yǎng)用 第57頁，共64頁，2022年，5月20日，19點(diǎn)7分，星期日采集方法： 大面積燒傷的創(chuàng)面分泌物 用無菌棉拭子取多部位創(chuàng)面的膿液或分泌物，置無菌試管內(nèi)送檢 封閉性膿腫 消毒局部皮膚