實(shí)驗(yàn)五細(xì)菌的生長現(xiàn)象和代謝產(chǎn)物的觀察

1、課程名稱：微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù) 授課專業(yè)：醫(yī)學(xué)檢驗(yàn) 學(xué)時：2學(xué)時實(shí)驗(yàn)五細(xì)菌的生長現(xiàn)象和代謝產(chǎn)物的觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆沼^察菌落的方法，細(xì)菌在固體、半固體、液體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象及 意義；熟悉鑒別細(xì)菌常用的生化反應(yīng)實(shí)驗(yàn)原理、方法和結(jié)果判斷。二實(shí)驗(yàn)物品菌種：金葡、白葡、檸葡、大腸桿菌、枯草桿菌 Culture media :葡萄糖發(fā)酵管 乳糖發(fā)酵管 蛋白腺水試劑：靛基質(zhì)試劑三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象菌落：接種的細(xì)菌適當(dāng)?shù)姆珠_，經(jīng)一段時間培養(yǎng)后，由1個細(xì)菌生長繁殖而形成單一的肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)。菌苔：當(dāng)細(xì)菌在培養(yǎng)基表面密集生長時，多個菌落融合在一起。菌種大小形狀突起邊緣表面透明度顏色葡萄球

2、菌中等圓形凸起整齊光滑不透明白色枯草桿菌較大圓形扁平不整齊粗糙不透明灰白色菌落的描述：大小、形狀、突起、邊緣、表面、透明度、粘度葡萄球菌光滑型菌落（S）枯草桿菌粗糙型菌落（R）細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象葡萄球菌：混濁生長為兼性厭氧菌，細(xì)菌向四周均勻擴(kuò)散，出現(xiàn)肉眼可見均勻的混濁生長。枯草桿菌：菌膜為專性需氧菌，多生長在液體的表面而形成菌膜。鏈球菌：沉淀鏈球菌在生長過程中結(jié)成鏈狀而增加了細(xì)菌本身的重力，由于重力的作用下 沉而形成沉淀。 細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象:可觀察細(xì)菌的動力葡萄球菌：沿穿刺線生長（穿刺線清晰）；動力陰性、無鞭毛，培養(yǎng)基清亮枯草桿菌：沿穿刺線擴(kuò)散生長（穿刺線模糊）；動力陽

3、性、有鞭毛，培養(yǎng)基混濁 細(xì)菌代謝產(chǎn)物的檢查：鑒別細(xì)菌菌名匍萄糖發(fā)酵乳糖發(fā)酵靛基質(zhì)試驗(yàn)硫化氫試驗(yàn)大腸桿菌+ O+ O+-傷寒桿菌+-+附：各種生化試驗(yàn)原理單糖發(fā)酵試驗(yàn)：細(xì)菌分解發(fā)酵單糖，可產(chǎn)生酸或氣；酸使培養(yǎng)基中的酸性復(fù)紅變成紅色，為陽性。靛基質(zhì)試驗(yàn)：有些細(xì)菌含有色氨酸酶，能分解蛋白腺水中的色氨酸，生成無 色的靛基質(zhì)（又稱吲哚），與滴加的靛基質(zhì)試劑（對二甲基氨基苯甲醛）生成玫 瑰紅化合物，為靛基質(zhì)試驗(yàn)陽性。3 . H2S試驗(yàn)：有些細(xì)菌能分解培養(yǎng)基中含硫氨基酸生成H2S，遇到培養(yǎng)基中的亞鐵離子，可生成黑色的沉淀，為H2S試驗(yàn)陽性。記錄細(xì)菌的生長、生化反應(yīng)結(jié)果；并說明生化反應(yīng)的原理。五、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備葡萄糖發(fā)酵管：接種大腸桿菌12支；接種傷寒桿菌12支乳糖發(fā)酵管：接種大腸桿菌12支；接種傷寒桿菌12支硫化氫：陽性12支，陰性12支靛基質(zhì)試劑：2瓶/教室六、實(shí)驗(yàn)總結(jié)：糖發(fā)酵管應(yīng)做陰性對照管；靛基質(zhì)實(shí)驗(yàn)可在肉膏