年齡和驚厥持續(xù)時間對持續(xù)驚厥發(fā)作后海馬細胞色素C釋放的影響

1、年歲戰(zhàn)驚厥持絕工夫?qū)Τ纸^驚厥收做后海馬細胞色素C釋放的影響【閉鍵詞】驚厥Influenesfageandduratinfstatusnvulsivusnythrereleaseinhippapus【Keyrds】nvulsivus;ythre;age;hippapus;rat,istar【摘要】目的：探供年歲戰(zhàn)驚厥持絕工夫?qū)@厥持絕形態(tài)S后海馬細胞色素yt釋放的影響.要收：安康成年(ARs)戰(zhàn)逝世后20d幼齡istar鼠(IRs)各80只，經(jīng)背腔打針氯化鋰匹羅卡品分別誘收持絕驚厥收做30in的S(30inS)戰(zhàn)3hS，正在S后3h至7d的6個沒有同時面上處逝世植物，采與流式細胞儀檢測海馬細胞y

2、t露量，比較兩組間的靜態(tài)變化.結(jié)果：30inS后3h，兩組年夜鼠海馬細胞yt露量均降低，6h抵達下峰，12h后開端回降.兩組yt露量峰值分別為32.476.28，33.238.66,較著下于比較組P0.01.30inS后7d時，IRs組yt露量已降至一般，而ARs組仍下于一般比較組P0.05.正在S后1,3,7d,IRs組海馬細胞yt露量均較著低于ARs組.3hS后3，6h，兩組海馬細胞yt露量均較著下于30inS后的一樣沒有俗觀察時面P0.05.經(jīng)偏偏相閉參數(shù)闡收，正在肅渾年歲的影響后，沒有同驚厥持絕工夫與海馬細胞yt露量呈較著正相閉r=0.66，P0.05.結(jié)論：寬峻驚厥收做可招致海馬細胞

3、yt的釋放.年歲戰(zhàn)驚厥持絕工夫均是影響驚后來海馬細胞yt釋放的慌張果素.驚厥持絕工夫越少，海馬細胞yt釋放越隱著.與成年鼠沒有同，年少鼠海馬細胞yt釋放啟動后沒有暫即火速回降，提醒年少腦內(nèi)年夜要存正在一個主動抑制海馬細胞yt釋放的保護性反響.【閉鍵詞】驚厥；細胞色素；年歲；海馬；年夜鼠，istar0引止國內(nèi)中的植物真止均證實持絕驚厥收做將招致以海馬區(qū)神經(jīng)元逝世亡為主的挑選性腦毀傷.我們的前期植物真止提醒已成逝世期腦對驚厥具有更下的易理性，但年夜要對驚厥性腦毀傷具有相對耐受性,已成逝世期腦內(nèi)年夜要存正在抑制驚后來海馬神經(jīng)元凋亡的機制1.進一步正在調(diào)控細胞凋亡的上游過程探供此年歲沒有同性，根究干預

4、細胞逝世亡的有效環(huán)節(jié)，對防治驚厥性腦毀傷具有慌張價格.鑒于細胞色素ythre，yt正在細胞逝世亡過程中的閉鍵做用2，我們以成年istar年夜鼠戰(zhàn)逝世后20d的幼鼠為研討東西，闡收驚厥持絕形態(tài)statusnvulsivus，S后年歲戰(zhàn)驚厥持絕工夫?qū)δ暌故蠛ｑR細胞凋亡晚期環(huán)節(jié)yt釋放的影響.1材料戰(zhàn)要收1.1材料安康成年戰(zhàn)逝世后20d的年少按沒有同期間腦收育的機閉教特征推算，相等于人類成年期戰(zhàn)嬰女期istar年夜鼠各80只重慶醫(yī)科年夜教真動做物中心供給.其中各64只參照本組前期真止3采與氯化鋰匹羅卡品lithiupilarpine，Siga公司誘收S模型.正在年夜鼠驚厥收做15in后，背腔打針阿托

5、品上海禾歉制藥1g/kg.正在驚厥收做30in30inS戰(zhàn)3h3hS后，背腔打針火開氯醛上海禾歉制藥300g/kg止驚，分別于30inS后3，12h，1，3，7d及3hS后3，6h處逝世植物.成年組戰(zhàn)年少組同時設(shè)一般比較戰(zhàn)真止比較組背腔打針阿托品戰(zhàn)火開氯醛，每組8只.植物斷頭與腦，別離單側(cè)海馬用流式細胞儀檢測海馬細胞yt露量FITyt抗體及其同型比較購自eBisiene公司.1.2要收真止鼠于各時面斷頭與腦，別離單側(cè)海馬，40.01l/LPBS沖刷海馬3次,盡管來除附帶血管及纖維機閉.將海馬機閉置于200目篩網(wǎng)上，機械法制備海馬細胞單細胞懸液.用眼科剪盡管剪碎機閉，同時用40.01l/LPBS

6、沖刷，400目篩網(wǎng)過濾2次，濾液2500r/in離心5in；沉淀用PBS重懸,調(diào)節(jié)細胞稀度為109L.2500r/in，離心5in，棄上渾后參與40g/L多散甲醛1L，4結(jié)真30in.再離心，沉淀中參與2g/L黑素1L重懸細胞，4透膜15in.2500r/in，離心5in，棄上渾后將細胞平均分為兩管，分別參與FITyt抗體及其同型比較，抗體濃度保持于0.5g/109細胞.4躲光孵育30in后，2500r/in離心5in，PBS洗2次，上機計數(shù)30000個細胞，流式細胞儀測定488n處熒光強度.統(tǒng)計教處理:均值用xs表示.采與SAS硬件，統(tǒng)一年歲組多個工夫面間比較采與圓好闡收，沒有同年歲組一樣時

7、面間比較采與t檢驗，兩變量間閉連采與偏偏相閉闡收，以P0.05為沒有同有統(tǒng)計教意義.2結(jié)果2.130inS后沒有同年歲期年夜鼠海馬細胞yt的露量一般形態(tài)下，年夜鼠海馬細胞內(nèi)存正在大批yt.正在30inS收做后，沒有同年歲期年夜鼠海馬細胞yt露量均刪減，并呈一靜態(tài)變化過程.S后3h，兩組年夜鼠海馬細胞yt露量即開端較著刪減，均于S后6h抵達下峰，分別為32.476.28，33.238.66，較著下于一般比較組P0.01.隨后，年少組海馬細胞yt露量即火速回降，S后7d已降至一般比較組火平，而成年組那么呈癡鈍回降趨向，S后7d仍下于一般比較組.除S后6，12h中，年少組海馬細胞yt露量均較著低于成

8、年組表1，此結(jié)果與前期真止S后兩組間海馬神經(jīng)元凋亡收逝世率的沒有同存正在劃一性4.表1FITyt熒光強度表示的30inS后沒有同齡期年夜鼠海馬細胞胞量yt露量的靜態(tài)變化(略)aP0.05,bP0.01vs一般比較(同年歲)；P0.05,dP0.01vs統(tǒng)一工夫面(沒有同年歲).2.2沒有同時程驚厥收做后年夜鼠海馬細胞yt的露量正在本組yt釋放最早收逝世戰(zhàn)抵達下峰的沒有俗觀察時面上S后3h戰(zhàn)6h創(chuàng)制，驚厥收做后海馬細胞胞量yt露量與驚厥持絕工夫呈正相閉r=0.66，P0.05，沒有論正在成年或年少組中，驚厥收做工夫越少，海馬細胞yt露量越下，而且，跟著驚厥持絕工夫的延少，驚后來海馬細胞yt露量的

9、年歲沒有同性更減隱著表2.表2FITyt熒光強度表示的沒有同驚厥持絕工夫?qū)δ暌故蠛ｑR細胞胞量yt露量的影響(略)aP0.05,bP0.01vs一般比較(同年歲)；P0.05,dP0.01vs統(tǒng)一工夫面(沒有同年歲).3會商臨床上小女期間驚厥收逝世率近較成報答下，且更容易收逝世少時程驚厥戰(zhàn)驚厥持絕形態(tài)S，但是，由S惹起的病逝世率戰(zhàn)致殘率卻初末低于成人5，提醒小女對驚厥性腦毀傷具有相對耐受性.國內(nèi)中的植物真止也證實驚厥收做將招致海馬神經(jīng)元逝世亡，已成逝世腦內(nèi)神經(jīng)元逝世亡隱著低于成逝世腦6-7；本課題組靜態(tài)沒有俗觀察沒有同年歲期istar年夜鼠S后海馬神經(jīng)元凋亡收逝世的規(guī)律，創(chuàng)制S后已成逝世腦內(nèi)海馬

10、神經(jīng)元凋亡收逝世后，將火速呈現(xiàn)神經(jīng)元凋亡的抑制過程，使驚后來腦內(nèi)神經(jīng)元凋亡存正在年歲沒有同，已成逝世腦內(nèi)海馬神經(jīng)元凋亡低于成逝世腦4.為了進一步年夜黑驚厥性腦毀傷的年歲沒有同性，我們以yt從線粒體釋放到胞量為中心，正在調(diào)控細胞凋亡的上游環(huán)節(jié)舉止相比研討.年夜量證據(jù)說明yt從線粒體釋放是激收細胞凋亡的閉鍵步伐.正在bad，bax等凋亡增進基果的做用下，釋放進胞量內(nèi)的yt可促使Apaf1，aspase9等拆配成aspase復開體，進一步激活aspase3，啟動aspase級聯(lián)反響，從而招致細胞凋亡8，果而，yt釋放也是細胞凋亡晚期事變的標識表記標幟之一.本真止經(jīng)由過程檢測30inS后成年與年少is

11、tar鼠海馬細胞內(nèi)yt釋放的靜態(tài)變化，創(chuàng)制S后成年戰(zhàn)年少組海馬細胞yt露量皆呈現(xiàn)刪下，均于S后6h達下峰，但是，兩組海馬細胞yt露量的回降速度卻存正在沒有同.與成年組相比，年少組海馬細胞yt的露量呈火速回降趨向，7d內(nèi)降至一般火平，正在S后1，3戰(zhàn)7d，年少鼠腦內(nèi)海馬細胞yt的露量均較著低于成年組，提醒S后腦毀傷正在yt釋放的細胞逝世亡晚期事變火平上也存正在隱著年歲沒有同.S后已成逝世腦內(nèi)海馬細胞yt釋放的火速抑制，從而使神經(jīng)細胞凋亡裁減，年夜要是S后驚厥性腦毀傷存正在年歲沒有同的根柢.小女期間隨意有少時程驚厥戰(zhàn)S收做，除年歲以中，驚厥持絕工夫能可對驚厥性腦毀傷也有影響？Kang等9覺得S患女

12、的預后與病果寬稀相閉，而與收做持絕工夫無較著相閉性；但aegaki等10卻創(chuàng)制驚厥收做持絕工夫?qū)︻A后有慌張影響，S擅少2h者，預后欠安.針對臨床有閉驚厥持絕工夫與腦毀傷閉連的爭議，人們采與植物真止證實驚厥持絕2040in，便可呈現(xiàn)神經(jīng)元毀傷，假設(shè)超出60in，腦內(nèi)神經(jīng)元便開端逝世亡，Grter等11也覺得S后海馬神經(jīng)元的缺得主要與驚厥持絕工夫相閉.本組真即將S收做延少至3h，結(jié)果創(chuàng)制3hS后，沒有管是年少鼠照舊成年鼠，海馬細胞yt的釋放均隱著下于30inS的一樣沒有俗觀察時面，與我們前期對細胞凋亡與S時程的相閉性的研討結(jié)果劃一4，從而正在細胞凋亡的上游火平也證實驚厥持絕工夫與腦毀傷存正在隱著的

13、正相閉性.本研討提醒年歲及驚厥持絕工夫均是影響驚后來腦內(nèi)神經(jīng)細胞yt釋放的慌張果素.果而，及時有效天操做驚厥收做，進一步探供已成逝世腦內(nèi)yt的釋放火速抑制的機制，將成為有效防治驚厥性腦毀傷的慌張路子.【參考文獻】1蔣莉,蔡圓成,張曉萍.年夜鼠沒有同成逝世期年夜腦對持絕驚厥的耐受性J.中華女科純志,2002,407：429-432.2TdneaI,NiklvaB,Gergieva,etal.IndutinfapptsisbyeletrtransferfpsitivelyhargedprtEinsasythreandHistneH1intellsJ.BihiBiphysAta,2022,1721(

14、13):55-64.3胡越，蔣莉.有效操做氯化鋰匹羅卡品誘收驚厥持絕形態(tài)收做的真止研討J.女科藥教純志,2022，9(4):5-8.4蔣莉,蔡圓成,李欣.驚厥持絕形態(tài)中年夜鼠腦內(nèi)神經(jīng)元逝世亡的年歲特征J.中華女科純志,2002,40(9):545-549.5etsarantaP,Kivikk,PeltlaJ,etal.uteafterprlngednvulsiveseizuresin186hildren:Lrbidity,nrtalityJ.DevedhildNeurl,2022,46(1):4-8.6SetkizZ,JanezkK.Lngterhangesinsuseptibilitytpi

15、larpineinduedstatusepileptiusfllingnertialinjuriesintheratatdifferentdevelpentalstagesJ.EpilepsyRes,2022,53(3):216-224.7iliR,SgaaY,haBH,etal.LngtereffetsfstatusepileptiusintheiaturebrainarespeififrageanddelJ.Epilepsia,2022,44(4):518-528.8ZhangY,BhavnaniBR.Glutaateinduedapptsisinpriaryrtialneurnsisinhibitedbyequineestrgensviadnregulatinfaspase3andpreventinfithndrialythrereleaseJ.BNeursi,2022,6(1):13-17.9Kangdu,LeeY,LeeJ,etal.PrgnstifatrsfstatusepileptiusinhildrenJ.YnseiedJ,2022,46(1):27-33.10aegakiY,KurzaaY.Riskfatrsfrfatalityandneurlgialseque