醫(yī)學(xué)微生物學(xué)：第16章 螺旋體

1、第十六章 螺旋體 螺旋體（spirochete)：是一種細(xì)長、柔軟、螺旋狀、運(yùn)動活潑的原核細(xì)胞型微生物。生物學(xué)上的地位介于細(xì)菌與原蟲之間。分類學(xué)上劃歸廣義的細(xì)菌學(xué)范疇。第一節(jié) 分類與命名 致病性螺旋體主要有下述3個屬： 1鉤端螺旋體屬（leptospira） 2疏螺旋體屬（Borrelia） 3密螺旋體屬（Treponema）螺旋體科螺旋體目伯氏疏螺旋體 回歸熱疏螺旋體杜通氏疏螺旋體赫姆斯疏螺旋體奮深疏螺旋體鉤端螺旋體科密螺旋體屬疏螺旋體屬蒼白密螺旋體 品他密螺旋體鉤端螺旋體屬問號狀鉤端螺旋體螺旋體目的類別疏螺旋體密螺旋體鉤端螺旋體Cell wallCytoplasmic menbraneEn

2、doflagellaOuter envelope第二節(jié) 鉤端螺旋體屬問號狀鉤端螺旋體 一、臨床意義問好狀鉤端螺旋體是鉤端螺旋體病的病原體。 1. 致病物質(zhì)內(nèi)毒素樣物質(zhì)（ELS）/脂多糖樣物質(zhì)（LLS)溶血素細(xì)胞毒性因子（GTF）致細(xì)胞病變作用( CPE)物質(zhì) 傳染源與儲存宿主2.所致疾病 鉤端螺旋體病 傳播途徑：主要是接觸疫水傳播 易感人群：人及動物 臨床表現(xiàn)鉤端螺旋體病-一種人畜共患傳染病 傳染源傳播途徑鼠、犬和豬經(jīng)粘膜或破損皮膚進(jìn)入;經(jīng)胎盤垂直傳播臨床表現(xiàn)進(jìn)入損傷全身毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞 及肝、腎、肺心及中樞神經(jīng)重者可引起肝、腎等器官損害，出現(xiàn)黃疸、肺出血、休克、DIC甚至死亡。 先形成鉤體血

3、癥疾病特點(diǎn)起病急、高熱、乏力、全身酸痛、眼結(jié)膜充血、腓腸肌壓痛、表淺淋巴結(jié)腫大螺旋細(xì)密、規(guī)則，一端或兩端呈鉤狀；有兩根周漿鞭毛，運(yùn)動活潑；G-，但不易著色，F(xiàn)ontana鍍銀染色成棕褐色。二、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）基本特性問號狀鉤端螺旋體鍍銀染色法1000 暗視野顯微鏡1500 抗原構(gòu)造 根據(jù)屬特異性抗原、群特異性抗原、型特異性抗原分類 營養(yǎng)要求高，需氧或微需氧，常用Korthof培養(yǎng) 基，生長緩慢；最適溫度2830。 在水及土壤中可存活數(shù)天至數(shù)月；對青霉素敏感 基因組：賴型鉤體基因組全長為4.69mb，包含 4.33mb的大染色體和359kb的小染色體，G+C平 均為36mol （二）檢驗(yàn)程序

4、1. 標(biāo)本采集 10天內(nèi)取血液；1周后取尿液。 2. 標(biāo)本直接檢查 直接鏡檢：暗視野觀察；Fontana鍍銀染色： 棕褐色 核酸檢測：特異DNA探針法、PCR 4. 抗體檢測 （1）顯微鏡凝集試驗(yàn) 3. 分離培養(yǎng)分離與鑒定 血液尿液培養(yǎng) 接種于Korthof培養(yǎng)基中，培養(yǎng)后 作暗視野檢查。鉤端螺旋體凝集試驗(yàn)（暗視野） 陰性對照 陽性反應(yīng)（+ + ） 5.動物試驗(yàn)（2）間接凝集試驗(yàn)：效價1：8可判為陽性，雙份 血清標(biāo)本效價呈4倍以上增長則更有診斷價值。 （3）TR/Patoc特異性屬抗原玻片凝集試驗(yàn) （4）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) 適用于有雜菌污染的標(biāo)本。常用幼齡豚鼠或金地鼠。 lyme病

5、 回歸熱螺旋體第三節(jié) 疏螺旋體 此屬螺旋體螺旋少而稀疏，且排列不規(guī)則。在自然界有宿主與媒介。疏螺旋體伯氏螺旋體流行性回歸熱 地方性回歸熱（一）臨床意義1. 致病物質(zhì) 粘附素，外膜蛋白OspA，LPS2. 自然儲存宿主 嚙齒動物、鹿 3. 傳播媒介 硬蜱4. Lyme病臨床表現(xiàn) 一、伯氏螺旋體Hard tick 所致疾?。郝菪w蜱叮咬3-30天慢性移動性紅斑2-3周紅斑皮損自行消退早期：乏力、頭痛發(fā)熱、肌痛未治療者80%可發(fā)展為晚期 晚期：慢性關(guān)節(jié)炎、慢性神經(jīng)系統(tǒng)及皮膚異常免疫性：體液免疫為主。游走性紅斑慢性游走性紅斑（ECM）長1137m，兩端稍尖；周漿鞭毛有2100根以上， 與運(yùn)動有關(guān)； 伯

6、氏疏螺旋體（電鏡2 000） Giemsa染色為淡紫色，鍍銀染色為棕褐色；營養(yǎng)要求高，微需氧，5 % 10% CO2促進(jìn)生長，常用BSK培養(yǎng)基，生長緩慢；萊姆病的病原體：伯氏、伽氏、埃氏。 1. 基本特性（二）微生物學(xué)檢查2. 檢驗(yàn)程序（3）抗體檢測：免疫熒光法及ELISA法檢測患者 體內(nèi)的抗體。（1）標(biāo)本中病原體數(shù)量少，早期和晚期均難分離 出螺旋體。故一般不做直接鏡檢和分離培養(yǎng)（2）分子生物學(xué)技術(shù)二、回歸熱疏螺旋體回歸熱(relapsing fever)系多種回歸熱螺旋體所引起的一種急性傳染病。其臨床特點(diǎn)是陣發(fā)性高熱伴全身疼痛，肝、脾大，嚴(yán)重者可出現(xiàn)黃疸與出血現(xiàn)象。發(fā)熱期與間歇期交替出現(xiàn)，寒

7、熱往來回歸，故稱回歸熱。依傳播媒介的不同本病分為兩大類，即虱傳回歸熱(流行性回歸熱)及蜱傳回歸熱(地方性回歸熱)。 傳播途徑：體虱病原體：回歸熱疏螺旋體，我國多見 臨床癥狀：高熱反復(fù)發(fā)作39次。流行性回歸熱(虱傳回歸熱)地方性回歸熱（蜱傳回歸熱） 病原體：杜通疏螺旋體等15種 傳播途徑：軟蜱 儲存宿主：嚙齒動物 臨床癥狀：與虱傳型相似1.體內(nèi)正常菌群，寄生在口腔、齒齦及咽部2.協(xié)同引起奮森咽峽炎、牙齦炎、潰瘍性口 腔炎、口頰壞疽3.對青霉素、四環(huán)素等敏感三、奮森螺旋體第四節(jié) 密螺旋體屬分為致病與非致病兩大類。蒼白螺旋體：蒼白亞種 梅毒 性病 地方亞種 地方性梅毒 極細(xì)亞種 雅司病 非性病品他螺

8、旋體： 品他病 (一) 臨床意義 1. 致病物質(zhì) 外膜蛋白：黏附作用 表面粘多糖和唾液酸：形成莢膜樣物質(zhì)。 透明質(zhì)酸酶 免疫逃逸 過敏反應(yīng)一、梅毒螺旋體獲得性梅毒臨床分期：分為三期（1）期（初期）梅毒：感染后3周左右局部出現(xiàn)無痛性硬下疳。感染性極強(qiáng) 先天性：母體通過胎盤傳給胎兒 獲得性：性傳播2. 所致疾病 梅毒(1) 巨大下疳(一期梅毒） 全身皮膚、黏膜常有梅毒疹，全身淋巴結(jié)腫大。 （2）期梅毒 發(fā)生于硬下疳出現(xiàn)后28周。梅毒疹（3）期（晚期）梅毒 發(fā)生感染2年后，病變可波及全身組織和器官 基本損害為慢性肉芽腫 病損內(nèi)螺旋體少但破壞性大晚期梅毒的潰瘍、壞死 先天性梅毒（胎傳梅毒） 系母體蒼白

9、亞種 螺旋體通過胎盤進(jìn)入 胎兒所致，多發(fā)于妊 娠4個月之后。 早期先天梅毒梅毒螺旋體（1）直徑 0.100.15m，有814個致密而規(guī)則的小螺 旋，兩端尖直。（2）原生質(zhì)圓柱體上緊繞 著34根周漿鞭毛，故 運(yùn)動活躍，運(yùn)動方式 多樣。（二）微生物學(xué)檢驗(yàn) 1. 基本特性（3）G-，但不易著色。Fontana鍍銀染色呈棕褐色。（4）基因組 環(huán)狀DNA，約為1 138 006bp，G+C 平均為52.8mol。 （5）在無活細(xì)胞的人工培養(yǎng)基中難培養(yǎng)，生長慢。（6）抵抗力：極弱，對溫度和干燥特別敏感；對 青霉素、四環(huán)素、紅霉素等抗菌藥物敏感。菌體柔軟，用于運(yùn)動的類似鞭毛的軸絲位于細(xì)胞外鞘內(nèi)梅毒密螺旋體 Histology: Treponema pallidum- testis infected rabbit T. pallidum in a dark-field microscopyT. pallidum in the direct fluorescent antibody testSilver stain2. 檢驗(yàn)程序（1）標(biāo)本：、期梅毒取下疳滲出液、梅毒疹滲 出液或淋巴結(jié)穿刺液 先天性梅毒：臍血1）非密螺旋體抗原試驗(yàn)MHA-TP試驗(yàn)TPPA試驗(yàn)等2）密螺旋體抗原試驗(yàn)VDRL試驗(yàn)RPR試