板藍根中靛玉紅的含量測定及其影響因素分析

1、板藍根中靛玉紅的含量測定及其影響因素分析【摘要】目的研究影響板藍根中靛玉紅含量的因素。方法考察不同來源以及不同性狀板藍根中靛玉紅含量的差異，同時對靛玉紅提取工藝、靛玉紅的穩(wěn)定性作進一步的研究。結(jié)果來源不同、性狀不同、提取工藝不同的板藍根中靛玉紅含量不同。結(jié)論通過對板藍根中靛玉紅含量考察，對指導用藥有重要作用?！娟P鍵詞】板藍根；靛玉紅Abstrat:bjetiveTstudythefatrshihaffettheassfindirubininindigadrt.ethdsResearhedthedifferenefthententfIndirubinbeausefdifferentplaesan

2、ddifferentharateristis.Andatthesaetiestudiedthedifferentextratingrkanshipsandthestabilityfindirubininhlrfr.ResultsThententfIndirubininindgadrtfdifferentplaes,differentharateristisanddifferentextratingrkanshipsasdifferent.nlusinIthasiprtantsignifianetusetheherbthrughthententresearhfIndirubininindigad

3、rt.Keyrds:IndigadRt;Indirubin板藍根,別名靛青根、藍靛根、靛根，為十字花科菘藍屬植物菘藍IsatisindigtiaFrt.的枯燥根，具有清熱、解毒、涼血、利咽之成效，用于治療瘟毒發(fā)斑、高熱頭痛、大頭瘟疫、爛喉丹痧、肝炎、流行性感冒等。板藍根內(nèi)含靛玉紅、吲哚苷、多種氨基酸、-谷甾醇、植物性蛋白、糖類等成分1。本研究目的在于利用分光光度法測定不同板藍根中靛玉紅的含量，分析不同來源、不同產(chǎn)地板藍根中靛玉紅含量的差異，同時利用不同的實驗方法，考察影響板藍根中靛玉紅含量的主要因素，這其中包括對靛玉紅穩(wěn)定性的考察以及板藍根顏色、性狀、提取工藝等對靛玉紅含量的影響。1器材與方法

4、1.1器材板藍根購自于遼寧剩靛玉紅(中國藥品生物制品檢定所)；T22型光柵分光光度計山東高密彩虹分析儀器；枯燥箱南京實驗儀器廠，熊貓DG30/HA型電熱枯燥箱；電子天平上海民橋精細科學儀器，JA2103型電子天平；恒溫水浴鍋HH6，國華電器。所用試劑均為國產(chǎn)分析純。1.2方法1.2.1板藍根氯仿抽提液的制備將板藍根置烤箱6570恒溫8h后粉碎，精細稱量板藍根，氯仿熱回流提取2h，過濾，重復提取2次，合并氯仿液，回收氯仿至氯仿液僅余5l備用。1.2.2標準曲線的繪制向圓底燒瓶中參加19.8g靛玉紅標準品于250l容量瓶中，用氯仿稀釋至刻度，反復搖勻后得標準靛玉紅氯仿溶液。用移液管精細汲取各0.2

5、5，0.5，0.75，1.00，1.25，1.50，1.75，2.00，2.25，2.50l置10l容量瓶中，加氯仿稀釋至刻度，以氯仿為空白，在530n處測定其吸收值繪制曲線并計算得回歸方程2。1.2.3板藍根藥材中靛玉紅含量的測定準確稱取10g樣品板藍根，以氯仿抽提2h，過濾回收濾液，重復1次抽提，合并濾液。將濾液移入100l容量瓶中，定容后測其在531n處的吸光度值。根據(jù)標準曲線計算樣品板藍根的靛玉紅含量。1.2.4影響板藍根中靛玉紅含量的因素不同來源的板藍根藥材中靛玉紅含量的測定與比擬：取不同單位提供的板藍根藥材樣品，研磨成粉末狀，依上法進展操作，測定其各自含量。同一產(chǎn)地，不同直徑的板藍

6、根中靛玉紅含量的測定與比擬：取同一板藍根藥材樣品板藍根系購于沈陽成方圓大藥房，按飲片直徑分成大、中、小3檔，分別依上法進展測定其靛玉紅含量。外皮顏色差異較大的板藍根藥材中靛玉紅含量的測定與比擬：總的來說，板藍根藥材顏色差異并不明顯，以褐色為主，但有個別來源的板藍根藥材顏色較淺，但仍呈褐色，而有的板藍根藥材顏色那么明顯較其它藥材深，呈深褐色。取外皮顏色相差較大的板藍根藥材3份，依上法對其靛玉紅含量進展測定。板藍根藥材中靛玉紅提取工藝與靛玉紅提取效果關系的分析：氯仿提取工藝樣品溶液的制備方法：同“1.2.3項。乙醇提取工藝樣品溶液的制備以95%乙醇提取靛玉紅為例：取10g購于沈陽成大方圓藥房的板藍

7、根，粉碎，置于圓底燒瓶中，參加30l95%乙醇抽提2h，過濾后再抽提2h，過濾，合并2次濾液，回收乙醇，氯仿濾液定容至100l，得樣品溶液備用。其它以50%乙醇、75%乙醇提取的靛玉紅溶液的制備類似此法。水提取工藝樣品溶液的制備：10g購于沈陽成方圓大藥房的板藍根枯燥根，粉碎，參加30l水煮沸提取2h，過濾后再煮沸提取2h，過濾，合并兩次濾液，蒸干，參加氯仿將其定容至100l，得樣品溶液備用。1.2.5穩(wěn)定性實驗取靛玉紅氯仿溶液1l置于10l的刻度試管中，分別于3，6，12，24，36h測定其氯仿溶液濃度隨時間變化情況。2結(jié)果2.1薄層層析法對靛玉紅的別離檢測在用薄層層析法檢測靛玉紅時，以9：

8、1比例的氯仿與丙酮作展開劑，別離效果十清楚顯，靛玉紅粉紅色和靛藍藍色所成譜帶明晰分布于薄層板上。圖略。2.2標準曲線的繪制根據(jù)靛玉紅溶液濃度和其在531n處的吸光度可繪制靛玉紅標準曲線，其回歸方程為Y=0.524X+0.0158，r=0.9943。2.3影響板藍根中靛玉紅含量的因素2.3.1不同來源的板藍根藥材中靛玉紅含量的測定結(jié)果見表1。表1不同來源的板藍根藥材中靛玉紅含量的測定結(jié)果比擬略2.3.2板藍根直徑對靛玉紅含量影響的考察同一產(chǎn)地、不同直徑的板藍根中靛玉紅的含量亦有差異。測定結(jié)果見表2。表2板藍根直徑對靛玉紅含量的影響略2.3.3外皮顏色差異較大的板藍根藥材中靛玉紅含量的測定與比擬選

9、擇顏色差異較大的3份板藍根藥材，經(jīng)含量測定結(jié)果見表3。表3板藍根外皮顏色差異對靛玉紅含量的影響略上述實驗結(jié)果說明，來源不同的板藍根藥材中靛玉紅含量差異顯著。從板藍根直徑對靛玉紅含量影響來看，靛玉紅含量隨板藍根直徑的增大而升高，但不成正比升高，直徑為0.75的板藍根中靛玉紅含量明顯高于直徑為0.25和0.5的板藍根中靛玉紅含量。而從顏色對靛玉紅含量的影響來看，不同產(chǎn)地、不同批號的板藍根在顏色差異上不具有可比性。而對于產(chǎn)地一樣，板藍根產(chǎn)品，顏色較深的板藍根的靛玉紅含量稍高于其它板藍根，中等顏色的與淺色板藍根的靛玉紅含量那么沒有發(fā)現(xiàn)明顯差異。2.4板藍根藥材中靛玉紅提取工藝與靛玉紅提取效果關系的分析

10、通過實驗得知，靛玉紅提取工藝不同對其提取率的影響較大，氯仿、95%乙醇、75%乙醇、50%乙醇及水對靛玉紅的提取效果比照結(jié)果見表4。表4提取工藝對靛玉紅含量影響略從表4中可知，對靛玉紅的提取率最高的是75%的乙醇，是幾種提取工藝中提取效果最好的。水對靛玉紅的提出率最低。因此可知板藍根中靛玉紅不適宜用水作溶劑提齲2.5氯仿溶液中靛玉紅的穩(wěn)定性考察靛玉紅在氯仿溶液中并不穩(wěn)定存在，其氯仿溶液濃度隨時間變化情況如圖1。3討論在靛玉紅的吸收光譜中，存在292n和531n兩處吸收峰值，但292n處靛藍對靛玉紅的干擾較大3，故采用531n作為靛玉紅最大吸收波長。傳統(tǒng)上以苯:氯仿:丙酮541的比例進展展開效果較好4，但本實驗通過比擬說明，以氯仿丙酮91展開效果較好，故只采用氯仿丙酮作為展