北五味子多糖的提取和含量測定

1、北五味子多糖的提取和含量測定【摘要】目的建立提取和測定北五味子中多糖含量的方法。方法采用比色法測定北五味子中多糖含量。結(jié)果測得北五味子中多糖含量為6.57%，平均回收率為99.78%，RSD=1.54%。結(jié)論該方法簡便、精細度及重現(xiàn)性均較好，結(jié)果令人滿意?！娟P(guān)鍵詞】北五味子多糖提取含量測定ExtratinandDeterinatinfPlysaharidefrShisandrahinensis(Turz)BaillFruitAbstrat：bjetiveTestablishaethdfrtheextratinanddeteinatinfplysaharidefrShisandrahinensi

2、s(Turz)BaillFruit.ethdsPlysaharideinShisandrahinensis(Turz)BaillFruitasdeterinedbytheethdfSpetrphtetry.ResultsTheplysaharidesinShisandrahinenisis(Turz)BaillFruitas6.57%,theaveragereveryas99.78%,RSDas1.54%.nlusinThisethdissiple，theresultisstable，reprduible,andsatisfatry.Keyrds：Shisandrahinensis(Turz)

3、Baill；Plysaharide;Extratin;Deterinatin北五味子Shisandrahinensis(TurzBaillFruit是木蘭科植物五味子的枯燥成熟果實，是著名的滋補性中藥，因其果實甘、酸、辛、苦、咸五味俱全，故名五味子，具有斂肺、滋腎、生津、收汗、澀精之成效?，F(xiàn)代藥理研究證實五味子對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)均有興奮作用，亦能促進肝糖原異生，加快肝糖原分解，在治療神經(jīng)衰弱、肝炎等的藥物中應(yīng)用非常廣泛。五味子有南北之分，據(jù)?本草綱目?記載“五味子南產(chǎn)者紅，北產(chǎn)者黑，入滋補藥，必用北者為良，北五味子的化學成分主要為五味子木脂素、揮發(fā)油、五味子醇、多糖等1。近年來對多糖提取

4、工藝的研究方法很多，如熱水浸提法、稀堿液浸提法、稀酸液浸提法。但多糖是由單糖基通過糖苷鍵連接而成的化合物，在稀酸、稀堿條件下，易使多糖發(fā)生糖苷鍵的斷裂，部分多糖發(fā)生水解而使多糖的提取率減少，因此本文采用熱水浸提法，用苯酚-硫酸法測定北五味子多糖的含量，得到滿意的結(jié)果。1儀器與藥品2方法與結(jié)果2.1葡萄糖儲藏液的配制精細稱取105枯燥至恒重的葡萄糖100g，用蒸餾水溶解并定容到100l。2.3測定條件選擇2.6多糖的提取流程北五味子粉碎后，稱取500g，用清水洗凈，加水4500l，微沸煎煮1h。過濾，濾渣加水2000l，煎煮1h，過濾，合并提取液，加熱濃縮至300l。參加乙醇使乙醇含量為80%放

5、置12h，抽濾，沉淀依次用無水乙醇、丙酮反復(fù)洗滌，得到棕色粗多糖。將粗多糖溶于水，用seveg法除去蛋白，參加1%活性碳脫色，抽濾，濾液參加乙醇，使溶液含醇達80%，靜置過夜，抽濾，殘渣用無水乙醇、丙酮反復(fù)洗滌，真空枯燥，即得精制北五味子多糖。2.7換算因子測定準確稱取60枯燥恒重的五味子多糖20g，加水溶解后定容到100l容量瓶中，搖勻，作為多糖儲藏液準確量取多糖儲藏液0.2l，加水至1.0l按測量標準曲線同樣的方法測其吸光度值，根據(jù)標準曲線計算濃度。按下式計算換算因子：f=/D式中：為多糖重量g，為測試液中據(jù)標準曲線方程計算得到的單糖濃度gl-1D為多糖的稀釋因子，測得f=1.748，n=

6、6。2.8樣品含量的測定準確稱取枯燥五味子粉末100g，3份，分別置于索氏提取器中，用80%乙醇回流提取1h，改用水微沸煎煮，3份分別煎煮1，2，3次，各定容至100l，為樣品液。分別精細汲取上述樣品液10l，分別定容至100l，各取1.0l，按2.4項下操作，平行做6次，并按下式計算多糖含量以粗多糖計。結(jié)果見表1。說明提取兩次即可。多糖含量%=Df/100。式中：為樣品溶液的葡萄糖的濃度gl-1，D為樣品溶液的稀釋因子，f為換算因子，為樣品的重量g。表1樣品中多糖的含量略3討論硫酸比色法是測定多糖含量較經(jīng)典有效的方法之一，但各自的報道中，對反響溫度的控制、試劑中苯酚及硫酸用量不盡一樣。常見的

7、反響溫度有煮沸、40恒溫和室溫3種，鑒于冬天和夏天室溫相差較大，本實驗僅比擬于前兩種條件，證實本法以40恒溫30in較好。參加苯酚量0.6l以上時，反響能完成。對于硫酸的用量，經(jīng)實驗比照認為硫酸占總體積62.5%以上時，在重現(xiàn)性、穩(wěn)定性及回收率方面都有明顯的優(yōu)越性，并且與文獻報道一致2。3.2實驗結(jié)果說明，北五味子多糖提取兩次即可，平均含量為6.57%，比文獻報道的稍低3，這可能與北五味子的產(chǎn)地、采收季節(jié)等因素有關(guān)。3.3五味子粗多糖的初步藥理研究說明4，五味子粗多糖能明顯進步小鼠的耐缺氧才能，具有抗疲勞作用，亦能使正常小鼠胸腺和脾臟的重量的增加。說明五味子粗多糖可以進步機體對環(huán)境的適應(yīng)才能和防御才能。而北五味子多糖含量較高，這可能是北方五味子藥效較優(yōu)的原因之一，但是北五味