微生物基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)(霍文瑩)課件

1、 霍文瑩 2015年12月微生物基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)目的無(wú)菌定義微生物污染的相關(guān)知識(shí)醫(yī)療器械生產(chǎn)過(guò)程中微生物污染的來(lái)源和預(yù)防藥典對(duì)無(wú)菌保證的定量標(biāo)準(zhǔn)理想狀態(tài)：沒(méi)有任何活的微生物。藥典定義（無(wú)菌保證值）：經(jīng)滅菌后，產(chǎn)品中污染菌存活的概率不大于百萬(wàn)分之一（10-6）。什么是微生物？ 它們是非常小的單細(xì)胞或多細(xì)胞生物，肉眼無(wú)法看到。它們對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求非常低。它們是一類繁殖非?？斓纳?。它們非常容易發(fā)生變異。它們無(wú)處不在。大多數(shù)微生物對(duì)人類有益。有些微生物對(duì)人類有害。 微生物的分類：一、微生物按結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生活習(xí)性分類：原核類:僅有原始核質(zhì)，無(wú)核仁或核膜，細(xì)胞器很不完善。如細(xì)菌、放線菌、支原體、立克次氏體、

2、衣原體、螺旋體。 真核類:細(xì)胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體，細(xì)胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌）、 原生動(dòng)物、藻類。非細(xì)胞類:體積微小，能通過(guò)除菌過(guò)濾器。如病毒和朊病毒等。二、按其致病性可分為:病原性微生物非病原性微生物微生物的特點(diǎn)：個(gè)體小,面積大：小于0.1mm。肉眼不可見。分布廣,種類多（10萬(wàn)多種） ：自然界中到處都有，如水、空氣、土壤等, 土壤中的數(shù)量最多。代謝強(qiáng)，轉(zhuǎn)化快：發(fā)酵乳糖的細(xì)菌在1小時(shí)內(nèi)可分解其自重100010000倍的乳糖。生長(zhǎng)旺，繁殖快：微生物有驚人的繁殖速度，大多數(shù)微生物幾十分鐘內(nèi)就可以繁殖一代。適應(yīng)性強(qiáng)，易變異（耐藥性產(chǎn)生的原因）。葡萄球菌 酵母菌（芽痕）棒狀

3、桿菌大腸桿菌弧狀菌鏈球菌正常人體微生物的分布微生物的類群和形態(tài)結(jié)構(gòu)一、細(xì)菌 細(xì)菌是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌，以二分裂方式無(wú)性繁殖的原核微生物，分布廣泛。細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu) （1） 球菌 多數(shù)球菌直徑在1微米左右，外觀呈球形或近似球形。由于繁殖時(shí)分裂平面不同可形成不同的排列方式，分為雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等。 （2） 桿菌 形態(tài)多數(shù)呈直桿狀，也有的菌體稍彎，多數(shù)呈分散存在，也有的呈鏈狀排列，分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等。 （3） 螺形菌 菌體彎曲，呈弧形或螺旋形。如幽門螺桿菌。 細(xì)菌雖小，仍具有一定的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)等各種細(xì)菌都有，是細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)。球

4、菌(coccus)雙球菌(diplococcus)鏈球菌(streptococcus)螺形菌(spiral bacterium)弧菌螺菌螺桿菌細(xì)菌的繁殖 細(xì)菌生長(zhǎng)速度很快，一般約20min分裂一次。若按此速度計(jì)算，細(xì)菌群體將龐大到難以想象的程度。但事實(shí)上由于細(xì)菌繁殖中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的逐漸消耗，有害代謝產(chǎn)物的逐漸積累，細(xì)菌不可能始終保持高速度的無(wú)限繁殖。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后，細(xì)菌繁殖速度逐漸減慢，死亡菌數(shù)增多，活菌增長(zhǎng)率隨之下降并趨于停滯。微生物的類群和形態(tài)結(jié)構(gòu)二、真菌真菌是一類有細(xì)胞壁，無(wú)葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數(shù)為單細(xì)胞，多數(shù)為多細(xì)胞，能進(jìn)行無(wú)性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。真菌包括單細(xì)胞與

5、多細(xì)胞兩類。單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細(xì)胞真菌由菌絲和孢子組成，并交織成團(tuán)，稱絲狀菌或霉菌。真菌生長(zhǎng)的最適的溫度為2228，最適的pH值為46。其繁殖能力強(qiáng)，但生長(zhǎng)速度比細(xì)菌慢，常需1-4周才形成菌落。真菌對(duì)熱的抵抗力不強(qiáng)，一般加熱6070 1小時(shí)即被殺死，但對(duì)干燥、日光、紫外線和一些化學(xué)消毒劑有抵抗力，但對(duì)2.5碘酒、10甲醛則較敏感。微生物的類群和形態(tài)結(jié)構(gòu)三、病毒病毒屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的微生物，它僅有一種核酸（DNA或RNA）作其遺傳物質(zhì)。病毒必須在宿主活細(xì)胞內(nèi)寄生，依靠細(xì)胞提供的

6、能量、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生物大分子合成機(jī)制，完成病毒的復(fù)制過(guò)程。病毒與人類的關(guān)系極為密切，人類的傳染病約75是由病毒引起的。有些病毒傳染性強(qiáng)，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。感冒血常規(guī)常識(shí)（看三項(xiàng)）：白細(xì)胞增高：炎癥中性粒細(xì)胞增高：細(xì)菌性感冒淋巴細(xì)胞增加：病毒性感冒微生物的主要類群：桿菌(大腸桿菌) 微生物的主要類群：桿菌(碳疽) 沙門氏菌 微生物的主要類群：葡萄球菌 微生物的主要類群：鏈球菌微生物的主要類群：弧狀菌 微生物的主要類群：四疊球菌 細(xì)菌的繁殖：二分裂繁殖 真菌的繁殖：分生孢子 醫(yī)療器械生產(chǎn)中微生物控制 為什么要對(duì)醫(yī)療器械生產(chǎn)進(jìn)行微生物控制？ 微生物可以致病。特別是對(duì)無(wú)菌、植入性醫(yī)療

7、器械產(chǎn)品的危害。如果細(xì)菌得到了必要的養(yǎng)料、一定量的水份和合適的溫度，它們就能迅速繁殖，它們繁殖的速度快得驚人。通常一個(gè)細(xì)菌在僅僅24小時(shí)后可產(chǎn)生出281兆(百萬(wàn))個(gè)的細(xì)菌。 生產(chǎn)過(guò)程中的主要的微生物污染源 空氣 水 設(shè)備 原輔料 人員微生物的污染途徑自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生物而污染。接觸污染：由于和非無(wú)菌的用具、器械或人的接觸而污染?？諝馕廴荆河捎诳諝庵兴⑸锏某两?、附著或被吸入而污染。其他污染：由于其他因素（如昆蟲）而污染?？刂莆⑸锏奈廴就緩?有效地阻止室外的污染侵入室內(nèi)。 迅速有效地排除室內(nèi)已發(fā)生的污染。 控制污染源，減少污染發(fā)生量?？刂莆⑸镂廴就緩剑ㄈ恕C(jī)、料、法、環(huán)

8、）污染途徑及解決措施人、機(jī)、料、法、環(huán)控制微生物污染途徑一、人在潔凈室中人體是主要菌源之一，不僅皮膚帶有細(xì)菌(其中約l為病原性的)，人通過(guò)呼吸、講話、操作、走動(dòng)也會(huì)散布細(xì)菌?？刂莆⑸镂廴就緩礁鶕?jù)國(guó)外實(shí)驗(yàn)資料，人員的發(fā)菌量有以下數(shù)據(jù)可供參考：潔凈室內(nèi)當(dāng)工作人員穿無(wú)菌服時(shí)： 靜止時(shí)的發(fā)菌量一般為10300 個(gè)(min人)； 軀體一般活動(dòng)時(shí)的發(fā)菌量為1501000 個(gè)(min人)； 快步行走時(shí)的發(fā)菌量為9002500 個(gè)(min人)?？人砸淮蔚陌l(fā)菌量一般為70700 個(gè)(min人)，噴嚏一次的發(fā)菌量一般為400060000 個(gè)(min人)。穿平常衣服時(shí)發(fā)菌量為330062000 個(gè)(min人)。無(wú)

9、口罩發(fā)菌量：有口罩發(fā)菌量比率為： (1：7)(1：14)。人員不良行為所產(chǎn)生的污染當(dāng)有如下行為時(shí)將相應(yīng)增加微粒的產(chǎn)生量:吸煙者的呼吸 500%噴嚏 2000%搓手 200%行走 200%跺腳 5000%更衣著衣部位 測(cè)定日期 細(xì)菌數(shù)/100mm2上衣內(nèi)側(cè) 使用五日后 300 外側(cè) 使用五日后 200褲子內(nèi)側(cè) 使用五日后 450 外側(cè) 使用五日后 70帽子內(nèi)側(cè) 使用五日后 100 外側(cè) 使用五日后 150口罩內(nèi)側(cè) 使用一日后 22000 外側(cè) 使用一日后 100更衣的目的-阻菌想混進(jìn)去，沒(méi)門！操作幅度1.潔凈區(qū)行為要控制，要緩慢移動(dòng)，保持好的身體姿勢(shì)，輕聲談話，減少交談?lì)l率等。2.人的行為是維持

10、潔凈區(qū)平衡不可或缺的。手的衛(wèi)生每只手可攜帶40萬(wàn)個(gè)細(xì)菌；剛洗過(guò)的手，每平方厘米也可檢驗(yàn)出3200個(gè)細(xì)菌 。洗手的重要性:用流水（如自來(lái)水）洗手，能使手上的致病微生物減少80%；用皂液充分洗手，再用自來(lái)水沖洗能使致病微生物減少95%。洗手后正確使用消毒劑能使致病微生物減少99%。 手的細(xì)菌對(duì)照實(shí)驗(yàn) 未洗的手 漂洗的手(只用清水) 洗凈的手(用皂液) 洗凈的手(用消毒劑)洗手七步法：控制微生物污染途徑二、環(huán)潔凈度測(cè)定包括： 懸浮粒子 微生物 - 浮游菌 - 沉降菌 潔凈區(qū)空氣潔凈度等級(jí):歐盟 GMP 2002 微粒指標(biāo)A級(jí)風(fēng)速為：0.36-0.54m/s（指導(dǎo)值）級(jí)別分動(dòng)態(tài)及靜態(tài)；5m ：1 應(yīng)視

11、作不檢出；2005年9月21日修改，考慮光散射及電子噪聲等可能誤報(bào)，標(biāo)準(zhǔn)為20個(gè)/ m3 應(yīng)對(duì)A級(jí)區(qū)的空氣粒子進(jìn)行連續(xù)測(cè)定，并建議對(duì)B級(jí)區(qū)也連續(xù)測(cè)定控制微生物污染途徑三、料A、原輔料；B、內(nèi)包材；C、與醫(yī)療器械接觸的其它部分（氣體、溶劑） 控制微生物污染途徑四、機(jī)設(shè)備和器具與醫(yī)療器械的直接接觸。特別是設(shè)備或設(shè)施的衛(wèi)生死角?？刂莆⑸镂廴就緩皆O(shè)備和器具的清洗清潔程序必須經(jīng)過(guò)驗(yàn)證嚴(yán)格按清洗周期清洗清洗和存放設(shè)備、器具處應(yīng)與生產(chǎn)區(qū)域潔凈等級(jí)相同注重與物料接觸設(shè)施及部件處理控制微生物污染途徑五、法上述各種控制方法應(yīng)該以相關(guān)SOP形式存在。SOP的概念SOP是Standard Operation Procedure三個(gè)單詞中首字母的大寫 ，即標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序，就是將某一事件的標(biāo)準(zhǔn)操作步驟和要求以統(tǒng)一的格式描述出來(lái)，用來(lái)指導(dǎo)和規(guī)范日常的工作。SOP是一種標(biāo)準(zhǔn)的作業(yè)程序。所謂標(biāo)準(zhǔn)，在這里有最優(yōu)化的概念，即不是隨