高效液相色譜法測(cè)定大花紅景天中沒(méi)食子酸、紅景天苷及兒茶素的含

1、高效液相色譜法測(cè)定大花紅景天中沒(méi)食子酸、紅景天苷及兒茶素的含【摘要】目的建立大花紅景天中沒(méi)食子酸、紅景天苷及兒茶素的含量測(cè)定方法。方法采用反相高效液相色譜法，色譜柱為18柱，流動(dòng)相為甲醇-水(含0.1%磷酸)，梯度洗脫，流速為1lin-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為280n，柱溫為室溫，按外標(biāo)法定量。結(jié)果沒(méi)食子酸的加樣回收率平均為98.4%，RSD=2.78%;紅景天苷的加樣回收率平均為99.2%，RSD=2.35%;兒茶素的加樣回收率平均為98.7%，RSD=2.43%。結(jié)論所建立方法簡(jiǎn)便快速，結(jié)果準(zhǔn)確，穩(wěn)定，可以作為紅景天藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法。【關(guān)鍵詞】大花紅景天;沒(méi)食子酸;紅景天苷;兒茶素Abstrat：

2、bjetiveTestablishaethdfrdeterinatinfgalliaid,salidrsideandatehininRhdilarenulate.ethdsThesapleasanalyzednKrasil18lunundergradientelutin.Thebilephaseasethanl-0.1%phsphriaidandtheflrateas1.0l/in.TheavelengthfUVdetetras280n,thelunteperatureasrteperature,andthequantifiatinasperfredithexternalstandardeth

3、d.ResultsFrgalliaid,theaveragereveryas98.4%,andtheRSDas2.78%.Frsalidrside,theaveragereveryas99.2%,andtheRSDas2.35%.Fratehin,theaveragereveryas98.7%,andtheRSDas2.43%.nlusinTheethdisquik,sipleandaurate,anditanbeusedfrqualityntrlfRhdilarenulate.Keyrds：Rhdilarenulate;Galliaid;Salidrside;atehin大花紅景天Rhdil

4、arenulata(Hk.f.etThs)H.hba為景天科紅景天屬植物，為?中國(guó)藥典?所收錄的品種，具有抗衰老、抗疲勞、抗腫瘤等作用，其主要的化學(xué)成分有紅景天苷、兒茶素、沒(méi)食子酸、沒(méi)食子酸乙酯等1?？紤]到中藥材有效成分的協(xié)同作用，本文擬建立一種同時(shí)測(cè)定紅景天中的代表性成分紅景天苷、兒茶素和沒(méi)食子酸的方法，用于較全面的評(píng)價(jià)紅景天藥材的質(zhì)量。目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)紅景天中紅景天苷的含量測(cè)定報(bào)道較多24，但是還未見(jiàn)同時(shí)測(cè)定紅景天中沒(méi)食子酸、紅景天苷和兒茶素的文獻(xiàn)報(bào)道，我們采用高效液相色譜(HPL)法測(cè)定了大花紅景天中沒(méi)食子酸、紅景天苷和兒茶素的含量，以期為紅景天藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供實(shí)驗(yàn)根據(jù)。1儀器與試藥2

5、方法與結(jié)果2.1色譜條件色譜柱為Phenenexkrasi18柱(5，250460);流動(dòng)相A為甲醇，流動(dòng)相B為體積分?jǐn)?shù)為0.1%的磷酸水溶液，梯度洗脫程序：0in(5%A),10in(5%A),60in(100%A);檢測(cè)波長(zhǎng)：280n;流速：1.0lin-1;柱溫為室溫;在此條件下各組分得到良好別離。液相色譜圖見(jiàn)圖1。A對(duì)照品色譜圖B紅景天樣品色譜圖a-沒(méi)食子酸b-紅景天苷-兒茶素圖1樣品高效液相色譜圖2.2對(duì)照品溶液的制備分別精細(xì)稱取枯燥至恒重的沒(méi)食子酸對(duì)照品11.26g，紅景天苷對(duì)照品6.15g，兒茶素對(duì)照品7.08g，分別置50l容量瓶中，加甲醇溶解并定容，搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)藏溶液，

6、用時(shí)各精細(xì)量取1l混合即得對(duì)照品溶液。2.3供試品溶液的制備取大花紅景天樣品，粉碎過(guò)40目篩，60枯燥至恒重，精細(xì)稱取此粉末1g，置100l具塞三角瓶中，參加100l50%甲醇水溶液，超聲處理60in，放冷，濾過(guò)，取續(xù)濾液10l置50l容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，過(guò)微孔濾膜(0.45)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。2.4線性關(guān)系的考察精細(xì)量取沒(méi)食子酸、紅景天苷、兒茶素對(duì)照品溶液適量混合，加甲醇制成標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)樣測(cè)定。以色譜峰面積A對(duì)進(jìn)樣量(g)進(jìn)展線性回歸，結(jié)果說(shuō)明各組分在各自進(jìn)樣量范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，線性范圍、回歸方程、回歸系數(shù)見(jiàn)表1。表1標(biāo)準(zhǔn)曲線2.5精細(xì)度實(shí)驗(yàn)在上述色譜條件下，分別精細(xì)汲取對(duì)

7、照品溶液各10l，重復(fù)進(jìn)樣5次，結(jié)果測(cè)得峰面積的RSD分別為沒(méi)食子酸1.46%，紅景天苷1.91%，兒茶素1.87%(n=5)。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.6重復(fù)性實(shí)驗(yàn)在上述色譜條件下，取同一樣品按樣品溶液的制備方法平行制備5份，分別進(jìn)樣10l，同時(shí)取混合對(duì)照品溶液進(jìn)樣10l，按外標(biāo)法測(cè)定其含量并計(jì)算RSD，沒(méi)食子酸2.55%，紅景天苷1.87%，兒茶素2.38%。2.7穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一供試品溶液，按上述色譜條件測(cè)定，每2h測(cè)定1次，每次進(jìn)樣10l，共6次，測(cè)得峰面積的RSD分別為沒(méi)食子酸2.12%，紅景天苷1.48%，兒茶素1.96%(n=5)。2.8加樣回收率實(shí)驗(yàn)取含量的大花紅景天藥材細(xì)粉6

8、份，精細(xì)稱定，分別精細(xì)參加對(duì)照品溶液，按照樣品溶液制備方法制備并測(cè)定，計(jì)算平均回收率。結(jié)果沒(méi)食子酸的平均回收率為98.4%，RSD=2.78%;紅景天苷的平均回收率為99.2%，RSD=2.35%;兒茶素的平均回收率為98.7%，RSD=2.43%。2.9樣品含量測(cè)定分別精細(xì)汲取對(duì)照品混合溶液和供試品溶液各10l，按上述色譜條件進(jìn)展測(cè)定，以外標(biāo)法計(jì)算樣品中沒(méi)食子酸，紅景天苷和兒茶素的含量。結(jié)果見(jiàn)表2。表2樣品測(cè)定結(jié)果3討論采用HPL法測(cè)定大花紅景天中有效成分的含量，方法簡(jiǎn)便快速，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，可作為大花紅景天藥材質(zhì)量控制的根據(jù)。3.1流動(dòng)相的選擇由于沒(méi)食子酸、紅景天苷、兒茶素的極性都比擬大，

9、必須使用極性大的流動(dòng)相才能使其較好的別離。本實(shí)驗(yàn)中，曾試驗(yàn)了流動(dòng)相甲醇-水(1090)，乙腈-水(1090)，乙腈-0.1%磷酸溶液(1090)，甲醇-0.1%磷酸溶液系列，通過(guò)考察發(fā)現(xiàn)采用甲醇-0.1%磷酸溶液梯度洗脫，可以實(shí)現(xiàn)被測(cè)成分與其他物質(zhì)的良好別離，且重現(xiàn)性較好。3.2樣品制備方法的選擇采用甲醇、50%甲醇、水3種溶劑，超聲提取和加熱回流提取兩種方法，結(jié)果50%甲醇超聲提取60in和加熱回流提取60in的提取率最高，而超聲提取簡(jiǎn)單易于操作，因此選定50%甲醇超聲提取60in為樣品制備方法。【參考文獻(xiàn)】1國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典，部S.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2022：106.2李維衛(wèi),胡鳳祖，陳世龍,等.青藏高原紅景天藥材的HPL指紋圖譜J.西北植物學(xué)報(bào),