高效液相色譜法測(cè)定感冒清熱顆粒中50甲基維斯阿米醇苷的含量

1、高效液相色譜法測(cè)定傷風(fēng)清熱顆粒中5-0-甲基維斯阿米醇苷的含量【摘要】目的測(cè)定傷風(fēng)清熱顆粒中5-0-甲基維斯阿米醇苷的含量。要領(lǐng)接納高效液相色譜法,hypersil18色譜柱(4.6250,5)；甲醇-水(4456)為活動(dòng)相；流速1.0l/in；檢測(cè)波長：292n。效果5-0-甲基維斯阿米醇苷在0.09220.922g范疇呈精良的線性干系(r0.9999),均勻接納率為97.9%,rsd0.71%(n6)。結(jié)論本測(cè)定要領(lǐng)輕便、正確、重復(fù)性好,可用于傷風(fēng)清熱顆粒質(zhì)量操縱?！娟P(guān)鍵詞】傷風(fēng)清熱顆粒；5-0-甲基維斯阿米醇苷；高效液相色譜法；含量測(cè)定keyrds：ganaqingregranule；4

2、-d-glusyl-5-ethylvisainl；hpl；ntentdeterinatin傷風(fēng)清熱顆粒收載于2022年版?中華人民共和國藥典?(一部),由荊芥穗、防風(fēng)、柴胡、葛根等11味藥材構(gòu)成,具有疏風(fēng)散寒、解表清熱成果,臨床用于風(fēng)寒傷風(fēng)所見的頭痛發(fā)熱、惡寒身痛、鼻流清涕、咳嗽咽干等癥。原尺度有測(cè)定葛根中葛根素含量的要領(lǐng)1。為提拔傷風(fēng)清熱顆粒的質(zhì)量操縱尺度,包管臨床療效的不變,本試驗(yàn)創(chuàng)立以高效液相色譜法測(cè)定此中主藥防風(fēng)的有用身分5-0-甲基維斯阿米醇苷含量的要領(lǐng)。1儀器與試藥日本島津l-10atvp高效液相色譜儀,spd-10at型紫外檢測(cè)器,lass-vpv5.02色譜事情站,qx25-0

3、6超聲洗濯儀。傷風(fēng)清熱顆粒(批號(hào)20220602、20220606、20220617、20220622、20220809、20220813)及陰性樣品,由廣西某藥業(yè)提供；5-甲基維斯阿米醇苷比較品由中國藥品生物成品檢定所提供(批號(hào)1523-200203)。甲醇為色譜純,水為超純水,其他試劑均為闡發(fā)純。2要領(lǐng)與效果2.1測(cè)定波長的選擇5-甲基維斯阿米醇苷比較品溶液經(jīng)紫外分光光度計(jì)掃描,在291.8n處有最大汲取峰,應(yīng)選擇292n為測(cè)定波長。2.2色譜條件色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱(hypersil18,4.6250,5)；活動(dòng)相：甲醇-水(4456)；檢測(cè)波長為292n；流速：1.0l/in

4、；柱溫：室溫。2.3體系實(shí)用性試驗(yàn)別離汲取5-甲基維斯阿米醇苷比較品溶液、陰性樣品溶液和供試品溶液各20l,注入液相色譜儀,得色譜圖(見圖1)。試驗(yàn)效果表白,供試品和比較品溶液有一保存時(shí)間雷同的色譜峰,而且陰性樣品在5-甲基維斯阿米醇苷峰四周無滋擾,5-甲基維斯阿米醇苷與別的組分到達(dá)基線分散。闡發(fā)時(shí)間相宜,理論板數(shù)定為不低于5000。2.4比較品溶液的制備細(xì)密稱取5-甲基維斯阿米醇苷比較品適量,置棕色容量瓶中,加50%甲醇制成每1l含20g的溶液,即得。2.5供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物,研細(xì),取約4g,細(xì)密稱定,加甲醇50l,超聲處置懲罰(功率250,頻率33khz)1h,放冷

5、。稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量。細(xì)密汲取25l續(xù)濾液,蒸干,殘?jiān)铀?0l分次充實(shí)溶解,轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,用水飽和的正丁醇提取3次,每次20l。歸并正丁醇液,用正丁醇飽和的氨試液洗滌3次,每次10l。分取正丁醇液,置水浴上蒸干,殘?jiān)?0%甲醇分次溶解,轉(zhuǎn)移到10l量瓶中,加50%甲醇至刻度,搖勻,濾過,即得。2.6陰性樣品溶液的制備取陰性樣品,照“2.5項(xiàng)下要領(lǐng)制備,即得。2.7線性干系觀察細(xì)密稱取5-甲基維斯阿米醇苷11.52g,置50l容量瓶中,加甲醇至刻度(0.2304g/l),搖勻,作為比較品儲(chǔ)藏液。細(xì)密汲取比較品儲(chǔ)藏液1.00、3.00、5.00、7.00、10.00l于50l容

6、量瓶中,以50%甲醇稀釋至刻度,搖勻過濾,別離細(xì)密汲取20l,注入液相色譜儀,測(cè)定。以峰面積對(duì)濃度(g/l)舉行線性回歸闡發(fā),得回歸方程：a4.48781044.5665103,r0.9999,表白5-甲基維斯阿米醇苷在0.09220.922g范疇內(nèi)線性干系精良。2.8細(xì)密度試驗(yàn)細(xì)密吸勸2.7項(xiàng)下比較品溶液20l,一連進(jìn)樣6次,測(cè)定,rsd0.15%(n6),表白細(xì)密度較好。2.9不變性試驗(yàn)取同一供試品溶液(批號(hào)20220617),別離在安排0、2、4、6、8、12h后,依法測(cè)定1次,效果表現(xiàn),12h內(nèi)供試品溶液中5-甲基維斯阿米醇苷峰面積不變,rsd0.17%,表白不變性較好。2.10重復(fù)性

7、試驗(yàn)取同一批樣品(批號(hào)20220617)6袋,研細(xì),細(xì)密稱定6份,按供試品溶液制備要領(lǐng)制備6份供試品溶液,依法測(cè)定,5-甲基維斯阿米醇苷均勻含量為1.025g/袋,rsd0.42%(n6),表白重復(fù)性較好。2.11加樣接納率試驗(yàn)細(xì)密稱取含量的樣品(批號(hào)20220617,含量為1.025g/袋,0.084g/g)6份,別離細(xì)密參加必然量的5-甲基維斯阿米醇苷比較品,依法測(cè)定,盤算接納率,效果見表1。表1加樣接納率試驗(yàn)效果(略)2.12樣品測(cè)定取差異批次的樣品,根據(jù)供試品溶液制備項(xiàng)下要領(lǐng)操縱,得供試品溶液,按上述色譜條件闡發(fā)測(cè)定,效果見表2。表25-0-甲基維斯阿米醇苷含量測(cè)定效果略根據(jù)6批測(cè)定效果,我們將含量限度確定為本品每袋含防風(fēng)以5-甲基維斯阿米醇苷(22h2810)盤算不得少于0.60g。3討論由于本品是含糖型顆粒,應(yīng)在樣品溶液的處置懲罰歷程中思量去糖。筆者曾試驗(yàn)在樣品超聲提取后,細(xì)密汲取25l提取液,濃縮至5l加至d101型大孔吸附樹脂柱上舉行去糖處置懲罰。效果表現(xiàn),對(duì)樣品去糖與不去糖處置懲罰,兩者色譜圖無顯著差異,且不去糖樣品5-0-甲基維斯阿米醇苷無喪失,5-0-甲基維斯阿米醇苷的含量較高。我們觀察了甲醇-水、乙腈-磷酸水、乙腈-水體系,效果以甲醇-水(4456)為活動(dòng)相時(shí),5-0-甲基維斯阿米醇苷的分散度和峰形