項目名稱蛋白質糖基化修飾在胚胎著床及生殖醫(yī)學疾病中的

1、項目名稱: 蛋白質糖基化修飾在胚胎著床及生殖醫(yī)學疾病中的作用與應用一、提名意見提名意見：聚焦我國生殖健康領域，開展以揭示影響人類生殖、生命早期發(fā)育、妊娠結局主要因素為目的的研究，建立有效 生殖健康疾病早期篩查、診治的防治平臺。 糖基化是蛋白質翻譯后重要的修飾過程，賦予蛋白質介導細胞識別、黏附功能。細胞表面70%蛋白被糖基化修飾 ，細胞表面受體均為糖蛋白。 孔英教授團隊，20年來圍繞糖基化修飾蛋白表達、調控及在“侵入能力胚胎形成、容受性子宮內膜建立、滋養(yǎng)層 細胞分化、胎盤血管生成及相關疾?。ㄗ影B前期、流產）中作用，形成“糖生殖生物學”研究特色。 研究揭示：胚胎及子宮內膜表面糖基化修飾蛋白（LeY

2、 glycan、OPN）特異表達；糖基化修飾受糖基轉移酶調控 ；糖蛋白表達變化影響胚胎發(fā)育速度、質量，作為信息分子調控“母、胎”識別、黏附；建立單胚胎培養(yǎng)液糖蛋 白分泌量檢測方法，檢測胚胎不同 LeY 糖分泌水平作為功能性指標應用于臨床 IVF移植前胚胎除形態(tài)學之外評價 指標，在國家生殖醫(yī)學中心應用。糖蛋白與滋養(yǎng)層細胞分化異常疾病相關。 “糖生殖生物學”連續(xù)獲批10項國自然基金資助（主持人5項），課題組培養(yǎng)博士、碩士研究生60余人，通訊作者 發(fā)表相關 SCI 論文50余篇，參加學術交流10 次，成果納入國自然成果專著糖鏈與生殖。2017 年項目獲大連市 科技進步一等獎提名該項目為遼寧省科學技術

3、進步獎 二 等獎。二、主要知識產權證明目錄（不超過10件）序號合作方式合作者合作時間合作成果證明材料備注1科技獎勵孔英、隋琳琳、燕秋、樊建慧、徐躍飛、董明、謝云鵬、嚴濱2004-20172017大連市科技進步一等獎“蛋白質糖基化修飾在胚胎發(fā)育及著床調控中的作用與應用”見其他附件252論文合著孔英、謝云鵬、隋琳琳2011-2015Osteopontin Promotes Invasion, Migration and Epithelial-Mesenchymal Transition of Human Endometrial Carcinoma Cell HEC-1A Through AKT a

4、nd ERK1/2 Signaling, CELLULAR PHYSIOLOGY AND BIOCHEMISTRY. 37(4): 1503-1512，2015見其他附件173共同知識產權孔英 燕秋2007糖鏈與生殖科學出版社出版，國家自然科學基金成果專著見核心附件-2專著4論文合著孔英、謝云鵬、隋琳琳、徐躍飛、嚴濱（共同通訊）2008-至今Regulation and expression of FOXO1 and FOXO3 in endometrial tissue during the menstrual cycle of human and mouse.International J

5、ournal of Clinical and Experimental Medicine，2016.，9（2）：13221329 ; SCI見其他附件195論文合著孔英、隋琳琳、謝云鵬2008-至今Expression of AQP3 in the mice endometrium during estrous cycle and early pregnancy.International Journal of Clinical and Experimental Pathology，2016.1.1，9（8）：80378046 ; SCI見其他附件106論文合著孔英、謝云鵬、董明、徐躍飛、隋琳

6、琳2008-至今Wnt/beta-catenin Signaling Pathway Regulates beta1, 4-galactosyltransferase I Expression on the Endometrium to Affect the Embryo Implantation. Int J Clin Exp Patho.，2017. 10（2）：17561764 ; SCI見其他附件157論文合著孔英、謝云鵬、徐躍飛、隋琳琳2008-至今Induction of forkhead box M1 (FoxM1) by EGF through ERK signaling pa

7、thway promotes trophoblast cell invasion .CELL AND TISSUE RESEARCH，362(2): 421-430，2015見其他附件108論文合著孔英、樊建慧、徐躍飛、謝云鵬2006-至今.Regulatory function of beta 1,4-galactosyltransferase I expression on Lewis-Y glycan and embryo implantation. GENE.3，220-225，2015見其他附件139論文合著孔英、樊建慧、徐躍飛、謝云鵬2006-至今HCG induces 1,4-G

8、alTexpression and promotes embryo implantation. Int J Clin Exp Pathol 8 ( 5): 4673 4683，2015見其他附件1010論文合著孔英、謝云鵬2009-至今1.OPN Induces FoxM1 Expression and Localization through ERK 1/2, AKT, and p38 Signaling Pathway in HEC-1A Cells.INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES DEC 23345-23358，2014見其他附件1

9、0三、主要完成人情況表姓 名孔英排 名1行政職務副院長技術職稱教授工作單位大連醫(yī)科大學完成單位大連醫(yī)科大學、大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對本項目技術創(chuàng)造性貢獻： 從事生殖糖生物學研究20年，負責研究總體設計，基金申報、項目實施、研究生培養(yǎng)、數(shù)據(jù)分析、論文發(fā)表。制備妊娠、假孕、激素調控去卵巢動物模型，收集不同發(fā)育階段胚胎及不同狀態(tài)子宮內膜，利用糖特異單抗或凝集素，分析、確定特異糖基轉移酶表達、調控、糖蛋白合成分析，觀察蛋白質糖基化修飾對胚胎發(fā)育速度、孵化率、黏附、擴展及植入率等影響，本項目引用論文的責任作者。 以通訊作者發(fā)表SCI論文20篇，主持本項目2017年獲大連市科技進

10、步獎一等1.首次明確“侵入能力胚泡”及“接受狀態(tài)子宮內膜”表面特異巖藻寡糖蛋白(LeY)持續(xù)高表達，調控胚胎著床：LeY 在小鼠胚胎16細胞出現(xiàn)，著床期持續(xù)高表達，提示參與胚胎著床；利用體內外著床模型（早孕模型、假孕模型），封閉胚胎表面LeY聚糖可阻斷母、胎間識別、降低著床率；封閉LeY影響胚胎及子宮內膜MMPs、EGF、LIF等著床因子表達，提示LeY作為信息分子調控胚胎著床。2.LeY 表達高低影響胚胎發(fā)育速度：糖蛋白在胚泡及子宮內膜表達呈現(xiàn)規(guī)律性變化；調控特異糖基轉移酶FUT、1、4可影響胚泡及子宮內膜糖蛋白LeY 合成；并進一步影響胚胎發(fā)育、增殖、分化及著床潛力；3.首次建立單胚胎培養(yǎng)

11、液檢測蛋白分泌量方法：胚胎體外培養(yǎng)，著床相關因子分泌，免疫化學發(fā)光印記可檢測到發(fā)育時期、狀態(tài)相同的A級單個胚胎有不同的LeY聚糖、MMPs等著床因子的分泌水平；高表達LeY 糖蛋白胚泡具有較強著床潛能；4.臨床IVF移植的胚胎LeY糖蛋白分泌水平較高：研究顯示移植前體外培養(yǎng)的不同發(fā)育階段胚胎培養(yǎng)液，同為A級胚胎具有不同LeY分泌水平；選擇移植的胚胎LeY糖蛋白分泌水平較高； 5.單胚胎培養(yǎng)液特異糖蛋白表達應用于IVF的相關臨床醫(yī)院作為輔助優(yōu)質胚胎選擇的新指標。主要完成人情況表姓 名隋琳琳排 名2行政職務 技術職稱副教授工作單位大連醫(yī)科大學完成單位大連醫(yī)科大學、大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院、大連市婦

12、女兒童醫(yī)療中心對本項目技術創(chuàng)造性貢獻： 構建糖基轉移酶基因調控質粒，利用子宮內膜癌RL952/HEC-1A 細胞模擬高/低接受態(tài)子宮內膜，以人絨毛膜癌細胞(JAR)-模擬著床前胚胎，建立著床模型，明確糖基轉移酶表達、調控與侵入性胚胎、接受性建立的相關性，檢測胚胎發(fā)育及著床，協(xié)助研究生指導，論文發(fā)表。作為主要完成人參與本項目2017年獲大連市科技進步獎一等獎主要完成人情況表姓 名謝云鵬排 名3行政職務 技術職稱副研究員工作單位大連醫(yī)科大學第二臨床學院完成單位大連醫(yī)科大學、大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對本項目技術創(chuàng)造性貢獻： 2009年進入本課題組攻讀碩士、博士學位，2015年

13、畢業(yè)。期間圍繞第一、二、五創(chuàng)新點，探討特異糖蛋白、糖 基轉移酶、轉錄后加工修飾在胚胎發(fā)育及著床調控中的作用，建立了高低接受態(tài)子宮內膜細胞RL-952及模擬胚 胎的JAR細胞的體外胚胎著床模型，拓寬了胚胎發(fā)育及著床調控機制研究的廣度與深度。攻讀學位期間發(fā)表相 關論文9篇，其中以第一作者身份發(fā)表論文4篇。（附件13、15-17、19、23）主要完成人情況表姓 名燕秋排 名4行政職務 主任技術職稱教授工作單位大連醫(yī)科大學完成單位大連醫(yī)科大學、大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對本項目技術創(chuàng)造性貢獻： 從事生殖醫(yī)學基礎研究30年，負責免疫組化檢測糖蛋白在不同發(fā)育時期胚胎的表達，分析與胚胎

14、發(fā)育速度的關系，協(xié)助研究生指導。分析蛋白質糖基化表達與生殖醫(yī)學疾病研究，以通訊作者共同發(fā)表SCI論文40篇，作為主要完成人參與本項目2017年獲大連市科技進步獎一等獎主要完成人情況表姓 名邵小光排 名5行政職務 技術職稱主任醫(yī)師工作單位大連市婦女兒童醫(yī)療中心完成單位大連醫(yī)科大學、大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對本項目技術創(chuàng)造性貢獻： 從事生殖醫(yī)學、胎兒醫(yī)學、遺傳診斷學臨床與基礎研究30年，負責研究項目實施、臨床樣品收集、免疫組化蛋白表達分析、數(shù)據(jù)分析、論文發(fā)表。觀察臨床增生期、分泌期子宮內膜蛋白質糖基化表達，將單胚胎培養(yǎng)液檢測蛋白分泌量方法應用于檢測移植前體外培養(yǎng)的不同發(fā)育階

15、段胚胎培養(yǎng)液，同為A級胚胎具有不同LeY分泌水平；選擇移植的胚胎LeY糖蛋白分泌水平較高；單胚胎培養(yǎng)液特異糖蛋白表達應用于IVF的相關臨床醫(yī)院作為輔助優(yōu)質胚胎選擇的新指標。以通訊作者共同發(fā)表SCI論文1篇（IF 5.104）作為主要完成人參與本項目2017年獲大連市科技進步獎一等獎主要完成人情況表姓 名樊建慧排 名6行政職務 技術職稱副教授工作單位大連醫(yī)科大學完成單位大連醫(yī)科大學、大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對本項目技術創(chuàng)造性貢獻： 建立聯(lián)合指導小組，協(xié)助研究生培養(yǎng)，共同文章發(fā)表，負責臨床應用與推廣，負責臨床IVF體外胚胎培養(yǎng)液的收集、糖蛋白分析、臨床樣本回顧新分析。作為主

16、要完成人參與本項目2017年獲大連市科技進步獎一等獎。主要完成人情況表姓 名徐躍飛排 名7行政職務 主任技術職稱教授工作單位大連醫(yī)科大學完成單位大連醫(yī)科大學、大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對本項目技術創(chuàng)造性貢獻： 課題組 聯(lián)合指導教師，負責技術培訓，研究生管理，負責細胞培養(yǎng)、轉染、收集、蛋白質提取、鑒定及基因表達分析，共同發(fā)表文章多篇。作為主要完成人參與本項目2017年獲大連市科技進步獎一等獎。主要完成人情況表姓 名嚴濱排 名8行政職務 主任技術職稱教授工作單位大連醫(yī)科大學完成單位大連醫(yī)科大學、大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院、大連市婦女兒童醫(yī)療中心對本項目技術創(chuàng)造性貢獻： 課題組聯(lián)

17、合指導教師，也是與項目負責人共同時間段就讀本實驗室的研究生，涉及實驗技術的共同探討，后協(xié) 助負責技術培訓，研究生管理，對本項目第一、第五貢獻大，負責收集臨床樣品用于蛋白質提取、鑒定及基因表達分析，共同發(fā)表文章、申報獎勵（見附件 19、21、25）；。四、主要完成單位情況表單位名稱大連醫(yī)科大學排 名第一完成單位對本項目科技創(chuàng)新和推廣應用情況的貢獻：糖生物學研究是大連醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院特色研究領域，遼寧省糖生物學與糖生物工程重點實驗室依托申請人所在團隊，且為遼寧省重點生物化學與分子生物學重點學科，擁有完成本課題所需的所有主要設備。本研究團隊1998年開始從事受精卵分裂、分化過程中其表面糖抗原發(fā)生階

18、段特異性的變化研究，發(fā)現(xiàn)“著床窗口期”介導細胞分裂及識別、聚集有特異表達的糖蛋白參與胚胎著床調控。以此延伸研究胚胎發(fā)育、著床過程中特異性糖蛋白變化及功能。本研究連續(xù)受到國家自然科學基金資助，取得突出成果。近十年一直與大連市生殖醫(yī)學研究機構（大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院及大連市婦女兒童中心）探討基礎研究的臨床應用，并確定糖蛋白表達差異可作為臨床試管嬰兒移植前胚胎質量除鏡下形態(tài)學判斷之外的輔助指標。研究具有潛在的臨床應用前景。 主要完成單位情況表單位名稱大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院排 名第二完成單位對本項目科技創(chuàng)新和推廣應用情況的貢獻：本研究團隊發(fā)現(xiàn)“著床窗口期”介導細胞分裂及識別、聚集有特異表達的糖蛋白參與胚胎著床調控。以此延伸研究胚胎發(fā)育、著床過程、及著床異常所引起的生殖醫(yī)學疾病中特異性糖蛋白變化及功能。作為大連市生殖醫(yī)學臨床應用中心，在課題初始階段即參與課題設計、研究方案制定、臨床樣品選擇、功能指標確定及臨床應用，并確定糖蛋白表達差異可作為臨床試管嬰兒移植前胚胎質量除鏡下形態(tài)學判斷之外的輔助指標。本項目組謝云鵬博士在本室攻讀博士學位期間，參與發(fā)表SCI論文9篇，其中作為第一作者4篇，單篇最高影響因子5.104.。嚴濱教授從事生殖醫(yī)學研究30年，2004年開始與課題組合作（共同申報課