選修一-第34講-微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用ppt

1、第34講微生物的培養(yǎng) 與應(yīng)用 最新考綱近三年考情1.微生物的分離和培養(yǎng)2.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用3.某種微生物數(shù)量的測(cè)定4.微生物在其他方面的應(yīng)用2018全國(guó)卷(37)、2018全國(guó)卷(37)、2018全國(guó)卷(37)、2017全國(guó)卷(37)、2016全國(guó)卷(39)、2016全國(guó)卷(39)1.培養(yǎng) 基(1)不雅 點(diǎn) ：人們依照微生物對(duì)_的差別 需要 ，配制出供其_的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成 ：普通都含有_跟 無機(jī)鹽。其余 ，還需要 滿意 微生物成長(zhǎng) 對(duì)_、氧氣以及_的請(qǐng)求 ?？键c(diǎn)一微生物的試驗(yàn) 室培養(yǎng) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 成長(zhǎng) 繁殖 水、碳源、氮源pH專門 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) (3)種類依照物理性質(zhì) 可分為_培養(yǎng)

2、 基、固體培養(yǎng) 基、半固體培養(yǎng) 基。依照因素 的起源 可分為天然 培養(yǎng) 基跟 _培養(yǎng) 基。依照功能 用處可分為抉擇 培養(yǎng) 基、 _培養(yǎng) 基等。2.無菌技巧 (1)含意 ：在培養(yǎng) 微生物的操縱 中，所有 避免_的辦法。液體剖析 鑒不雜菌污染(2)常用辦法化學(xué)藥劑消毒法干熱滅菌高壓蒸汽滅菌外來雜菌3.大年夜 腸桿菌的純化培養(yǎng) (1)制備牛肉膏蛋白 胨固體培養(yǎng) 基(2)純化大年夜 腸桿菌的辦法純化培養(yǎng) 道理 ：想方想法 在培養(yǎng) 基上掉 掉 落 _的肉眼可見的_，即可取得較純的菌種。純化大年夜 腸桿菌的要害 步調(diào) ：_。稱量滅菌倒平板由一個(gè)細(xì)胞繁殖 而來菌落接種常用的微生物接種辦法有兩種a.平板劃線法

3、：是經(jīng)過_在瓊脂固體培養(yǎng) 基表面_的操縱 ，將聚攏 的菌種逐漸稀釋分散 到培養(yǎng) 基的表面。如下圖：接種環(huán)延續(xù)劃線1b._法：是將菌液停頓一系列的_，而后 將_的菌液分不涂布到瓊脂固體培養(yǎng) 基的表面，停頓培養(yǎng) 。(3)菌種的保存 辦法對(duì)于 頻繁 應(yīng)用 的菌種，能夠 采用_的辦法。對(duì)于 需要 臨時(shí)保存 的菌種，能夠 采用_的辦法。稀釋涂布平板梯度稀釋差別 稀釋度暫時(shí)收藏 甘油管藏1人教版選修一P16“旁欄考慮 題拓展請(qǐng)你揣摸 以下資料或用具是否 需要 消毒或滅菌。假如需要 ，請(qǐng)抉擇 適合的辦法。培養(yǎng) 細(xì)菌用的培養(yǎng) 基與培養(yǎng) 皿玻棒、試管、燒瓶跟 吸管試驗(yàn) 操縱 者的雙手提醒 需要 滅菌；需要 消毒

4、。2人教版選修一P17“倒平板操縱 什么原因 需要 使錐形瓶的瓶口經(jīng)過分 焰？平板冷凝后，什么原因 要將平板倒置 ？提醒 經(jīng)過灼燒滅菌，避免瓶口的微生物污染培養(yǎng) 基。平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝集 水珠，凝結(jié)后的培養(yǎng) 基表面的濕度也比較高，將平板倒置 ，既能夠 使培養(yǎng) 基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又能夠 避免皿蓋上的水珠落入培養(yǎng) 基，形成污染。人教版選修一P18“旁欄微生物的接種辦法除了平板劃線法跟 稀釋涂布平板法外，還包含 歪 面接種、穿刺接種等辦法。微生物接種的核心 基本上 要避免雜菌的污染，保障 培養(yǎng) 物的純度。1.(2018世界 卷，37)生物選修1：生物技巧 實(shí)際在花費(fèi) 、生活 跟 科研實(shí)際中

5、，經(jīng)常經(jīng)過消毒跟 滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹨韵伦稍?題：(1)在試驗(yàn) 室中，玻璃跟 金屬材質(zhì)的試驗(yàn) 用具(填“能夠 或“不克不及 夠 )放入干熱滅菌箱中停頓干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫剎時(shí) 消毒法，與煮沸消毒法比擬 ，這兩種辦法的長(zhǎng)處 是_。(3)密閉空間內(nèi)的氛圍 可采用紫外線照射 消毒，其緣故是紫外線能。在照射 前，適量 噴灑，可強(qiáng)化消毒后果 。(4)水廠供給的自來水平日 是經(jīng)過(填“氯氣“乙醇或“高錳酸鉀)消毒的。(5)某同學(xué) 在應(yīng)用 高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，假設(shè) 壓力到達(dá) 設(shè)定請(qǐng)求 ，而鍋內(nèi)并不 到達(dá) 響應(yīng) 溫度，最能夠的緣故是。剖析 (1)在試驗(yàn) 室中，能耐高溫的、需要

6、 保持 枯燥 的物品，如玻璃器皿跟 金屬材質(zhì)的試驗(yàn) 用具等能夠 放入干熱滅菌箱中停頓干熱滅菌。(2)巴氏消毒法或高溫剎時(shí) 消毒法與煮沸消毒法比擬 ，其長(zhǎng)處 表示 為在到達(dá) 消毒目標(biāo) 的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 喪掉 較少。(3)紫外線照射 能消毒的緣故是其能夠 破壞微生物細(xì)胞中的DNA分子。在應(yīng)用紫外線照射 前，適量 噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可強(qiáng)化消毒后果 。(4)自來水平日 采用氯氣消毒。(5)采用高壓蒸汽滅菌時(shí)，假設(shè) 壓力到達(dá) 設(shè)定請(qǐng)求 ，而溫度未到達(dá) 響應(yīng) 請(qǐng)求 ，最能夠的緣故是不 排盡高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)的冷氛圍 。答案 (1)能夠 (2)在到達(dá) 消毒目標(biāo) 的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 喪掉 較少(3)

7、破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷氛圍 排盡2.2018河北衡水中學(xué)七調(diào)以下表格是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng) 大年夜 腸桿菌的培養(yǎng) 基配方，請(qǐng)聯(lián)合 所學(xué)常識(shí) ，回答以下相干 咨詢 題。成分含量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HPO42.0 g顯色劑（伊紅美藍(lán)）0.2 g瓊脂12.0 g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL1依照用處分別 ，該培養(yǎng) 基屬于培養(yǎng) 基，假設(shè) 要不離能剖析 尿素的細(xì)菌，需對(duì)培養(yǎng) 基做出的最要害 的調(diào)劑 是，假設(shè) 還需判定 剖析 尿素的細(xì)菌.需做出的調(diào)劑 是。2從培養(yǎng) 基的因素 上看，大年夜 腸桿菌的異化范例 為。該培養(yǎng) 基是否 用于不

8、離抉擇 出大年夜 腸桿菌？什么原因 ？_。3在試驗(yàn) 室培養(yǎng) 微生物時(shí)，取得純真 培養(yǎng) 物的要害 是，紫外線可對(duì)氛圍 停頓滅菌的緣故是_。4某同學(xué) 實(shí)驗(yàn) 純化大年夜 腸桿菌，其中 一個(gè)平板的菌落散布如上圖，推測(cè)該同學(xué) 接種時(shí)能夠的操縱 掉 誤是_。剖析 1伊紅美藍(lán)是判定 大年夜 腸桿菌的試劑，因而該培養(yǎng) 基從用處上分屬于鑒不培養(yǎng) 基；假設(shè) 要不離能剖析 尿素的細(xì)菌，那么需要 保障 培養(yǎng) 基中以尿素為唯一 氮源，馬上蛋白 胨換成尿素；判定 剖析 尿素的細(xì)菌，需要 應(yīng)用 酚紅唆使 劑。2大年夜 腸桿菌需要 從培養(yǎng) 基中取得碳源，因而其異化感化 范例 是異養(yǎng)型；因?yàn)?表格中的培養(yǎng) 基中的碳源種類非常多

9、，可供多種微生物生活 ，因而該培養(yǎng) 基不克不及 用于不離抉擇 出大年夜 腸桿菌。3微生物培養(yǎng) 時(shí)，要害 是避免外來雜菌的感染 ；氛圍 中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其緣故是紫外線能讓蛋白 質(zhì)變性，同時(shí)還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)。4由題圖可知，接種時(shí)該同學(xué) 采用的是稀釋涂布平板法，但菌落比較會(huì)合 ，不 非常好地分散 開來，能夠是涂布不平均導(dǎo)致 的。答案 1鑒不將蛋白 胨換成尿素將伊紅美藍(lán)換成酚紅唆使 劑2異養(yǎng)型不克不及 ，緣故是培養(yǎng) 基中的碳源種類非常多，可供多種微生物生活 3避免外來雜菌的感染 紫外線能使蛋白 質(zhì)變性，還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)4涂布不平均走出微生物培養(yǎng) 的5個(gè)誤區(qū)1不是所有 微生物培養(yǎng) 基中均

10、需參加 專門 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 。碳源、氮源、水分、無機(jī)鹽是微生物成長(zhǎng) 必須 的四大年夜 營(yíng)養(yǎng)因素 ，有些微生物可自行剖析 專門 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) ，而對(duì)那些剖析 才干有限或不克不及 剖析 專門 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 的微生物如乳酸菌，那么需在培養(yǎng) 基中增加 諸如維生素等物質(zhì) 。2平板劃線法純化大年夜 腸桿菌時(shí)差別 階段灼燒接種環(huán)的目標(biāo) 差別 第一次操縱 ：殺逝世 接種環(huán)上原有的微生物。每次劃線之前：殺逝世 上次 劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種開門見山 起源 于上次 劃線的最后 。劃線終了后：殺逝世 接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染情況 跟 感染 操縱 者。3倒平板的溫度普通在50 閣下 適合，溫度過 高會(huì)燙

11、手，溫度過 低培養(yǎng) 基又會(huì)凝結(jié)。平板冷卻凝結(jié)后需倒置 ，如此 既可使培養(yǎng) 基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又避免皿蓋上的水珠落入培養(yǎng) 基，形成培養(yǎng) 基污染。1.泥土 中剖析 尿素的細(xì)菌的不離與計(jì)數(shù)(1)道理 與流程考點(diǎn)二微生物的抉擇 跟 計(jì)數(shù)脲酶尿素開門見山 計(jì)數(shù)法稀釋涂布平板法系列稀釋計(jì)數(shù)(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)量 時(shí)，培養(yǎng) 基表面熟長(zhǎng)的1個(gè)菌落，起源 于樣品稀釋液中_個(gè)活菌。為了保障 結(jié)果精確，普通抉擇 菌落數(shù)在_的平板停頓計(jì)數(shù)。(3)從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)的打算 辦法是(平均菌落數(shù)C涂布的稀釋液體積V)稀釋倍數(shù)M點(diǎn)悟 應(yīng)用稀釋涂布平板法勝利 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)量 標(biāo) 要害 是恰當(dāng) 的稀釋度13

12、0300 (4)試驗(yàn) 結(jié)果剖析與評(píng)估 2.剖析 纖維素的微生物的不離(1)纖維素酶及纖維素剖析 菌抉擇 道理 、辦法復(fù)合酶C1酶、Cx酶跟 葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖白色復(fù)合物透明圈剛果紅透明圈纖維素(2)試驗(yàn) 流程纖維素抉擇 培養(yǎng) 基鑒不纖維素剖析 菌(3)不離纖維素剖析 菌所用的兩種培養(yǎng) 基比較不離纖維素剖析 菌的試驗(yàn) 中先用_培養(yǎng) 基，再用_培養(yǎng) 基。抉擇 培養(yǎng) 基為_培養(yǎng) 基，以纖維素作為碳源跟 能源 的微生物能夠 畸形 成長(zhǎng) ，而其余 絕大年夜 少數(shù)微生物不克不及 畸形 成長(zhǎng) 。鑒不培養(yǎng) 基含瓊脂，為_培養(yǎng) 基，細(xì)菌可在培養(yǎng) 基上形成 肉眼可見的菌落。剛果紅染色法應(yīng)用 于_(抉擇 、鑒

13、不)培養(yǎng) 基。抉擇 鑒不液體固體鑒不2019河南天一大年夜 聯(lián)考“互聯(lián)網(wǎng)餐飲為大年夜 眾 生活 帶來了諸多修改 ，動(dòng)入手指導(dǎo) 外賣曾經(jīng)成為普通大年夜 眾 的生活 方法 。為檢測(cè)外賣糕點(diǎn)中微生物目標(biāo)，食品 監(jiān)禁 人員 經(jīng)過無菌操縱 ，將25 g樣品以及225 mL磷酸鹽緩沖液一起 置于均質(zhì)器中以8 00010 000 r/min的速度 處理 1 min，取得平均稀釋液待用。請(qǐng)回答以下咨詢 題：1配制牛肉膏蛋白 胨培養(yǎng) 基時(shí)，在各因素 都消溶 后跟 倒平板前，要停頓的操縱 是、分裝跟 滅菌。對(duì)培養(yǎng) 基停頓滅菌的常用東西 是_。倒平板時(shí)，普通需冷卻至50 閣下 ，并在酒精燈火焰旁停頓操縱 。接種之行

14、停頓的一系列稀釋操縱 ，目標(biāo) 是在培養(yǎng) 基表面形成 ，這種接種辦法是_。2假設(shè) 培養(yǎng) 基上平均有40個(gè)菌落，那么1 g樣品中大年夜 抵 的活菌數(shù)量 是個(gè)。該結(jié)果每每 較實(shí)踐值偏小，緣故是_。有人認(rèn)為 ，此處統(tǒng)計(jì)的菌落總數(shù)實(shí)踐上僅為糕點(diǎn)樣品中總細(xì)菌數(shù)的一部分，來由 是_。答案 1調(diào)pH高壓蒸汽滅菌鍋單個(gè)菌落稀釋涂布平板法24106少數(shù)菌落能夠是由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成 的每種細(xì)菌需要 的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 跟 成長(zhǎng) 前提 差別 ，培養(yǎng) 時(shí)需滿意 其營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH、需氧性等前提 ，因而實(shí)踐只能取得糕點(diǎn)樣品細(xì)菌中的一部分答案 公道 即可廓清易錯(cuò)易混強(qiáng)化迷信思維 易錯(cuò)易混易錯(cuò)點(diǎn)1混淆 兩種“對(duì)比 組與“重復(fù)組點(diǎn)撥

15、1兩種對(duì)比 組感化 比較揣摸 培養(yǎng) 基中“是否 有雜菌污染，需將未接種的培養(yǎng) 基同時(shí)停頓培養(yǎng) 。揣摸 抉擇 培養(yǎng) 基“是否 存在 抉擇 感化 ，需設(shè)置牛肉膏蛋白 胨培養(yǎng) 基停頓接種后培養(yǎng) ，不雅 看 兩種培養(yǎng) 基上菌落數(shù)量 ，停頓對(duì)比得出論斷 。2重復(fù)組的設(shè)置及感化 為打掃 偶爾因素 對(duì)試驗(yàn) 結(jié)果的攪擾，在每一稀釋度下宜設(shè)置3個(gè)平板作重復(fù)組，抉擇 菌落數(shù)均在30300且數(shù)量 相差不大年夜 的三個(gè)平板，用“平均值代入計(jì)數(shù)公式予以打算 菌落數(shù)。易錯(cuò)點(diǎn)2不清晰 什么原因 測(cè)定活菌的數(shù)量 不克不及 用平板劃線法？點(diǎn)撥因?yàn)?在所劃的線中，普通只要最后一次劃線的最后 才會(huì)形成 只由一個(gè)細(xì)菌形成 的菌落，而

16、其余 一些菌落每每 由兩個(gè)細(xì)菌或多個(gè)細(xì)菌繁殖 而成，而在計(jì)數(shù)時(shí)一個(gè)菌落對(duì)應(yīng)著一個(gè)細(xì)菌，如此 在劃線所得的平板中，菌落數(shù)量 遠(yuǎn)低于活菌的實(shí)踐數(shù)值，因而 不克不及 用平板劃線法測(cè)定活菌數(shù)量 。易錯(cuò)點(diǎn)3易混淆 抉擇 培養(yǎng) 基與鑒不培養(yǎng) 基點(diǎn)撥1抉擇 培養(yǎng) 基贊成 特定的微生物成長(zhǎng) ，同時(shí)克制 或禁止 其余 種類微生物成長(zhǎng) 。泥土 中剖析 尿素的細(xì)菌的不離應(yīng)用的是抉擇 培養(yǎng) 基。2鑒不培養(yǎng) 基是在培養(yǎng) 基中參加 某種專門 的化學(xué)物質(zhì) ，某種微生物在培養(yǎng) 基中成長(zhǎng) 后能發(fā)生某種代謝產(chǎn)品 ，而這種代謝產(chǎn)品 能夠 與培養(yǎng) 基中的專門 化學(xué)物質(zhì) 發(fā)生 特定的化學(xué)反應(yīng) ，發(fā)生分明的特點(diǎn) 性變更 ，依照這種特點(diǎn)

17、性變更 ，可將該種微生物與其余 微生物區(qū)離開 來的培養(yǎng) 基。用于抉擇 纖維素剖析 菌的培養(yǎng) 基的確是鑒不培養(yǎng) 基。2018湖北長(zhǎng)望瀏寧四縣一模農(nóng)業(yè)花費(fèi) 上有一種廣泛 應(yīng)用 的除草劑在泥土 中不易被落解，臨時(shí)應(yīng)用 會(huì)污染泥土 。為修復(fù)被污染的泥土 ，可按圖示次序 選育出能落解該除草劑的細(xì)菌。曾經(jīng)清楚 該除草劑含氮無機(jī)物在水中消融 度低，含必定 量該除草劑的培養(yǎng) 基不透明。請(qǐng)剖析回答：深度糾錯(cuò)1微生物接種是微生物學(xué)研究 中最常用的全然 操縱 技巧 ，該技巧 的核心 是。2在選育過程 中，應(yīng)將泥土 浸出液接種于以該除草劑為唯一 的培養(yǎng) 基上。經(jīng)過比較單菌落周圍的大小 ，可抉擇 出高效的目標(biāo) 菌。試驗(yàn)

18、 結(jié)果如上圖表現(xiàn) 的AE五種菌株中，是最幻想 菌株。3設(shè)想 象對(duì)開端 抉擇 掉 掉 落 的目標(biāo) 菌停頓純化并計(jì)數(shù)，可采用的接種辦法是。將1 mL泥土 溶液分不稀釋10倍跟 100倍，每種稀釋度各在3個(gè)平板上分不接入0.1 mL稀釋液，經(jīng)過恰當(dāng) 培養(yǎng) 后，6個(gè)平板上的菌落數(shù)分不為59、57、58跟 2、7、5，空白 對(duì)比 組的平板上不 菌落，那么每升泥土 溶液中活菌數(shù)的實(shí)際值為個(gè)。實(shí)踐上每升泥土 溶液中的活菌數(shù)比經(jīng)過統(tǒng)計(jì)所得的這一數(shù)值要大年夜 ，因?yàn)?_。4科研人員 用噴射 線處理 該細(xì)菌，取得突變株A跟 B，而后 對(duì)突變株A跟 B停頓試驗(yàn) ，結(jié)果如下表所示：接種的菌種一般培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果A不生長(zhǎng)添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長(zhǎng)B不生長(zhǎng)添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長(zhǎng)AB能生長(zhǎng)不添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲、乙，能生長(zhǎng)請(qǐng)剖析突變株A跟 B混淆 在一起 接種于普通營(yíng)養(yǎng)基中能成長(zhǎng) 的最能夠緣故。_。剖析 1微生物接種技巧 的核心 是避免雜菌污染。2曾經(jīng)清楚 該除草劑為含氮無機(jī)物，在水中消融 度低，含必定 量該除草劑的培養(yǎng) 基不透明；落解該除草劑的細(xì)菌能剖析 培養(yǎng) 基中的該除草劑，使培養(yǎng) 基中出現(xiàn)透明圈。可見，在選育能落解該除草劑的細(xì)菌的過程 中，應(yīng)將泥土 浸出液接種于以