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1、輕度認(rèn)知功能障礙大鼠模型的制備及學(xué)習(xí)記憶才能的改變【摘要】目的建立輕度認(rèn)知功能障礙(I)大鼠模型,并觀察輕度認(rèn)知功能障礙大鼠學(xué)習(xí)記憶才能的變化。方法選取istar大鼠48只,將其隨機(jī)分為4組,分別為正常對(duì)照組、I模型組、針刺百會(huì)組、針刺非經(jīng)穴組,每組12只。采用周振華等研制的重度頸動(dòng)脈狹窄所致認(rèn)知功能障礙的大鼠模型并加以改良,造模后并采用電針治療,應(yīng)用rris水迷宮觀察造模前后及治療后大鼠認(rèn)知功能的變化。結(jié)果造模后與正常對(duì)照組比擬,I模型組、針刺百會(huì)組及針刺非經(jīng)穴組大鼠其埋伏期明顯延長(zhǎng),呈顯著性差異(P0.05),穿越平臺(tái)的次數(shù)減少(P0.05),提示結(jié)扎雙側(cè)頸動(dòng)脈可對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶才能造成了影
2、響。結(jié)論結(jié)扎雙側(cè)頸動(dòng)脈可導(dǎo)致輕度認(rèn)知功能障礙,對(duì)大鼠的學(xué)習(xí)記憶才能造成了影響?!娟P(guān)鍵詞】輕度認(rèn)知功能障礙;頸總動(dòng)脈;結(jié)扎;大鼠;學(xué)習(xí)記憶才能1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物部提供的合格istar雄性大鼠48只(體重200250g),隨機(jī)分為I模型組、針刺百會(huì)組、針刺非經(jīng)穴組、正常組每組12只。動(dòng)物用標(biāo)準(zhǔn)食水飼養(yǎng),自由攝齲1.3造模方法大鼠于術(shù)前812h禁食,期間可自由飲水,用10%水合氯醛(3L/kg體重,腹腔注射)將其麻醉后,仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上,隨后將頸部皮膚剪毛備皮并用活力碘消毒,行頸側(cè)向切口,仔細(xì)別離1.4針刺選取百會(huì)穴(頂骨正中)、大鼠頭部?jī)蓚?cè)固定的非穴位點(diǎn)(百會(huì)穴與耳根
3、聯(lián)線的中點(diǎn))。方法:兩穴均向前沿皮刺入5,不進(jìn)展手法刺激,連接Hans電針儀,施以連續(xù)波,頻率20Hz,電壓24V,強(qiáng)度以大鼠安靜耐受為度(約為2A),留針20in,隔日1次,4周為1個(gè)療程。1.5大鼠rris水迷宮實(shí)驗(yàn)在造模前后及針刺前后分別進(jìn)展水迷宮實(shí)驗(yàn),參照rris6方法進(jìn)展。那么棲身其上,每次的訓(xùn)練時(shí)間設(shè)定為70s,作為最大埋伏期,即逃避到平臺(tái)上的埋伏期(esapinglateny)。假如小鼠在70s內(nèi)未找到平臺(tái),其埋伏期按70s計(jì)算,記錄各大鼠尋找平臺(tái)的時(shí)間。時(shí)間越短說(shuō)明大鼠的學(xué)習(xí)記憶才能越好。2結(jié)果2.1一般情況結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈后,大多數(shù)大鼠眼瞼下垂,活動(dòng)才能低下,自發(fā)運(yùn)動(dòng)減少。I
4、模型組死亡2只(1只麻醉過(guò)量,1只在造模時(shí)別離頸動(dòng)脈過(guò)程中死亡),針刺非經(jīng)穴組死亡1只(造模后因呼吸困難死亡)。死亡大鼠實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不做統(tǒng)計(jì)。2.2對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響見表1。表1各組大鼠逃避埋伏期比擬略注:與本組造模前埋伏期比擬,#P0.05;與正常對(duì)照組造模后、治療后埋伏期比擬,P0.05由表1顯示,造模前,各組大鼠逃避埋伏期無(wú)顯著性差異(P0.05),說(shuō)明各組大鼠逃避埋伏期根本一致,即大鼠學(xué)習(xí)的才能根本一致;造模后,I模型組、針刺百會(huì)組及針刺非經(jīng)穴組大鼠埋伏期與正常對(duì)照組比擬,其埋伏期明顯延長(zhǎng),呈顯著性差異(P0.05),提示結(jié)扎雙側(cè)頸動(dòng)脈對(duì)大鼠學(xué)習(xí)的才能造成了影響;治療后,正常對(duì)照組大鼠的
5、逃避埋伏期短于I模型組和針刺非經(jīng)穴組,呈顯著性差異,針刺百會(huì)組與I模型組比擬差異顯著(P0.05)。針刺百會(huì)組能使I模型大鼠埋伏期明顯縮短。3討論AD的發(fā)病率逐年上升,嚴(yán)重威脅人類的安康,因此對(duì)癡呆前期I期的治療有更重要的價(jià)值和意義。I的根底研究離不開動(dòng)物模型,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)結(jié)扎大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈制備了I大鼠模型,且本方法有利于機(jī)體緩慢到達(dá)腦供血缺乏的狀態(tài),與臨床慢性腦缺血接近。Ra7對(duì)19771997進(jìn)展的頸動(dòng)脈狹窄與認(rèn)知功能障礙關(guān)系的14項(xiàng)研究進(jìn)展了匯總分析:其中12項(xiàng)發(fā)現(xiàn)頸動(dòng)脈狹窄組患者有認(rèn)知功能障礙。頸動(dòng)脈狹窄后可能發(fā)生一系列的病理生理改變,導(dǎo)致持續(xù)低灌注,而細(xì)胞正常功能的維持需要充分的能量
6、供給,認(rèn)知功能減退可能是慢性缺血,或持續(xù)低灌注造成的能量供給減少的后果。電針治療通過(guò)激發(fā)腧穴特性與人體生物電的耦合作用,可促進(jìn)腦部循環(huán),改善組織供血供氧,進(jìn)步腦功能,改善智力狀況8。本實(shí)驗(yàn)可觀察到:針刺治療后,與I模型組比擬,針刺百會(huì)組能顯著縮短定位航行試驗(yàn)的埋伏期(P0.05)。由此可以看出針灸對(duì)于早期干預(yù)I,延遲或阻止癡呆的發(fā)生、開展有很重要的臨床意義。針灸治療I是通過(guò)多種途徑來(lái)進(jìn)展的,具有重要的學(xué)術(shù)價(jià)值、推廣意義及應(yīng)用前景,它確能進(jìn)步臨床療效,又具有無(wú)毒副反響的優(yōu)勢(shì),因此具有較大的潛力。因此,今后需進(jìn)一步加強(qiáng)針灸防治本病的臨床與機(jī)理研究,以適應(yīng)已經(jīng)到來(lái)的老齡化社會(huì)的需要。本實(shí)驗(yàn)的大鼠模型具備了I的患病因素(即腦低灌注),且呈現(xiàn)了較為明顯的學(xué)習(xí)、記
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