面膜類化妝品中氟輕松檢測(cè)方法(高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法)

1、面膜類化妝品中氟輕松檢測(cè)方法(高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法)范圍本方法規(guī)定了面膜類化妝品中氟輕松的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。本方法適用于面膜類化妝品中氟輕松的定性定量測(cè)定。方法提要面膜類化妝品用飽和氯化鈉溶液分散，用乙腈從分散液中提取氟輕松，用亞鐵氰化鉀和乙酸鋅沉淀提取液中大分子基質(zhì)，經(jīng)固相萃取小柱凈化，用高效液相色譜儀分離，質(zhì)譜檢測(cè)器檢測(cè)，采用保留時(shí)間和特征離子對(duì)豐度比定性，以待測(cè)物質(zhì)相對(duì)應(yīng)離子峰面積定量，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算含量。本方法的檢出限為0.03 g/g，定量限為0.05 g/g。試劑和材料除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為純化水。甲醇：色譜純。乙腈：色譜純。冰醋

2、酸：優(yōu)級(jí)純。飽和氯化鈉溶液。10%亞鐵氰化鉀溶液：稱取 115 g亞鐵氰化鉀K4Fe(CN)6 3H2O 固體，用水溶解定容至1000 mL。20%乙酸鋅溶液：稱取 239 g乙酸鋅C4H6O4Zn 2H2O固體，用水溶解定容至 1000 mL。asis HLB 固相萃取小柱或相當(dāng)者：60 mg， 3 mL。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：氟輕松，純度不小于99.0%；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的分子式、相對(duì)分子質(zhì)量、CAS 登錄號(hào)、化學(xué)結(jié)構(gòu)圖參見附錄A。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（ =1g/L） ：準(zhǔn)確稱取氟輕松標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（3.8） 10mg，精確到 0.01 mg，臵于10 mL 量瓶中，用甲醇溶解并定容，于18 下冷凍保存。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：臨用時(shí)

3、，取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（3.9）適量，用乙腈稀釋成0.05 g/m、L0.10 g/m、 L 0.20 g/m、 L0.40 g/m、 L0.80 g/m系列濃度的L 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。儀器和設(shè)備高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（ESI 源） 。分析天平：感量0.0001g； 0.00001g。渦旋混合器。離心機(jī)：轉(zhuǎn)速5000r/min，容量10mL； 50mL。固相萃取裝臵。分析步驟樣品處理提取稱取樣品 （帶有載體的面膜，去除載體后取樣）0.2 g， 精確至 0.0001 g，臵 15 mL 具塞離心管中，加入3 mL 飽和氯化鈉溶液（3.4） ，于渦旋混合器上混合使樣品分散，準(zhǔn)確加入2 mL 乙腈，

4、充分渦旋提取2 min，以5000 r/min 離心10 min， 吸出上層清液臵于另一50 mL 具塞離心管中，下層溶液用2 mL 乙腈重復(fù)提取一次，合并兩次乙腈提取液，向提取液中加入 40 mL 純化水， 混勻， 加入10%亞鐵氰化鉀溶液（ 3.5） 0.2 mL， 混勻，加入20%乙酸鋅溶液（3.6） 0.2 mL，混勻，以5000 r/min 離心 10 min，取全部上清液待進(jìn)行凈化處理。凈化將 Oasis HLB 固相萃取小柱（3.7）接上固相萃取裝臵，小柱預(yù)先依次用甲醇5 mL、水 10 mL 進(jìn)行活化。將待凈化的樣品上清液（5.1.1）倒入漏斗， 經(jīng)濾紙濾過后，濾液流經(jīng)小柱，待

5、樣品溶液自然流盡后，用 10%乙腈水溶液10mL 清洗小柱，待清洗液自然流盡后，用吸球吹出小柱中的殘留液。在柱出口處接一10mL 具塞離心管，用甲醇4 mL 淋洗小柱，待甲醇自然流盡后，用吸球吹出小柱中的殘留液。取下離心管，將接收的甲醇用氮?dú)獯蹈?，?0%的甲醇水溶液0.2mL 重新溶解后測(cè)定（或根據(jù)需要的濃度用50%的甲醇水溶液重新溶解定容后測(cè)定）?；|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液制備稱取空白樣品5 份 （帶有載體的面膜，去除載體后取樣）， 每份0.2g，精確到0.0001g，臵15mL 具塞離心管中，分別精密加入各濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（3.10） 0.2mL，按樣品處理（5.2）步驟操作，將接收的甲醇用氮?dú)?/p>

6、吹干，用50%的甲醇水溶液0.2mL 重新溶解后測(cè)定。色譜-質(zhì)譜參考條件高效液相色譜參考分析條件色譜柱：SB C18， 50 mm 2.1 mm（內(nèi)徑） ， 1.8m ，或相當(dāng)者；柱溫：室溫；高效液相色譜流動(dòng)相及參考分離條件見表1；進(jìn)樣量：5L 。表 1 高效液相色譜流動(dòng)相及參考分離條件時(shí)間/ min流速/ （mL/min）流動(dòng)相A（水，含0.1%醋酸）流動(dòng)相B（乙腈，含0.1%醋酸）00.368%32%30.368%32%120.325%75%140.325%75%14.10.368%32%160.368%32%質(zhì)譜檢測(cè)參考條件電離方式：電噴霧電離，ESI（ +）離子噴霧電壓：4 kV；霧化

7、氣：氮?dú)猓?8Psi；干燥氣：氮?dú)猓魉伲?2L/min，溫度：350 ；碰撞氣：氬氣；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM ） 。氟輕松的質(zhì)譜測(cè)定參考參數(shù)見表2。表 2 氟輕松的質(zhì)譜測(cè)定參考參數(shù)藥物名稱出峰時(shí)間相對(duì)分子質(zhì)量母離子（錐孔電壓）子離子（碰撞能量）*氟輕松3.84 min452.4882453.3（ 117 V）337.2（ 13 eV）121.0（ 34 eV）注： “ *表示選擇穩(wěn)定且無干擾的子離子作為定量離子對(duì)。”測(cè)定結(jié)果定性判定在相同實(shí)驗(yàn)條件下測(cè)定基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液和樣品溶液，如果樣品溶液中檢出的色譜峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液中的氟輕松峰的保留時(shí)間一致，并且所選擇的兩對(duì)子離子的質(zhì)荷比一致

8、，樣品定性離子相對(duì)豐度與濃度相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的定性溶液的定性離子的相對(duì)豐度進(jìn)行比較時(shí)，相對(duì)偏差不超過表 3 規(guī)定的范圍，則可判定樣品中存在氟輕松。表 3 定性判定時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差相對(duì)離子豐度比（k）k 50%50%k 20%20%k 10%k10%最大允許偏差 20% 25% 30% 50%定量測(cè)定 相同實(shí)驗(yàn)條件下測(cè)定基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液和樣品溶液，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣品中氟輕松的含量用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量，按下式計(jì)算含量。VD m 式中： 樣品中氟輕松含量， g /；g 由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到的樣品溶液中氟輕松的濃度， g/mL； TOC o 1-5 h z V 樣品定容體積，mL；m 樣品取樣量，g；D 稀釋倍數(shù)（不稀釋則取1）。氟輕松的英文名稱、分子式、相對(duì)分子質(zhì)量、