金銀花二氧化碳超臨界萃取物的體外抑菌作用研究

1、金銀花二氧化碳超臨界萃取物的體外抑菌作用研究蘇香萍龔大春張亞雄龔美珍【摘要】目的研究金銀花2超臨界萃取(SFE)物的體外抑菌作用。要領(lǐng)接納瓊脂擴(kuò)散法和試管稀釋法研究金銀花的5種提取工藝，即SFE萃娶SFE-萃取(表現(xiàn)帶夾帶劑)、乙醇提娶超聲波提娶共水蒸餾SD法提取，所得提取原液藥物對(duì)6種細(xì)菌，即金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、白色葡萄球菌、綠膿桿菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌的抑菌作用。結(jié)果5種提取原液藥物對(duì)6種細(xì)菌均有必然按捺作用，并且SFE萃取物對(duì)綠膿桿菌的I為116；SFE-萃取物對(duì)金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌的I均為116。結(jié)論與傳統(tǒng)的提取要領(lǐng)比擬，接納SFE-和SFE工藝得到的萃取物含非綠原

2、酸類(lèi)熱敏抗菌物質(zhì)，進(jìn)步了金銀花的抗菌結(jié)果。【關(guān)鍵詞】金銀花二氧化碳超臨界萃取夾帶劑體外抑菌Abstrat：bjetiveTresearhthegrthinhibitinf2-SFEextratsfrLnieraenbateriainvitr.ethdsTheagardiffusinandtubedilutinethdsereusedtstudythegrthnbateriainhibitinftheLnieraeextratsithfivedifferentkindsfextratinapprahes,hihereSFEextratin,SFE-extratin,alhlextratin,ul

3、trasniextratinandSDextratin,byapplyingthetthefllingbateria:Staphylusaureus,Esherihiali,Baillussubtilis,Staphylusalbus,Pseudnasaeruginsa,Salnellatyphiuriu.ResultsAllLnieraeextratsithfivekindsfextratinsereeffetivetthebateria;theIagainstPseudnasaeruginsafSFEextratsas116；TheIagainstStaphylusaurusandPseu

4、dnasaeruginsafSFE-extratsas116.nlusinparediththenventinalextratinsethds,theextratsithSFE-extratinandSFEextratininludetheheat-sensitivesubstaneshihuldenhanetheinhibitingbateriaability.Keyrds：Lnierae;2Superritialextratin;slvent;Invitrinhibitin金銀花為忍冬科aprifliaeae忍冬屬Lniera植物的枯燥花蕾或帶初開(kāi)的花，為中醫(yī)常用藥，具有清熱解毒、冷風(fēng)散熱

5、之成果1。當(dāng)代藥理研究表白金銀花具有較為普及的藥理作用，如抗菌、抗病毒、抗炎解熱、保肝、抗生養(yǎng)、抗氧化、止血等，這些研究為金銀花的臨床用藥提供了科學(xué)根據(jù)，但所確定的有用部位均是水提取物或醇提取物2，3，有用身分不敷明白和詳細(xì)，因此難以創(chuàng)立有用的質(zhì)量操縱要領(lǐng)。針對(duì)以上不敷，我們接納差異的提取工藝，對(duì)金銀花參加夾帶劑2超臨界SFE-萃取4、未加夾帶劑2超臨界(SFE)萃取5、乙醇醇提取6、超聲波提娶共水蒸餾法SD提取75種提取原液藥物中的揮發(fā)油類(lèi)、黃酮類(lèi)及綠原酸類(lèi)身分別離舉行了富集處置懲罰，接納瓊脂擴(kuò)散法和試管稀釋法對(duì)各個(gè)提取物舉行了體外抑菌實(shí)行研究。1儀器與質(zhì)料1.1藥品JYH-1(接納SFE-

6、工藝提取物，此中JYH-X表現(xiàn)第x種金銀花提取物，反面括號(hào)給出提取工藝說(shuō)明)：山東產(chǎn)金銀花藥材，烘干，研碎，再放入萃取釜，參加夾帶劑，在35下，萃取2h，將萃取物中溶劑夾帶劑旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)撤除得到萃取物萃取率為18.61，綠原酸得率為69.52。1.2造就基1.3菌株所用菌株包羅由浙江產(chǎn)業(yè)大門(mén)生物制藥研究所提供的金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌以及由中國(guó)科學(xué)院微生物研究所購(gòu)得的綠膿桿菌、白色葡萄球菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌共6種。2要領(lǐng)2.1測(cè)藥物的抑菌圈直徑定性闡發(fā)藥物的抗菌作用接納瓊脂擴(kuò)散法8。每平皿加0.1l菌液菌液濃度為1.0105fu/l，涂布整個(gè)造就基外貌，37，吸附30in。然后上面勻稱

7、安排4個(gè)直徑約為6的無(wú)菌不銹鋼牛津杯。然后用移液器在孔中加藥液200l；37恒溫造就箱內(nèi)造就24h后，不雅察并記載抑菌圈的有無(wú)及其直徑巨細(xì)重復(fù)2次，每次做4孔，求直徑的均勻值。2.2定量丈量藥物對(duì)細(xì)菌的最低抑菌濃度(I)及最小殺菌濃度(B)接納試管稀釋法，每種藥物每種菌用無(wú)菌小試管11只排于試管架，第1只不加肉湯造就基，第211管各加1l；于第1只試管中參加設(shè)置好的藥液2l，然后取1l參加第2管，混勻后取1l參加第3管，依次倍比稀釋?zhuān)缘?0管吸出1l棄去，第11管系比擬管。將各管中參加已校正濃度的菌液1.0105fu/l0.1l，混勻后安排37造就24h，不雅察結(jié)果，尋出制止細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥

8、物濃度，3次實(shí)行結(jié)果的均勻值即為金銀花的最小抑菌濃度I。將I以上濃度的造就基各濃度取0.1l傾注瓊脂造就基每濃度做3皿，37，24h后，不雅察細(xì)菌生長(zhǎng)環(huán)境，以每藥物最低無(wú)菌生長(zhǎng)濃度3皿都無(wú)菌生長(zhǎng)來(lái)斷定各藥物的最低殺菌濃度B。3結(jié)果3.1藥物的抗菌作用JYH-1，JYH-2，JYH-3，JYH-4和JYH-5這5種提取原液藥物的生藥含量別離為5.4，92.6，1，2.6，4.0kg/l。根據(jù)實(shí)行要領(lǐng)“2.1，對(duì)6種細(xì)菌做抗菌實(shí)行。實(shí)行結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn)，5種提取原液藥物對(duì)6種細(xì)菌均有必然按捺作用。表1種種金銀花提取物抑菌圈直徑的比力“-表現(xiàn)無(wú)抑菌圈；n83.2藥物對(duì)細(xì)菌的最低抑菌濃度(I)及

9、最小殺菌濃度(B)根據(jù)“2.2項(xiàng)下要領(lǐng)舉行實(shí)行。結(jié)果見(jiàn)表23。表2表現(xiàn)，醇提綠原酸抑菌結(jié)果最明顯，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、綠膿桿菌、枯草芽孢桿菌的I均為116；SFE-萃取物對(duì)金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌抑菌作用較強(qiáng)，其I均為116；SFE萃取物對(duì)綠膿桿菌作用較強(qiáng)，其I為116；SD揮發(fā)油抑菌作用最差，說(shuō)明SFE萃取物揮發(fā)油強(qiáng)于SD揮發(fā)油抑菌結(jié)果，SFE萃取物揮發(fā)油也有必然的抑菌結(jié)果。表2種種金銀花提取物最小抑菌濃度表3種種藥物最小殺菌濃度“-表現(xiàn)無(wú)最小殺菌濃度表3表現(xiàn)，醇提物綠原酸含量79.4殺菌結(jié)果最明顯，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌的B均為18，SFE-萃取物對(duì)綠膿

10、桿菌抑菌作用較強(qiáng)，其B為18；而超聲提取黃酮和SD揮發(fā)油殺菌作用弱，說(shuō)明SFE-萃取物此中綠原酸占26，是醇提物的1/3殺菌結(jié)果強(qiáng)于超聲提取黃酮和SD揮發(fā)油，靠近于醇提綠原酸殺菌結(jié)果，綜合思量綠原酸含量，B，I，表白SFE-萃取物中含有醇提物中所沒(méi)有的非綠原酸類(lèi)抑菌物質(zhì)；文獻(xiàn)報(bào)道9金銀花中有熱敏性抑菌身分。SFE-2可較好地制止熱敏身分粉碎(本文接納35)。本部門(mén)結(jié)果提示，金銀花中含非綠原酸類(lèi)熱敏抑菌物質(zhì)，使金銀花的抑菌結(jié)果進(jìn)步。4結(jié)論5種提取原液藥物對(duì)6種細(xì)菌均有必然按捺作用，SFE-萃取物對(duì)金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌的I均為116；SFE萃取物對(duì)綠膿桿菌的I為116。綜合思量綠原酸含量，B，

11、I，可知SFE萃取物和SFE-萃取物中含有醇提物中所沒(méi)有的非綠原酸類(lèi)抑菌物質(zhì)。金銀花中含非綠原酸類(lèi)熱敏抑菌物質(zhì)，使金銀花的抗菌結(jié)果進(jìn)步。這方面事情值得進(jìn)一步研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1國(guó)度藥典委員會(huì).中國(guó)藥典，部S.北京：化學(xué)產(chǎn)業(yè)出書(shū)社，2000：177.2趙良忠，蔣賢育，段林東，等.金銀花水溶性抗菌物質(zhì)的提取及其抑菌結(jié)果研究J.中國(guó)生物成品學(xué)雜志，2022，19(2)：201.3羅娟，李友鳳，胡曉蓮，等.綠原酸的提取及稀土共同物抗菌活性測(cè)定J.林產(chǎn)化學(xué)與產(chǎn)業(yè)，2022，27(2)：85.4丁利君，吳振輝.金銀花中黃酮類(lèi)物質(zhì)最正確提取工藝的研究J.食品科學(xué)，2002，23(2)：62.5BenvenutiF,GirniF,LabertiL.Superritialdeterpenatinflenessentialil,experientaldataandsiulatinftheseintinuusextratinpressJ.JSuperritialFluids,2001,20(1)：29.6張雁冰，寇嫻，王