漁業(yè)水體中氯硝柳胺的測(cè)定液相色譜

1、DB43/T 1066 2015漁業(yè)水體中氯硝柳胺的測(cè)定液相色譜 - 串聯(lián)質(zhì)譜法范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了漁業(yè)水體中氯硝柳胺(Niclosamide)的液相色譜 - 串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于我省漁業(yè)水體中氯硝柳胺的測(cè)定。規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T 6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法SL 187水質(zhì)采樣技術(shù)規(guī)程方法原理水體中的氯硝柳胺經(jīng)乙腈提取， 二氯甲烷液液萃取濃縮后， 用帶有電噴霧離子源的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀負(fù)離子模式測(cè)定，外標(biāo)法定量。試劑與材料

2、本方法所用試劑除另有說明外，均為分析純；實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T 6682一級(jí)水的規(guī)定。4.1乙腈：色譜純。4.2二氯甲烷：色譜純。4.3乙酸：色譜純。4.4氯化鈉。4.5溶解液：水 +乙腈 =30+70 (V+V) 。4.6氯硝柳胺標(biāo)準(zhǔn)品：純度應(yīng)大于98.0%。4.7標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（ 1.0mg/mL） : 準(zhǔn)確稱取適量的氯硝柳胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用乙腈配制成濃度為1.0 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液， 4避光保存。保存期不超過6 個(gè)月。4.8標(biāo)準(zhǔn)中間溶液： 準(zhǔn)確吸取 0.1mL氯硝柳胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液， 用乙腈稀釋定容至100mL，得到 1.0 g/mL的氯硝柳胺標(biāo)準(zhǔn)中間溶液， 4避光保存，保存期不超過3 個(gè)月。4

3、.9標(biāo)準(zhǔn)工作溶液： 準(zhǔn)確吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，用溶解液稀釋成0.5ng/mL、1.0ng/mL 、5.0ng/mL 、10ng/mL 、 50ng/mL、 100ng/mL 的氯硝柳胺系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用。4.10微孔有機(jī)過濾膜： 0.22 m。儀器與設(shè)備5.1液相色譜 - 質(zhì)譜聯(lián)用儀，配有電噴霧離子源（ESI）。1DB43/T 1066 20155.2分析天平：感量 0.00001 g和 0.01 g 。5.3旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。5.4渦旋混勻器。5.5分液漏斗： 250 mL。5.6茄形瓶： 250 mL。采樣按 SL 187 的規(guī)定執(zhí)行。分析測(cè)定7.1樣品提取準(zhǔn)確量取 50mL水樣，置于

4、 250mL分液漏斗中，加入 10g 氯化鈉，搖勻，準(zhǔn)確加入乙腈 40mL、乙酸 100 L 后振蕩混勻 2min ，在分液漏斗中加入 30mL 二氯甲烷，具塞，劇烈振蕩 2min，靜置分層，收集有機(jī)相于250mL茄形瓶中，繼續(xù)在分液漏斗中加入40mL乙腈、 30mL二氯甲烷，振搖2min ，合并兩次提取液，混勻后于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中 45 下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干。用 1.0mL 溶解液溶解，渦旋混勻后過微孔有機(jī)過濾膜。7.2液相色譜 - 串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定液相色譜條件色譜柱： C18 (150 2.1 mm，粒徑 3 m)，或其它等效柱。流動(dòng)相： A 相：乙腈； B 相：水（ V/V ）。流動(dòng)相梯度洗脫條件見表

5、1。進(jìn)樣量： 10 L。流速： 0.2 mL/min 。柱溫： 35 。表 1流動(dòng)相梯度洗脫條件時(shí)間（ min）A (%)B (%)030706307099010127030157030質(zhì)譜參考條件離子源：電噴霧離子源。掃描方式：負(fù)離子掃描。檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)。電離電壓： 3.0 kV 。離子源溫度： 350 。2DB43/T 1066 2015霧化溫度： 60 。氯硝柳胺保留時(shí)間、定性定量離子對(duì)見表2。表 2氯硝柳胺保留時(shí)間、定性定量離子對(duì)化合物保留時(shí)間（ min）定性離子對(duì) (m/z)定量離子對(duì) (m/z)氯硝柳胺5.49325 289325289325 171測(cè)定取適量標(biāo)準(zhǔn)工作溶液及樣

6、品提取液注入液相色譜 - 質(zhì)譜聯(lián)用儀，化合物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)。定性樣品中待測(cè)化合物色譜峰的保留時(shí)間與相應(yīng)濃度標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)溶液的色譜峰的保留時(shí)間偏差在2.5%之內(nèi)。在相同實(shí)驗(yàn)條件下，樣品中待測(cè)化合物的定性離子對(duì)的相對(duì)豐度與濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液圖譜中對(duì)應(yīng)的定性離子對(duì)的相對(duì)豐度比較,定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差見表3。表 3 定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差相對(duì)離子豐度KK50%20%K50%10%K20%K10 %允許的相對(duì)偏差20%25%30%50%定量以色譜峰峰面積峰值按外標(biāo)法進(jìn)行單點(diǎn)或多點(diǎn)校準(zhǔn)測(cè)定。在上述參考條件下，氯硝柳胺多反應(yīng)監(jiān)測(cè)色譜圖參見附錄A，氯硝柳胺標(biāo)準(zhǔn)

7、溶液的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)色譜圖參見附錄A 中圖 A.1 、空白水樣中添加氯硝柳胺的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)色譜圖參見附錄A中圖 A.2。空白試驗(yàn)除不加試樣外，采用完全相同的分析測(cè)定步驟進(jìn)行平行操作。7.3結(jié)果計(jì)算樣品中待測(cè)化合物含量測(cè)定值扣除空白背景值后，按下式計(jì)算：CCsAiViAsV21000C試樣中待測(cè)化合物的含量，單位為微克每毫升（g/mL ）；Cs 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中待測(cè)化合物的濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；Ai 試樣中待測(cè)化合物的峰面積；As 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中待測(cè)化合物的峰面積；Vi 試樣最終定容體積，單位為毫升（mL）；V2試樣體積，單位為毫升（mL）。3DB43/T 1066 2015計(jì)算結(jié)果需扣除空白試樣，平行測(cè)定用算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留3 位有效數(shù)字。靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度8.1靈敏度氯硝柳胺在漁業(yè)水體中的定量限為0.5 ng/mL。8.2準(zhǔn)確度本方法在0.5 ng/mL 、 1.0 ng/mL 、 5.0 ng/mL的添加濃度的回收率為（70 110） %。8.3精密度本方法的批內(nèi)變異系數(shù)10%，批間變異系數(shù) 15%。4