定量分析中的分離方法

1、定量分析中的分離方法第1頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三1定量分析過程取樣溶樣消除干擾 測定 計算 掩蔽 原理 數(shù)據(jù)處理 分離 方法 結(jié)果報告9.1 概述第2頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三2氣液分離：揮發(fā)和蒸餾 克氏定氮法，Cl2預(yù)氧化I-法液液分離螯合物萃取離子締合物萃取三元絡(luò)合物萃取支撐型液膜乳狀液型液膜生物膜萃取分離 液膜分離其他分離方法：萃淋樹脂、螯合樹脂、浮選、色譜分離法分離分析法：氣相色譜法、液相色譜法、電泳分析法分 離 方 法固液分離沉淀分離離子交換分離氫氧化物：NaOH，NH3硫化物：H2S有機(jī)沉淀劑：H2C2O4，丁二酮肟陽離

2、子交換樹脂陰離子交換樹脂固相萃取氣固分離-超臨界流體萃取第3頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三3分離的意義：消除干擾、富集微量待測組分.對分離的要求：1）干擾組分應(yīng)減小至不再干擾被測組分的測定；2）被測組分在分離過程中的損失要小到可以不計.被測組分A的回收率（RA）：A為主要組分：RA 99.9%A在1%： RA 99%A為微量組分：RA 95%或更低A, B兩組分分離效果的好壞用分離因數(shù)S 表示第4頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三4 9.2.1 無機(jī)沉淀劑 1.氫氧化物沉淀： OH-:分離兩性(Zn(),Pb(),Sn(),Al()與非兩性物.

3、NH3H2O:分離高價金屬離子(Th,Al,Fe3+)與易生成 氨絡(luò)合物的金屬離子(Cu,Co,Ni,Zn,Cd,Hg,Ag). 2. 硫化物：H2S(控制酸度以控制S2-濃度) 3. 其他沉淀劑：Cl-, SO42-, CrO42-, PO43-, F-等. Ag+ Ba2+, Pb2+ Mg2+ Ca2+ 容易發(fā)生共沉淀,選擇性不高; 應(yīng)首先沉淀微量組分.9.2 沉淀分離法第5頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三59.2.2 有機(jī)沉淀劑種類多、選擇性好、 晶形好、可灼燒除去. H2C2O4 用于 Ca2+、Ba2+、Sr2+、 Th4+與Fe3+、Al3+、Zr4+ 分

4、離銅鐵試劑（N-亞硝基-苯胲胺）在1:9的H2SO4 中，F(xiàn)e3+、Ti4+、V(V)與Al3+、Co2+、Cr3+、 Ni2+ 分離.N-ONH4N=O第6頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三6銅試劑（二乙基胺二硫代甲酸鈉）使重金屬離子與Al3+、稀土、堿土離子分離.在弱酸性溶液中只與Ni2+、 Pd2+生成沉淀；在氨性溶液中,酒石酸存在下,與Ni2+的反應(yīng)幾乎是特效的.丁二酮肟NCSSNaC2H5C2H5CH3CCNOHNOHH3C第7頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三7 通過控制pH和加入掩蔽劑，使一些金屬離子得到分離. 8羥基喹啉 不與Al3+

5、生成沉淀，可與Zn2+、 Mg2+生成沉淀.1甲基8羥基喹啉NOHNOHCH3第8頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三89.2.3 共沉淀分離富集CaCO3(Pb), Al(OH)3, Fe(OH)3選擇性差, 干擾下一步測定.有機(jī)共沉淀劑: 丹寧、動物膠等,可灼燒除去.例: 丁二酮肟-Ni(內(nèi)絡(luò)鹽)+惰性共沉淀劑 +SCN-甲基紫(絡(luò)合共沉淀劑)Zn2+ Zn(SCN)42- 難溶三元絡(luò)合物SCN-甲基紫+(10 g/L)例:+ 丁二酮肟二烷酯 (乙醇溶液)第9頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三9 在KCN的氨性溶液中通入H2S， Cd2+被沉淀，

6、Cu2+不沉淀, Cu2+ Cu(CN)32-1. 控制酸度: 例： Cu2+、Cd2+分離 2. 利用絡(luò)合掩蔽作用 例： Ca2+、Mg2+分離 (NH4)2C2O4過量, Ca2+ 沉淀, Mg2+生成Mg(C2O4)22-. 例： Pb2+、Ca2+分離在EDTA存在下，控制pH2.84.9,CaC2O4,與Pb2+分離.9.2.4 提高沉淀分離的選擇性第10頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三10用草酸鹽沉淀分離Pb2、Ca2pCapPbpPbX 1.0pCa無EDTAX6.110 8 6 4 2 0 pM(pM)024682.84.9pH6.88.7pCa 5pP

7、b 2pCapPb pKsp(PbC2O4) =9.7, lgK(PbY)=18.0 pKsp(CaC2O4) =7.8, lgK(CaY)=10.7C2O4 =0.1 molL-1 Y =0.01 molL-1有EDTA第11頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三113. 利用氧化還原反應(yīng),改變離子存在狀態(tài)Mn2+ Ca2+、Mg2+MnO(OH)2Ca2+、Mg2+氧化NaOHH2O2Fe(OH)3CrO42-Fe3+Cr3+第12頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三129.3 溶劑萃取分離法9.3.1 萃取原理與基本概念依據(jù): “相似相溶” 物質(zhì)在極

8、性不同的溶劑中溶解度不同. 水: 極性, 離子型化合物(親水性)易溶. 有機(jī)溶劑(丙酮、CHCl3、CCl4 、苯): 有機(jī)化合物 (疏水性)易溶.萃取: 將親水性物質(zhì)轉(zhuǎn)化成疏水性化合物 而進(jìn)入有機(jī)相.反萃取: 恢復(fù)親水性,再回到水相.第13頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三13分配平衡示意圖1. 分配系數(shù)在一定溫度下,濃度不太大時,KD為常數(shù),稱分配定律.嚴(yán)格說：中性分子 1woA 有機(jī)相A 水相 第14頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三14碘在CCl4-H2O中的分配（25） I2O(gL-1) 25.61 0.2913 87.9 16.54 0

9、.1934 85.5 10.88 0.1276 85.3 6.97 0.0818 85.2I2W(gL-1)KD第15頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三152. 分配比lgKDlgDlgI-例：有I-存在時, I2在CCl4H2O中的分配第16頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三163. 萃取率相比 R第17頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三17不同KI濃度下的I2在CCl4-H2O體系中的D和E(R =1)lgI-0-1-2-3-4-5-6lgD-1.10.0130.981.681.901.931.94D0.0791.039.5

10、47.979.485.187.1E7.750.890.598.098.898.8598.85第18頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三18分配比與萃取率的關(guān)系曲線（VO=VW, R=1)DE/%150109110099100099.9100010010.01.00.100.01D0 20 40 60 80 100萃取率 (E/%)第19頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三19若D = 5，R = 1時， 一次萃取率 E = 83%若D = 5，R = 1/3時，一次萃取率 E = 94%若D = 5，R = 1時， 三次總萃取率 E = 99.5% 用同

11、量溶劑多次萃取效果好.萃取次數(shù)與萃取率的關(guān)系第20頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三20m0為被萃取物總量，m1為一次萃取后，水中剩余量.多次萃取時萃取率 E 的計算第21頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三21例1： 在pH=7.0時, 以8-羥基喹啉(Oxine)氯仿溶液從 水溶液中萃取La3+.已知: D=43, c(La3+)w=1.00 mgmL-1, Vw=20.0 mL.2. VOxine= 5.0 mL n = 2=43/(43+2)=96%1. VOxine= 10.0 mL第22頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期

12、三22 乙醚作用：生成 鹽, 溶劑, 萃取劑.1. 離子締合物萃取 萃取容量較大,常用于分離基體元素,如鋼鐵中的Fe3+.9.3.2 萃取類型與萃取平衡鹽 萃入乙醚中FeCl4OH+C2H5C2H5OHC2H5C2H5FeCl4第23頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三23例： Sb(V)在濃HCl中生成SbCl6-，可與堿性染料孔雀 綠的陽離子生成締合物，而被苯萃取，該體系用于萃取光度法測微量Sb. 離子締合物萃取(H3C)2NN(CH3)2 SbCl6C第24頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三24次甲基藍(lán) 用苯萃取 測定BNS(H3C)2NN(CH

13、3)2BF4第25頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三25羅丹明B用苯+乙醚（3:1）萃取測定Ga+COCOOHN(C2H5)2(C2H5)2NGaCl4第26頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三26丁二酮肟鎳(電中性)，從水中萃入CHCl3 .2. 螯合物萃取2Ni2CH3CCNOHNOHH3COHONiNCONCCH3CH3HOCH3CCNNH3C第27頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三27有機(jī)物(萃取劑HL)的萃取平衡pHD6.05.97.05.88.92.9510.00.4312.04.710-3例 乙酰丙酮(苯-水） KD

14、=5.9, pKa= 8.92.958.9第28頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三28HL各形式分布系數(shù)： x(L-)(w)，x(HL)(w) ，x(HL)(o) 第29頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三29HL(o)L-(w)HL(w)第30頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三30萃取劑的副反應(yīng)(分配及離解、質(zhì)子化)系數(shù)忽略當(dāng)pH lgKH(HL)時, 迅速增大第31頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三31乙酰丙酮的副反應(yīng)系數(shù)-pH圖乙酰丙酮的KD=5.9, lgKH(HL)=8.9, R=1lgaHL(w)

15、第32頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三32金屬螯合物的萃取萃取常數(shù)Kex nL- + Mn+ MLn兩相界面HLMLn(1)(2)(3)(4)Organic phaseWater phaseHLH + L-KD(HL)KD(MLn)KH(HL)第33頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三33設(shè)有機(jī)相中金屬離子全部以MLn形式存在，水相中金屬離子全部以Mn+形式存在.因此第34頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三34萃取反應(yīng)的條件萃取常數(shù)AWHL,L-第35頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三35若知D 和相比R，

16、即可求E，可繪制E-pH曲線以雙硫腙的四氯化碳溶液萃取金屬離子的萃取曲線E=50%的pH稱 pH第36頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三36 結(jié)論：1. Mn+的E隨pH升高而增大;2. 不同價態(tài)，斜率不同，價態(tài)越高斜率越大;3. 不同金屬離子的Kex不同（n , KD不同）， 定量萃取的pH不同.第37頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三37為了萃取分離金屬離子M和N：1. 選擇合適的萃取劑和溶劑，使與M的n大，KD(MLn)大，減小M的pH; pH 3，M與N可定量分離.2. 加適當(dāng)?shù)难诒蝿?，使N的 大， 增大N的pH.第38頁，共86頁，2022

17、年，5月20日，0點55分，星期三389.3.3 幾種重要的萃取劑 乙酰丙酮lgKH(HL)= 8.9， lgKD= 0.77（C6H6H2O ）萃取離子：Fe3BeCuAlThPbNiCo2+ZnMnHg噻吩甲酰三氟丙酮lgKH(HL)=6.23， lgKD=1.6可在酸性溶液中萃取金屬離子,主要用于錒系元素分離.CH3COCH2CCH3OSCOCH2COCF3第39頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三398-羥基喹啉 銅鐵試劑lgKD=2.6，lgKH(HL)=9.9， lgKH(H2L) =5.0 （CH2Cl2H2O ）VO2+ Fe3+ Ga3+ Cu2+ TiO

18、2+ Bi3+ Ni2+ Al3+ Th4+ Hg2+Co2+ Zn2+ Cd2+ Pb2+ Mn2+ Ca2+lgKH(HL)=4.16， lgKD=2.18 （CHCl3H2O ） Fe3,Ti, Zr,V,Nb,Bi,Cu,Th（酸性）NOHN-ONH4N=O第40頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三409.3.4 溶劑萃取的應(yīng)用 1. 萃取分離 雙硫腙能與20余種M生成螯合物 稀無機(jī)酸溶液（0.10.5molL-1），可萃取Hg、Ag、Au、Cu；萃取后, 用含EDTA的堿性溶液洗萃取液, HgY被反萃到水相,幾乎無干擾. 弱酸性介質(zhì)，可萃取Bi. 中性或弱堿性，可

19、萃取Zn、Cd、Pb、Ni.2. 萃取富集 天然水中致癌物3,4-苯并芘的檢測 用環(huán)已酮從大量水中萃取，濃縮到小體積，層析分離后 熒光法測定.第41頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三41溶劑比水輕溶劑比水重溶劑溶劑水溶液水溶液 冷凝器 連續(xù)萃取裝置第42頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三423. 萃取比色：合金鋼中釩的測定三元絡(luò)合物紫紅色萃取光度法= 530 nmV(IV)氧化劑V(V)鉭試劑CHCl3V-鉭試劑-ClHCl(3.5molL-1)1 : 2 : 1第43頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三43+ + + + + +

20、 + o +o + o+ o +o + oo o oo + oo o oo o oo o o+ + + + + + + + + + + + + + + o +o + oo + oo o oo o oo o oo o oo o oo o oo o o o + o+ o +o o + + + o+ + + + + + +K+H+淋洗交換上柱溶液中的離子與離子交換樹脂發(fā)生離子交換而分離.9.4 離子交換分離法第44頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三44A+BABAB柱層析離子交換層析法將交換上去的離子， 用適當(dāng)?shù)南疵搫┮来蜗疵摱蛛x.第45頁，共86頁，2022年，5月20日，

21、0點55分，星期三45CO O HCH2CHOHCHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH3CHCH3CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH3CHCH2CHCH2H2SO4SO3HSO3HSO3HSO3HSO3HSO3H+HC=CHHC=CHHC=CH（催化劑）n（分散劑）交聯(lián)度: w (交聯(lián)劑) 812%交換容量：36 mmolg-1 (干）9.4.1 樹脂的種類和性質(zhì) 網(wǎng)狀高分子聚合物第46頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三46樹脂類型陽離子交

22、換樹脂: 含酸性活性基團(tuán)的樹脂.強酸型：RSO3H pH 0 14 適用的酸度范圍寬交換洗脫 弱酸型：RCOOH pH 4 ROH pH 9.5 選擇性好, 可分離各種有機(jī)堿及氨基酸第47頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三47強堿型：R N(CH3)3Cl pH 014弱堿型：R NH2 ， RNHCH3 pH 07 RN(CH3)2 pH 9.5交換洗脫螯合樹脂：含有特殊的螯合活性基團(tuán) 水化作用陰離子交換樹脂: 含堿性活性基團(tuán)的樹脂 第48頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三48 9.4.2 樹脂對離子的親和力順序強酸型陽離子交換樹脂對一價陽離子 L

23、i+ H+ Na+ NH4+ K+ Rb+ Cs+ Ag+ Tl+對二價陽離子 Mg2+ Ca2+ Sr2+ Ba2+ Fe2+ Co2+ Ni2 +Cu2+ Zn2+ 水合離子半徑越小親和力越大對不同價態(tài)離子 Na+ Ca2+ Fe3+ Th4+ 電荷數(shù)越高親和力越大強堿型陰離子交換樹脂 F- OH- Ac- HCOO- H2PO4- Cl- NO3- HSO4- CrO42- SO42-第49頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三49陽離子交換分離（0.1 molL-1 HCl為淋洗液）0100200300400V洗(mL)cLi+Na+K+(2molL-1 HCl)K+

24、親和力大的先被交換上去, 后被洗脫下來.第50頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三50離子交換反應(yīng)達(dá)到平衡時分配系數(shù)選擇性系數(shù)即分離因數(shù)第51頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三519.4.3 離子交換分離操作技術(shù)樹脂的選擇和處理裝柱交換洗脫樹脂再生離子交換樹脂玻璃纖維交換柱第52頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三529.4.4 離子交換分離法的應(yīng)用1. 水的凈化:陽離子柱陰離子柱混合柱2. 離子的分離與富集: Al3+、Fe3+與SO42-分離 Cr(VI)與Cr3+分離 Al3+與Fe3+分離：FeCl4-用陰離子交換樹脂除去

25、Co2+Ni2+HCl9 molL-1CoCl42-Ni2+陰離子交換樹脂第53頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三53用強堿性陰離子交換樹脂分離 Ni,Mn,Co,Cu,Fe,Zn (HCl 濃度molL-1)020406080100洗脫劑體積，mLNi2+Mn2+Co2+Cu2+Fe3+Zn2+12642.50.50.005洗脫曲線第54頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三54 離子色譜法分離陰離子色譜柱：IonPac AG14 和 AS14, 2mm (i.d.)進(jìn)樣量：1000 L洗脫液：50 mmolL-1 硼酸F-未知CO32-Cl-NO3-

26、PO43-SO42-第55頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三553. 氨基酸的分離( 陽離子交換樹脂) 用pH遞增的檸檬酸鹽緩沖溶液洗脫側(cè)鏈pKa增大的氨基酸4. 蛋白質(zhì)、酶、核酸等生物活性物質(zhì)的 分離、純化和富集.第56頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三56 例: 測定含F(xiàn)e3+溶液中H3BO3的濃度 將溶液通過強酸型陽離子交換樹脂除去Fe3+;預(yù)中和溶液中的游離酸(MR), 加入多元醇, 用NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定(PP).例: 用離子交換法測定NaAc的含量 NaAc H-陽離子樹脂(NaOH滴定, PP)HAcCl-陰離子樹脂NaCl(AgNO

27、3滴定,K2CrO4)NaOHOH-陰離子樹脂(HCl滴定, MR,PP)第57頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三57葉綠素葉綠素葉黃素， 葉黃素茨維特色譜圖 （1906）葉綠素的石油醚溶液流經(jīng)裝有CaCO3的柱子，然后用石油醚淋洗.CaCO3對葉綠素各成分吸附能力不同，而分離成為色帶.9.5 色譜法第58頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三58色譜法分類按分離機(jī)理吸附色譜法(物質(zhì)在固體表面吸附能力不同)排阻色譜法(分子大小不同)分配色譜法(在氣-液或液-液兩相KD不同)離子交換色譜法(離子交換能力不同)按分離方法液相色譜法(流動相是液體) 柱色譜法(

28、CC), 薄層色譜法(TLC), 紙色譜法(PC), 高效液相色譜法(HPLC),離子色譜法(IC)等氣相色譜法(流動相是氣體) GC 填充柱色譜(GSC), 毛細(xì)管柱色譜(GLC)第59頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三599.5.1 柱色譜法 (Column Chromatograph)機(jī)理: 吸附色譜吸附劑: Al2O3, SiO2(硅膠), 聚酰胺等吸附劑和洗脫劑的選擇:物質(zhì)極性 吸附活性 洗脫劑極性 強 小 強 弱 大 弱常用洗脫劑極性次序:石油醚環(huán)己烷CCl4甲苯CH2Cl2CHCl3乙醚醋酸乙酯正丙醇乙醇甲醇 0.02，A、B可分離.溶劑前沿起始線（原點）展

29、開劑yx2x1層析缸層析紙與標(biāo)樣比較可定性鑒定第62頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三62定性檢出氨基蒽醌試樣中的各種異構(gòu)體樣品： 氨基蒽醌固定相：-溴代萘附著 于濾紙纖維素上.展開劑：吡啶:水(1:1）溶劑前沿1,7-氨基蒽醌1, 6-氨基蒽醌1, 8-氨基蒽醌1-氨基蒽醌硝基蒽醌原點第63頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三63例：氨基酸混合液點在15 cm15 cm濾紙邊2 cm處，風(fēng)干，展開劑用CH3OH-H2O-吡啶（20:5:1），當(dāng)溶劑移動至14 cm處，取出風(fēng)干.（第一次展開） 將濾紙折成筒狀，使斑點處于下方，再用叔丁醇-甲基乙基酮-H

30、2O-二乙胺(10:10:5:1) 展開至14 cm，取出風(fēng)干。(第二次展開)顯色：茚三酮-4-乙-2-甲氮苯-冰HAcxx第二次展開雙向紙色譜法第一次展開第64頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三64 氨基酸的Rf展開劑正丁醇+吡啶+水 0.20 0.29 0.60 0.20 0.33 0.24 1 : 1 : 1正丁醇+醋酸+水 0.23 0.23 0.70 0.28 0.22 0.11 12 : 3 : 5天冬氨酸甘氨酸白氨酸谷氨酸絲氨酸組氨酸PC檢測方法；顏色, 顯色(反應(yīng)顯色, I2蒸氣, 紫外燈照)剪下斑點，用適當(dāng)?shù)娜軇┫疵摵鬁y定(比色,熒光)第65頁，共86頁

31、，2022年，5月20日，0點55分，星期三65薄層板玻璃板上涂吸附劑層SiO2Al2O3上行法薄層板層析缸展開劑層析缸展開劑濾紙條下行法薄層板 9.5.3 薄層色譜法 (Thin Layer Chromatography)第66頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三66薄層色譜法點樣及展開過程第67頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三67展開后的薄層板可卡因標(biāo)樣海洛因標(biāo)樣甲基安非他明標(biāo)樣實際樣品第68頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三68薄層層析法的應(yīng)用天然產(chǎn)物和有機(jī)化合物的分離與鑒定 (藥物, 香精, 氨基酸及其衍生物)例: 3,

32、4-苯并芘的檢測 富集: 環(huán)己酮或石油醚提取,脫水后濃縮至0.1mL; 層析分離: 制板, 點樣, 展開; 測定: 截取-乙醚洗脫-蒸干-濃H2SO4溶解, 熒光法測定(對照標(biāo)樣).發(fā)展: 薄層層析膠片， 旋轉(zhuǎn)薄層層析儀， 自動進(jìn)樣技術(shù)，光譜掃描技術(shù)等.第69頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三69活潑吸附劑不活潑極性非極性展開劑非極性極性被分離物質(zhì) 選擇展開劑的三角形法示意圖吸附劑吸附能力順序：淀粉 滑石 碳酸鎂(鈣) 磷酸鎂(鈣) 硅膠 氧化鋁 活性炭第70頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三709.5.4 高效液相色譜分析法(HPLC)特點高壓：1

33、.5104 3.0104 kPa，最高達(dá)5104 kPa高速： 450）、不能氣化的，以及具有生理活性物質(zhì)的分析，8085%的有機(jī)物可用HPLC法分離測定. 如生物大分子：核酸、多肽、代謝產(chǎn)物缺點：儀器設(shè)備費用較高.第71頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三71高效液相色譜儀器結(jié)構(gòu)示意圖紫外-可見熒光電導(dǎo)儲液器高壓泵進(jìn)樣器色譜柱梯度洗脫餾分收集器檢測器記錄儀壓力表 High Performance Liquid Chromatography第72頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三72高效液相色譜法分類：（按固定相）1. 液固吸附色譜：硅膠、氧化鋁等固體

34、吸附劑.2. 液液分配色譜：固定液涂在惰性擔(dān)體上.3. 離子交換色譜: 離子交換樹脂，溶液中能以離子形式存在的組分.4. 凝膠色譜(排阻): 多孔性聚合材料, 應(yīng)用于大分子的分級.5. 親和色譜: 固定相表面有特異性親和力, 抗原與抗體、酶與底物、激素與受體、RNA與其互補的DNA.第73頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三739.5.5 氣相色譜法 (Gas Chromatography)氣固色譜（GSC） 固體吸附劑為固定相.氣液色譜（GLC） 附著在擔(dān)體上的液體為固定相.第74頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三741-載氣鋼瓶2-減壓閥3-凈化干燥管4-針形閥5-流量計6-壓力表7-進(jìn)樣8-色譜柱9-熱導(dǎo)檢測器10-放大器11-溫度控制器12-記錄儀氣相色譜儀器示意圖 第75頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三75色譜流出曲線及有關(guān)術(shù)語色譜流出曲線圖t0tR(A)tR(A)t(min)信號進(jìn)樣空氣峰組分A組分B基線t0: 死時間(V0 死體積） tR: 保留時間(VR保留體積） : 調(diào)整保留時間( 調(diào)整保留體積)第76頁，共86頁，2022年，5月20日，0點55分，星期三76定性鑒定方法：利用純物質(zhì)對照： 與純物質(zhì)比較、標(biāo)準(zhǔn)加入法、雙柱定性.2. 利用文獻(xiàn)保留值： 相對保留值: 與某一基準(zhǔn)物質(zhì)(苯、正丁烷等