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1、T5I15T5I15氨基葡萄糖檢測(cè)方法樣品處理:取1mL反應(yīng)液,離心去除反應(yīng)中沉淀,用去離子水進(jìn)行適當(dāng)稀釋后經(jīng)孔徑為0.22pm的濾膜過濾。檢測(cè)方法1分析方法:OPA硼酸柱前衍生化色譜條件:(1)色譜柱:色譜柱C18(250*4.6)mm柱溫:40C流動(dòng)相A:稱取3.02g無水乙酸鈉于燒杯中,加去離子水溶解并定容至1L,然后加入200吐三乙胺,用5%的醋酸將PH調(diào)到7.200.05;抽濾后加入5毫升四氫呋喃,混合后備用。流動(dòng)相B:稱取3.02g無水乙酸鈉于燒杯中;加去離子水溶解并定容至200mL;用5%醋酸將PH調(diào)到7.200.05;抽濾后,再向此溶液加入400mL乙腈和400mL甲醇,混合后
2、備用。(4)流速:1.0ml/min;(5)紫外檢測(cè)器:338nm(6)柱溫:40C(7)梯度洗脫:時(shí)間A%B%流速(ml/min)09281.020.040601.022.501001.023.501001.224.501001.225.001001.226.59281.2(8)進(jìn)樣程序:試劑擺放位置:P1A1:OPAP1A3:水Acq.址己七h(yuǎn)adLastchangedAnalysisMethodLastchangedDAD1A,Sg=338,4Ref=360,100Acq.址己七h(yuǎn)adLastchangedAnalysisMethodLastchangedDAD1A,Sg=338,4Re
3、f=360,100:DEF_LC2016-05-182020-58007-0201.D:iI20P1A4:硼酸P1A5:水抽?。菏褂媚J(rèn)值補(bǔ)償值從含200ul/min的位置P1A4上抽取7ul清洗:在位置P1A3清洗針一次抽取:使用默認(rèn)補(bǔ)償值從含200ul/min的樣品位置抽取1ul清洗:在位置P1A3清洗針一次混合:將來自空氣中的8ul與最大速度混合3次抽?。菏褂媚J(rèn)補(bǔ)償值從含200ul/min的位置P1A1上抽取2ul清洗:在位置P1A3清洗針一次混合:將來自空氣中的10ul與最大速度混合15次抽取:使用默認(rèn)補(bǔ)償值從含200ul/min的位置P1A5上抽取30ul混合:將來自空氣中的20u
4、l與300ul/min混合3次進(jìn)樣:進(jìn)樣(9)定量方法:采用外標(biāo)法定量檢測(cè)結(jié)果如圖1所示InjVolume:InjprogC:CHEM321DATADEF_LC2016-05-18202058AAA-VWD-JZ址5/18/20167:19:59PMbybjC:CHEM321METHODSWUDIM/3/20166:36:50PMbybjmAU140120100806040200I10AreaPercentRepor七圖1高效液相色譜法檢測(cè)氨基葡萄糖圖譜檢測(cè)方法2分析方法:高效液相色譜法氨基柱檢測(cè)GlcN和GlcNAc色譜條件:(1)色譜柱:AgilentNH2(250mmX4.6mm,5卩m);(具體型號(hào)如圖2所示)(2)流動(dòng)相:(3)檢測(cè)器:紫外檢測(cè)器;(4)檢測(cè)波長:195nm;(5)流速:1.0mL/min;(6)進(jìn)樣量:20卩L;(7)柱溫:35C。(8)定量方法:外標(biāo)法定量0CDN3N$檢測(cè)結(jié)果如圖0CDN3N$檢測(cè)結(jié)果如圖3所示:一夕卜標(biāo)告夕卜標(biāo)告第1頁(共1頁)夕卜標(biāo)告夕卜標(biāo)告第1頁(共1頁)方法名稱:C:EZChromEliteEnterpriseProjectsDefaultM數(shù)據(jù)文件:E:12.Q9姜竹混標(biāo)Q.5用戶名稱:System號(hào)取時(shí)間:2015-12-916:36:17打印時(shí)間:2015-12-917:36:05DAD-CH1195nm結(jié)果峰編號(hào)
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