黃酮類(lèi)化合物

1、黃酮類(lèi)化合物第1頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五本章內(nèi)容 第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與分類(lèi) 第二節(jié) 理化性質(zhì) 第三節(jié) 提取與分離 第四節(jié) 鑒 定第2頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 1、名稱(chēng)由來(lái)：此類(lèi)化合物多為黃色，且具有酮式羰基，故稱(chēng)黃酮類(lèi)化合物。 2、存在形式：黃酮類(lèi)化合物廣泛存在于植物中，不少的常用中藥中主要含有此類(lèi)成分。大多與糖結(jié)合成苷，稱(chēng)為黃酮苷類(lèi)；有的以游離形式存在，即未與糖結(jié)合，稱(chēng)為游離黃酮或黃酮苷元，同一植物中可能同時(shí)存在游離黃酮及其苷。 第3頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五主要的生理活性1.對(duì)心血管的作用，如葛根總黃酮

2、及葛根素(puerarin)、銀杏葉總黃酮等具有擴(kuò)張冠狀血管作用 。蘆?。╮utin）、橙皮苷（hesperidin）、d-兒茶素（d-catechin）等具有降低毛細(xì)血管脆性和異常通透性作用，可用作毛細(xì)血管性出血的止血藥及治療高血壓、動(dòng)脈硬化的輔助藥 。2.抗菌、抗病毒作用，如黃芩苷，木犀草素苷等。3.止咳祛痰作用，如杜鵑素、甘草素和甘草苷等。第4頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五一、基本結(jié)構(gòu)與分類(lèi)（一）黃酮類(lèi)化合物的基本結(jié)構(gòu)色原酮2-苯基色原酮 第一節(jié) 概 述 第5頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 黃酮類(lèi)化合物是泛指兩個(gè)苯環(huán)（A-與B-環(huán)）通過(guò)

3、三碳鏈相互連接而成的一系列化合物。定義:6C-3C-6C第6頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五（二）黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi) 中央三碳鏈的氧化程度 B-環(huán)連接位置（2-或3-位） 三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀分為以下幾種類(lèi)型：根據(jù)其：第7頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 1黃酮類(lèi)（flavones） 以2-苯基色原酮為基本母核，C3無(wú)含氧取代基。 黃芩苷 第8頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五2黃酮醇類(lèi)（flavonol） 槲皮素R=H 蘆丁 R=蕓香糖基 以2-苯基色原酮為基本母核，C3有含氧取代基。 第9頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20

4、日，1點(diǎn)47分，星期五3二氫黃酮類(lèi)（flavanones） 二氫黃酮 橙皮苷 C2、C3上的雙鍵已被飽和第10頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五4二氫黃酮醇類(lèi)（flavanonols） 二氫槲皮素二氫黃酮醇第11頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五5異黃酮類(lèi)（isoflavones） 其B環(huán)連接在C3位上。 大豆素R=H 大豆苷R=glc 第12頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五具有雌性激素樣作用，可能與它們與己烯雌酚結(jié)構(gòu)類(lèi)似。第13頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五6查耳酮類(lèi)（chalcones） 兩苯環(huán)之

5、間的三碳鏈為開(kāi)鏈結(jié)構(gòu) 查耳酮 紅花苷第14頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 中藥紅花中的紅花苷為查耳酮類(lèi)。紅花在開(kāi)花初期時(shí)，花中主要成分為無(wú)色的新紅花苷（二氫黃酮類(lèi)）及微量紅花苷，故花冠是淡黃色；開(kāi)花中期花中主要成分為黃色的紅花苷，故花冠為深黃色；開(kāi)花后期則變成紅色的醌式紅花苷，故花冠為紅色。 第15頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五7花色素類(lèi) 又稱(chēng)花青素，是一類(lèi)水溶性色素，多以苷的形式存在。矢車(chē)菊素花色素第16頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五8黃烷-3-醇類(lèi) 又稱(chēng)兒茶素類(lèi)化合物（）兒茶素 黃烷醇 第17頁(yè)，共96頁(yè)，202

6、2年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五9橙酮類(lèi) 橙酮硫磺菊素第18頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五（三)組成黃酮苷的糖類(lèi) 單糖類(lèi)：D-葡萄糖、D-半乳糖、 D-木糖、L-鼠李糖、 L-阿拉伯糖、D-葡萄糖醛酸等。?；穷?lèi)： 2-乙酸葡萄糖等。三糖類(lèi)：龍膽三糖、槐三糖等。雙糖類(lèi)：槐糖、蕓香糖、龍膽二糖等。第19頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五第二節(jié) 黃酮類(lèi)的理化性質(zhì)及顯色反應(yīng) 一、性 狀 多為結(jié)晶性固體， 少數(shù)苷為無(wú)定形粉末。 1晶形 第20頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五3顏色 黃酮、黃酮醇及其苷類(lèi)灰黃黃色查耳酮黃橙黃色，二

7、氫黃酮、二氫黃酮醇不顯色異黃酮顯微黃色第21頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五黃酮類(lèi)化合物大多呈色的最主要原因是交叉共軛體系第22頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 黃酮（醇）分子中，尤其在 7-位及 4-位引入-OH及-OCH3等助色團(tuán)后，而使化合物的顏色加深。 花色素及其苷元的顏色隨pH不同而改變 一般顯紅（pH 7）紫（ pH8.5） 藍(lán)（pH8.5）等顏色第23頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五A.黃色 B.淡黃色 C. 紫色 D.紅色 E.無(wú)色二氫黃酮類(lèi)化合物的顏色多是（E）黃酮類(lèi)化合物的準(zhǔn)確定義為兩個(gè)苯環(huán)通過(guò)三碳鏈相

8、連的一類(lèi)化合物 B.-吡喃酮 C.2-苯基色原酮 D. 2-苯基苯并-吡喃酮 E. 2-苯基苯并-吡喃酮（A）第24頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五色原酮環(huán)C2、C3間為雙鍵，B環(huán)連接在C3位的黃酮類(lèi)化合物是A.黃酮醇 B.異黃酮C. 查耳酮 D. 二氫黃酮 E. 黃烷醇（B）第25頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 二、溶 解 性1苷與苷元 游離苷元 苷類(lèi) 2苷元 黃酮、黃酮醇、查耳酮等更難溶于水 平面性強(qiáng)的分子，因分子與分子間排列緊密，分子間引力較大。第26頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 二氫黃酮及二氫黃酮醇等溶解度稍

9、大 因系非平面性分子，故分子與分子間排列不緊密，分子間引力降低，有利于水分子進(jìn)入，溶解度稍大。R=H，二氫黃酮R=OH，二氫黃酮醇第27頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 花色苷元（花青素）類(lèi)水溶度較大 雖也為平面性結(jié)構(gòu)，但因以離子形式存在，具有鹽的通性，故親水性較強(qiáng)?；ㄇ嗨氐?8頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 3苷類(lèi) 苷元相同時(shí)，羥基糖越多，糖分子越多，水溶度越大。同一苷元，3-O-葡萄糖苷的水溶度7-O-葡萄糖苷第29頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 三、酸性與堿性 （一）酸性黃酮酚羥基酸性強(qiáng)弱順序依次為：7,4-二O

10、H7-或4-OH一般酚羥基5-OH應(yīng)用: 用于提取、分離及鑒定工作 第30頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五判斷下列黃酮類(lèi)化合物的酸性大小A.4-羥基黃酮 B.6-羥基黃酮 C.7, 4-二羥基黃酮 D.5-羥基黃酮 E.6, 4-二羥基黃酮CEABD第31頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五（二）堿性強(qiáng)酸下形成洋鹽 -吡喃環(huán)上的1-氧原子，因有未共用 的電子對(duì)，故表現(xiàn)微弱的堿性，可與強(qiáng)無(wú)機(jī)酸生成鹽，但生成的鹽極不穩(wěn)定，加水 后即可分解。第32頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （五）顯色反應(yīng) 1.還原反應(yīng) （1）鹽酸-鎂粉反應(yīng)（

11、HCl-Mg） （2）四氫硼鈉反應(yīng)（NaBH4） 2.金屬鹽類(lèi)試劑的絡(luò)合反應(yīng) （1）鋁鹽 （4）鎂鹽 （2）鉛鹽 （5）氯化鍶 （3）鋯鹽 3.硼酸顯色反應(yīng) 4.堿性試劑顯色反應(yīng)第33頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 四、呈色反應(yīng) （一）還原試驗(yàn)鑒別 1鹽酸-鎂粉（或鋅粉）反應(yīng)鑒別黃酮類(lèi)化合物最常用的顯色反應(yīng) 黃酮（醇） 橙紅紫紅色二氫黃酮（醇）查耳酮、橙酮、兒茶素（-）異黃酮類(lèi)除少數(shù)例外，也不顯色操作：樣品/乙醇中加入少許鎂粉振搖，滴加 幾滴濃HCl，即可顯色。第34頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （五）顯色反應(yīng) 1.還原反應(yīng) (1)鹽酸鎂粉

12、反應(yīng)（HCl-Mg）第35頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五排除干擾 ：先作空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)Mg粉2四氫硼鈉反應(yīng)區(qū)別二氫黃酮類(lèi)上述四種黃酮HCl無(wú)色紅色二氫黃酮類(lèi)/EtOH2NaBH4/MeOH 濃HCl 紅紫色其它黃酮類(lèi)化合物均不顯色。第36頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （五）顯色反應(yīng) 1.還原反應(yīng) （2）四氫硼鈉反應(yīng)（NaBH4）第37頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 ?？膳c金屬類(lèi)試劑反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物。 （1）鋁鹽 （2）鉛鹽 （3）鋯鹽 （4）鎂鹽 （5）氯化鍶黃酮類(lèi)化合物分子結(jié)構(gòu)中多具有下列結(jié)構(gòu)：C3-OH，C5

13、-OH，鄰二酚OH（+）第38頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五1. 鋁鹽 1AlCl3溶液，絡(luò)合物多為黃色，為顯色劑和比色測(cè)定。 C3-OH，C5-OH鄰二OH黃色黃酮類(lèi)化合物的基本定性鑒別第39頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五2. 鉛鹽 常用1醋酸鉛及堿式醋酸鉛水溶液，可生成沉淀。應(yīng)用：鑒定、提取及分離工作。1醋酸鉛：只能與鄰二酚羥基或兼有3-羥基、4酮基或5-羥基、4酮基的結(jié)構(gòu)反應(yīng)。堿式醋酸鉛：一般酚類(lèi)化合物均可用之沉淀第40頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五3ZrOCl2（鋯鹽）區(qū)別C3-OH與C5-OH可用不與鄰二酚

14、羥基反應(yīng) 5-OH黃酮類(lèi)3-OH2%枸櫞酸 黃（3-OH黃酮）褪色（5-OH黃酮）2% ZrOCl2黃甲醇第41頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五（3）鋯鹽 （ZrOCl2） （五）顯色反應(yīng) 2.金屬鹽類(lèi)試劑的絡(luò)合第42頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五3-OH，4-酮基絡(luò)合物穩(wěn)定性5OH，4-酮基絡(luò)合物原因：第43頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五4鎂鹽 鑒別兩類(lèi)二氫黃酮 二氫黃酮Mg(Ac)2二氫黃酮醇天藍(lán)色熒光噴灑黃酮、黃酮醇及異黃酮 顯黃色橙黃色褐色 第44頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五（4）鎂

15、鹽第45頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 5. 氯化鍶（SrCl2） 鑒別鄰二OH具鄰二酚OH黃酮類(lèi)/氨性甲醇 綠色棕色乃至黑色第46頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五（三）硼酸顯色反應(yīng)具5OH 的黃酮 2OH查耳酮硼酸亮黃色酸性液第47頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五第48頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五（四）堿性試劑顯色反應(yīng) 在日光及紫外光下，通過(guò)紙斑反應(yīng)，觀察樣品用堿性試劑處理后的顏色變化情況，對(duì)于鑒別黃酮類(lèi)化合物有一定意義。第49頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五堿性試劑

16、顯色反應(yīng)第50頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五五、三氯化鐵反應(yīng)：檢查酚類(lèi)化合物 多數(shù)黃酮類(lèi)化合物因分子中含有游離酚羥基，與三氯化鐵水溶液或醇溶液可產(chǎn)生正反應(yīng)，呈現(xiàn)顏色；當(dāng)含有氫鍵締合的酚羥基時(shí)，顏色更明顯。第51頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五思考題鑒別：黃酮類(lèi)和二氫黃酮類(lèi) 5-羥基黃酮和 3-羥基黃酮 3-羥基黃酮 和鄰二羥基黃酮 第52頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 第三節(jié) 黃酮類(lèi)化合物的提取與分離 一、提 取存在形式：花、葉、果等組織中苷木部堅(jiān)硬組織中游離苷元第53頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，

17、星期五花青素類(lèi)可加少量酸（如 0.l鹽酸） 黃酮苷元宜用極性較小的溶劑 （氯仿、乙醚、醋酸乙酯）等提取多糖苷類(lèi)沸水提取選擇溶劑： 黃酮苷，極性稍大的苷元 丙酮、 醋酸乙酯、乙醇、水、甲醇-水（1：1）、甲醇第54頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 四、黃酮類(lèi)化合物的提取分離（一）提取 1.溶劑法 2.堿提酸沉法 3.炭粉吸附法第55頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （一）提取 1.溶劑萃取法第56頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （一）提取 1.溶劑萃取法第57頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 一提取

18、方法 溶劑法 溶劑法 關(guān)鍵 溶劑的選擇 選擇依據(jù) 黃酮類(lèi)成分的存在狀態(tài)（游離、苷）及溶解性 溶劑的溶解性能 提取方法（煎煮法、滲漉法、回流法等）的選擇 溶劑 提取原理 游離黃酮 黃酮苷 備 注 乙醇 溶解范圍廣 + + （甲醇） 苷、苷元均可溶 （9095%） ( 60%） 甲醇毒性大沸水 多糖苷易于水 + 水溶性雜質(zhì)多 堿性水或 稀氫氧化鈉溶出能力強(qiáng) 堿性乙醇 酚羥基的酸性 + + 石灰水除雜質(zhì)效果好第58頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五利用黃酮類(lèi)化合物與混入的雜質(zhì)極性不同，選用不同溶劑進(jìn)行地萃取可達(dá)到精制純化目的。例如植物葉子的醇浸液，可用石油醚處理，以便除去葉綠素

19、、胡蘿卜素等脂溶性色素。而某些藥料水溶液則可加入多倍量濃醇，以沉淀除去蛋白質(zhì)、多糖類(lèi)等水溶性雜質(zhì)。第59頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 四、黃酮類(lèi)化合物的提取分離（一）提取 1.溶劑法 2.堿提酸沉法 3.炭粉吸附法第60頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （一）提取 2.堿提取酸沉淀法注意：加入的酸、堿度應(yīng)盡可能低。例如：蘆丁的提取第61頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五槐米中蘆丁的提取槐米（槐樹(shù)Sophora japonica L. 花蕾）加約6倍量水，煮沸，在攪拌下緩緩加入石灰乳至pH89，在此pH條件下微沸2030分

20、鐘，趁熱抽濾，殘?jiān)显偌?倍水煎1次，趁熱抽濾。合并濾液，在6070下，用濃鹽酸調(diào)至pH為5，攪勻，靜置24小時(shí)，抽濾。沉淀物水洗至中性，60干燥得蘆丁粗品，于水中重結(jié)晶，7080干燥得蘆丁純品。第62頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五2 堿水提酸沉淀法 適用于含酚羥基的化合物，如槐米中蘆丁的提取。 注意事項(xiàng)： 酸堿度不宜過(guò)大 鄰二酚羥基的保護(hù)：堿性條件下，鄰二酚羥基易被氧化，加硼砂保護(hù) 石灰乳的加入可除去果膠、粘液等水溶性酸性雜質(zhì)第63頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 四、黃酮類(lèi)化合物的提取分離（一）提取 1.溶劑法 2.堿提酸沉法 3.炭粉吸

21、附法第64頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （一）提取 4.炭粉吸附法主要適用于苷類(lèi)成分的精制。第65頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 二、分 離分離黃酮的依據(jù)：（1）極性大小不同吸附層析（2）分配比不同分配層析 （3）酸性不同pH梯度萃取法 （4）MW大小不同葡聚糖凝膠分子篩 molecular weight 或膜技術(shù)（5）官能團(tuán)絡(luò)合，沉淀等 第66頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五（一）柱色譜法1硅膠柱色譜 適于分離異黃酮、二氫黃酮（醇）及高度甲基化（或乙醚化）的黃酮（醇）類(lèi) 常用的分離方法有柱層析法、萃取法、鉛鹽法、H

22、PLC法、薄層層析法等。 常用的吸附劑或載體有硅膠、聚酰胺及纖維素粉等。也有用氧化鋁、氧化鎂及硅藻土等。第67頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五（三）柱色譜法 吸附原理 異黃酮、二氫黃酮（醇）、 氯仿-甲醇不同比例（105，活化） 高度甲基化或乙?；S酮（醇） 混合溶劑洗脫 （極性小）1硅膠柱色譜第68頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五（1）分離對(duì)象：酚、醌、硝基化合物2聚酰胺柱色譜（2）原 理：氫鍵吸附 第69頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 吸附強(qiáng)弱取決于 化合物與聚酰胺形成氫鍵

23、的能力。 聚酰胺對(duì)化合物的吸附力在水中有下列規(guī)律： 形成氫鍵的基團(tuán)越多，則吸附力越強(qiáng)；第70頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 易形成分子內(nèi)氫鍵，則吸附力減弱；C=O 鄰位-OH黃酮C=O對(duì)位（或間位）-OH黃酮 第71頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 芳香核、共軛雙鍵多者吸附力大；第72頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 以上介紹了聚酰胺對(duì)化合物吸附力的影響因素。 即： 形成氫鍵的基團(tuán)越多，則吸

24、附力越強(qiáng)； （Ar-OH、-COOH、醌基、硝基等） 易形成分子內(nèi)氫鍵，則吸附力減弱； （鄰二-OH、3-OH 4-酮基、5-OH 4-酮基等） 芳香核、共軛雙鍵多者吸附力大；第73頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 聚酰胺柱色譜在分離黃酮類(lèi)化合物時(shí) 有下述規(guī)律：第74頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五聚酰胺的雙重色譜性 以含水移動(dòng)相（如甲醇一水）作洗脫劑，苷比苷元先洗下來(lái)。 以有機(jī)溶劑作洗脫劑（如氯仿一甲醇）苷元比苷先洗脫下來(lái)。 第75頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 極性移動(dòng)相（

25、含水 溶劑系統(tǒng)）洗脫時(shí)有機(jī)溶劑（如氯仿一甲醇）洗脫時(shí) 色譜行為 類(lèi)似反相分配色譜 正相分配色譜 苷極性苷元 苷元極性苷 苷先洗脫 苷元易洗脫第76頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 洗脫規(guī)律：與吸附規(guī)律正好相反，即吸附能力越強(qiáng)， 越難洗脫（薄層Rf越?。?（2） “雙重色譜”原理主要用于解釋黃酮苷與苷元聚酰胺色譜現(xiàn)象 正相色譜 反相色譜聚酰胺：極性固定相（極性酰胺基團(tuán)） 非極性固定相（非極性脂肪鏈）洗脫劑：有機(jī)溶劑（氯仿-甲醇，極性小） 含水溶劑（甲醇-水，極性大） 先洗脫：游離黃酮（苷元，極性?。?苷（極性大）（柱色譜分離） Rf值： 苷元 苷 苷元 二氫黃酮醇 黃酮

26、黃酮醇 第78頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 苷元相同，出柱先后順序： 叁糖苷 雙糖苷 單糖苷 苷元 查爾酮往往比相應(yīng)的黃酮類(lèi)化合物難于洗脫 。第79頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （二）分離 1.柱色譜法（5）葡聚糖凝膠柱色譜葡聚糖凝膠（Sephadex gel） 用于黃酮類(lèi)化合物的分離，主要有兩種型號(hào)： Sephadex-G型Sephadex LH-20型（羥丙基葡聚糖凝膠）第80頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （二）分離 1.柱色譜法（5）葡聚糖凝膠柱色譜 作用機(jī)理：

27、 分離游離黃酮時(shí)吸附作用 （取決于游離Ar-OH的數(shù)目， Ar-OH少則先出柱） 分離黃酮苷是分子篩起主導(dǎo)作用 （分子量大的先出柱）第81頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （二）梯度pH萃取法酸性不同的黃酮苷元的分離酸性：7,4- OH7-或 4-OH 一般Ar-OH 5-OH5%NaHCO3 5%Na2CO2 0.2%NaOH 4%NaOH溶解的堿水第82頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五二.分離方法（一）溶劑萃取法 黃酮與雜質(zhì) 分離依據(jù)：成分之間 苷與苷元 之間的極性（分配系數(shù)K）差異 苷元與苷元 分離工藝： 原料的提取濃縮液（水溶液） 依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取 石油醚液 乙醚液 乙酸乙酯 水飽和正丁醇 母液（脂溶性雜質(zhì)） 回收 回收 減壓回收 （水溶性雜質(zhì)) 苷元 單糖苷 多糖苷 第83頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五 （二）分離 2.pH梯度萃取法 適用于酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元的分離。第84頁(yè)，共96頁(yè)，2022年，5月20日，1點(diǎn)47分，星期五第四節(jié)