新高考-一輪復(fù)習(xí)-人教版-差速離心法與密度梯度離心法-熒光標(biāo)記法與同位素標(biāo)記法-教案_第1頁(yè)
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1、一、差速離心法與密度梯度離心法1差速離心法(1)概念:差速離心主要是采取逐漸提高離心速率分離不同大小顆粒的方法。(2)原理:在分離細(xì)胞中的細(xì)胞器時(shí),將細(xì)胞膜破壞后,形成由各種細(xì)胞器和細(xì)胞中其他物質(zhì)組成的勻漿,將勻漿放入離心管中,采取逐漸提高離心速率的方法分離不同大小的細(xì)胞器。(3)具體操作:起始的離心速率較低,讓較大的顆粒沉降到管底,小的顆粒仍然懸浮在上清液中。收集沉淀,改用較高的離心速率離心上清液,將較小的顆粒沉降,以此類(lèi)推,達(dá)到分離不同大小顆粒的目的。2密度梯度離心法(1)概念:密度梯度離心法又稱(chēng)為區(qū)帶離心法,可以同時(shí)使樣品中幾個(gè)或全部組分分離,具有良好的分辨率。(2)原理:不同顆粒之間存

2、在沉降系數(shù)差時(shí),在一定離心力作用下,顆粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同區(qū)域上形成區(qū)帶的方法。(3)操作:離心時(shí)先將樣品溶液置于一個(gè)由梯度材料形成的密度梯度液體柱中,離心后被分離組分以區(qū)帶層分布于梯度柱中。3密度梯度離心法和差速離心法的區(qū)別(1)差速離心法是用不同強(qiáng)度的離心力使具有不同質(zhì)量的物質(zhì)分級(jí)分離,密度梯度離心中單一樣品組分的分離是借助于混合樣品穿過(guò)密度梯度層的沉降或上浮來(lái)達(dá)到的。(2)差速離心用兩個(gè)甚至更多的轉(zhuǎn)速,而密度梯度離心只用一個(gè)離心轉(zhuǎn)速。(3)差速離心是適用于混合樣品中各沉降系數(shù)差別較大組分,而密度梯度離心的物質(zhì)是密度有一定差異的。二、熒光標(biāo)記法與同位素標(biāo)記法1同位素標(biāo)記法(

3、1)同位素的概念:在同一元素中,質(zhì)子數(shù)相同、中子數(shù)不同的原子為同位素,如16O與18O,12C與14(2)同位素的性質(zhì):同位素的物理性質(zhì)可能有差異,但組成的化合物化學(xué)性質(zhì)相同。(3)同位素標(biāo)記法:用物理性質(zhì)特殊的同位素來(lái)標(biāo)記化學(xué)反應(yīng)中原子的去向,就是同位素標(biāo)記法。(4)同位素標(biāo)記法的應(yīng)用:同位素標(biāo)記可用于示蹤物質(zhì)的運(yùn)行和變化規(guī)律。通過(guò)追蹤同位素標(biāo)記的化合物,可以弄清楚化學(xué)反應(yīng)的詳細(xì)過(guò)程。(5)常用的同位素的類(lèi)型:生物學(xué)研究中常用的同位素有的具有放射性,如14C、32P、3H、35S等;有的不具有放射性,是穩(wěn)定同位素,如15N、18O2熒光標(biāo)記法 生物材料熒光標(biāo)記,就是一種生物材料可以發(fā)出熒光,

4、那么就可以用它與另外一種物質(zhì)結(jié)合在一起,因?yàn)樗梢园l(fā)出熒光,可以根據(jù)熒光出現(xiàn)的位置和亮度看另外一種物質(zhì)所在的位置或者那種物質(zhì)有多少。3同位素標(biāo)記技術(shù)與熒光標(biāo)記技術(shù)的區(qū)別同位素標(biāo)記技術(shù),標(biāo)記的是元素,可出現(xiàn)在不同化合物中,不會(huì)消失;熒光標(biāo)記技術(shù)一般標(biāo)記的是某種特定生物大分子,該分子分解則無(wú)熒光顯現(xiàn);兩者均可用相關(guān)儀器檢測(cè)追蹤。1觀(guān)察細(xì)胞器的亞顯微結(jié)構(gòu)使用的工具和分離細(xì)胞器常用的方法分別是()A光學(xué)顯微鏡、同位素示蹤法B電子顯微鏡、同位素示蹤法C放大鏡、差速離心法D電子顯微鏡、差速離心法解析:選D。光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察到的為顯微結(jié)構(gòu),同位素示蹤法用于標(biāo)記化學(xué)元素的來(lái)源去向,亞顯微結(jié)構(gòu)使用的工具是電子顯

5、微鏡,分離細(xì)胞器常用的方法為差速離心法,D正確。2下列經(jīng)典實(shí)驗(yàn)與所用方法的對(duì)應(yīng)關(guān)系,錯(cuò)誤的是()A小鼠細(xì)胞和人細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)熒光標(biāo)記法B探究光合作用釋放的O2的物質(zhì)來(lái)源同位素標(biāo)記法C研究種群數(shù)量的變化趨勢(shì)模型建構(gòu)法DDNA復(fù)制方式的證實(shí)差速離心法解析:選D。小鼠細(xì)胞和人細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用了熒光標(biāo)記法,A正確;魯賓和卡門(mén)用18O標(biāo)記水,證明光合作用所釋放的O2全部來(lái)自水,B正確;研究種群數(shù)量的變化趨勢(shì)應(yīng)用了模型建構(gòu)法,C正確;DNA的復(fù)制為半保留復(fù)制,該結(jié)論是通過(guò)密度梯度離心的方法得出的,D錯(cuò)誤。3檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因采用的方法是()A抗原抗體雜交法B蛋白質(zhì)鑒定法CmR

6、NA雜交法D放射性同位素標(biāo)記的探針解析:選D。檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因采用的方法是DNA分子雜交技術(shù)。即將轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNA提取出來(lái),在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作標(biāo)記,以此作為探針,使探針與基因組DNA雜交,如果顯現(xiàn)出雜交帶,就表明目的基因已插入染色體DNA中,故D項(xiàng)正確,A、B、C項(xiàng)錯(cuò)誤。4如圖是動(dòng)植物細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖。請(qǐng)據(jù)圖分析:(1)比較該圖A、B兩部分,在A(yíng)、B細(xì)胞中都存在,且含有核酸的細(xì)胞器有 (填標(biāo)號(hào));若在高倍顯微鏡下,用B作實(shí)驗(yàn)材料觀(guān)察是否適合? ,原因是 。(2)若B是低等植物細(xì)胞,其細(xì)胞質(zhì)中的細(xì)胞器除圖中所示外,還應(yīng)有 (

7、填名稱(chēng));若B是藍(lán)細(xì)菌細(xì)胞,其細(xì)胞質(zhì)中的細(xì)胞器則只有 。(3)在B細(xì)胞內(nèi)可以同時(shí)進(jìn)行光合作用和細(xì)胞呼吸而互不干擾,這種現(xiàn)象反映了生物膜系統(tǒng)的 功能。(4)科學(xué)家設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn):將一個(gè)變形蟲(chóng)的核取出移植到正常的去核變形蟲(chóng)中,經(jīng)過(guò)一個(gè)細(xì)胞分裂周期,觀(guān)察到分裂為兩個(gè)子代變形蟲(chóng),若想探究新形成的核膜中有沒(méi)有來(lái)自舊核膜的成分,可用什么方法追蹤? 。解析:(1)在A(yíng)、B細(xì)胞中都存在,且含有核酸的細(xì)胞器是核糖體和線(xiàn)粒體,即;由于葉綠體的綠色會(huì)影響到對(duì)線(xiàn)粒體的觀(guān)察,因此B不適合在高倍顯微鏡下用于觀(guān)察線(xiàn)粒體。(2)若B是低等植物細(xì)胞,其細(xì)胞中還應(yīng)該含有中心體;藍(lán)細(xì)菌是原核細(xì)胞,只有核糖體一種細(xì)胞器。(3)在B細(xì)胞內(nèi)可以同時(shí)進(jìn)行光合作用和細(xì)胞呼吸而互不干擾,這種現(xiàn)象反映了生物膜系統(tǒng)的將各種細(xì)胞器分隔開(kāi)、區(qū)域化,保證生命活動(dòng)高效有序進(jìn)行功能。(4)科學(xué)家設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn):將一個(gè)變形蟲(chóng)的核取出移植到正常的去核變形蟲(chóng)中,經(jīng)過(guò)一個(gè)細(xì)胞分裂周期,觀(guān)察到分裂為兩個(gè)子

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