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1、一、差速離心法與密度梯度離心法1差速離心法(1)概念:差速離心主要是采取逐漸提高離心速率分離不同大小顆粒的方法。(2)原理:在分離細胞中的細胞器時,將細胞膜破壞后,形成由各種細胞器和細胞中其他物質組成的勻漿,將勻漿放入離心管中,采取逐漸提高離心速率的方法分離不同大小的細胞器。(3)具體操作:起始的離心速率較低,讓較大的顆粒沉降到管底,小的顆粒仍然懸浮在上清液中。收集沉淀,改用較高的離心速率離心上清液,將較小的顆粒沉降,以此類推,達到分離不同大小顆粒的目的。2密度梯度離心法(1)概念:密度梯度離心法又稱為區(qū)帶離心法,可以同時使樣品中幾個或全部組分分離,具有良好的分辨率。(2)原理:不同顆粒之間存

2、在沉降系數(shù)差時,在一定離心力作用下,顆粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同區(qū)域上形成區(qū)帶的方法。(3)操作:離心時先將樣品溶液置于一個由梯度材料形成的密度梯度液體柱中,離心后被分離組分以區(qū)帶層分布于梯度柱中。3密度梯度離心法和差速離心法的區(qū)別(1)差速離心法是用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離,密度梯度離心中單一樣品組分的分離是借助于混合樣品穿過密度梯度層的沉降或上浮來達到的。(2)差速離心用兩個甚至更多的轉速,而密度梯度離心只用一個離心轉速。(3)差速離心是適用于混合樣品中各沉降系數(shù)差別較大組分,而密度梯度離心的物質是密度有一定差異的。二、熒光標記法與同位素標記法1同位素標記法(

3、1)同位素的概念:在同一元素中,質子數(shù)相同、中子數(shù)不同的原子為同位素,如16O與18O,12C與14(2)同位素的性質:同位素的物理性質可能有差異,但組成的化合物化學性質相同。(3)同位素標記法:用物理性質特殊的同位素來標記化學反應中原子的去向,就是同位素標記法。(4)同位素標記法的應用:同位素標記可用于示蹤物質的運行和變化規(guī)律。通過追蹤同位素標記的化合物,可以弄清楚化學反應的詳細過程。(5)常用的同位素的類型:生物學研究中常用的同位素有的具有放射性,如14C、32P、3H、35S等;有的不具有放射性,是穩(wěn)定同位素,如15N、18O2熒光標記法 生物材料熒光標記,就是一種生物材料可以發(fā)出熒光,

4、那么就可以用它與另外一種物質結合在一起,因為它可以發(fā)出熒光,可以根據(jù)熒光出現(xiàn)的位置和亮度看另外一種物質所在的位置或者那種物質有多少。3同位素標記技術與熒光標記技術的區(qū)別同位素標記技術,標記的是元素,可出現(xiàn)在不同化合物中,不會消失;熒光標記技術一般標記的是某種特定生物大分子,該分子分解則無熒光顯現(xiàn);兩者均可用相關儀器檢測追蹤。1觀察細胞器的亞顯微結構使用的工具和分離細胞器常用的方法分別是()A光學顯微鏡、同位素示蹤法B電子顯微鏡、同位素示蹤法C放大鏡、差速離心法D電子顯微鏡、差速離心法解析:選D。光學顯微鏡下觀察到的為顯微結構,同位素示蹤法用于標記化學元素的來源去向,亞顯微結構使用的工具是電子顯

5、微鏡,分離細胞器常用的方法為差速離心法,D正確。2下列經典實驗與所用方法的對應關系,錯誤的是()A小鼠細胞和人細胞融合實驗熒光標記法B探究光合作用釋放的O2的物質來源同位素標記法C研究種群數(shù)量的變化趨勢模型建構法DDNA復制方式的證實差速離心法解析:選D。小鼠細胞和人細胞融合實驗中應用了熒光標記法,A正確;魯賓和卡門用18O標記水,證明光合作用所釋放的O2全部來自水,B正確;研究種群數(shù)量的變化趨勢應用了模型建構法,C正確;DNA的復制為半保留復制,該結論是通過密度梯度離心的方法得出的,D錯誤。3檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因采用的方法是()A抗原抗體雜交法B蛋白質鑒定法CmR

6、NA雜交法D放射性同位素標記的探針解析:選D。檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因采用的方法是DNA分子雜交技術。即將轉基因生物的基因組DNA提取出來,在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作標記,以此作為探針,使探針與基因組DNA雜交,如果顯現(xiàn)出雜交帶,就表明目的基因已插入染色體DNA中,故D項正確,A、B、C項錯誤。4如圖是動植物細胞亞顯微結構模式圖。請據(jù)圖分析:(1)比較該圖A、B兩部分,在A、B細胞中都存在,且含有核酸的細胞器有 (填標號);若在高倍顯微鏡下,用B作實驗材料觀察是否適合? ,原因是 。(2)若B是低等植物細胞,其細胞質中的細胞器除圖中所示外,還應有 (

7、填名稱);若B是藍細菌細胞,其細胞質中的細胞器則只有 。(3)在B細胞內可以同時進行光合作用和細胞呼吸而互不干擾,這種現(xiàn)象反映了生物膜系統(tǒng)的 功能。(4)科學家設計了如下實驗:將一個變形蟲的核取出移植到正常的去核變形蟲中,經過一個細胞分裂周期,觀察到分裂為兩個子代變形蟲,若想探究新形成的核膜中有沒有來自舊核膜的成分,可用什么方法追蹤? 。解析:(1)在A、B細胞中都存在,且含有核酸的細胞器是核糖體和線粒體,即;由于葉綠體的綠色會影響到對線粒體的觀察,因此B不適合在高倍顯微鏡下用于觀察線粒體。(2)若B是低等植物細胞,其細胞中還應該含有中心體;藍細菌是原核細胞,只有核糖體一種細胞器。(3)在B細胞內可以同時進行光合作用和細胞呼吸而互不干擾,這種現(xiàn)象反映了生物膜系統(tǒng)的將各種細胞器分隔開、區(qū)域化,保證生命活動高效有序進行功能。(4)科學家設計了如下實驗:將一個變形蟲的核取出移植到正常的去核變形蟲中,經過一個細胞分裂周期,觀察到分裂為兩個子

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