消毒滅菌工作規(guī)范

1、文件名消毒滅菌工作規(guī)范電子文件編碼YFGL-02-006頁碼9-1一、消毒、滅菌方法的分類1.物理消毒滅菌法(1)熱力消毒滅菌：干熱法、濕熱法。(2)輻射法消毒滅菌：紫外線、閔湎(鈷60)。(3)清潔消毒。(4)其他消毒法。2.化學消毒法：使用化學消毒劑殺死和消除病原微生物的方法為化學消毒法。根據(jù)對微生物的殺滅作用分為三類：(1)高效化學消毒劑：能殺死包括細菌芽胞、真菌孢子在內(nèi)的各種微生物，又稱滅菌劑。如甲醛、戊二醛、過氧化氫等。(2)中效化學消毒劑：能殺死除菌芽細胞以外的各種微生物，如乙醇等。(3)低效化學消毒劑：只能殺滅細菌繁殖體和親脂類病毒，有的對真菌有一定效果，如新潔爾滅、來蘇爾、石炭

2、酸、洗必泰等。二、醫(yī)療器物分類及滅菌、消毒方法的選擇醫(yī)院內(nèi)使用的醫(yī)療器械及各種用具，按其導(dǎo)致病人院內(nèi)感染的危險度分為高危、中危、低危三類，根據(jù)醫(yī)療器物分類，選擇正確、合適的滅菌方法，這是預(yù)防醫(yī)源性感染的基本原則。1.高危物品的滅菌(1)高危物品的范圍損傷皮膚、粘膜、進入無菌器官或深部組織的醫(yī)療器物屬高危物品，如外科手術(shù)器械、注射器針頭、動靜脈置管、器官組織移植物、泌尿道插管、注射液體均屬這一類。文件名消毒滅菌工作規(guī)范電子文件編碼YFGL-02-006頁碼9-2(2)滅菌措施高危物品一旦被病原體污染，將會引起嚴重感染的可能，這一類物品必須采取嚴格的滅菌，首選壓力蒸氣滅菌，不能耐受高壓的可采用干熱

3、滅菌、環(huán)氧乙烷氣體及高效化學滅菌劑如2戊二醛、6過氧化氫等(但如有可能盡量避免使用)滅菌，滅菌后必須做滅菌效果監(jiān)測。2.中危物品的消毒(1)中危物品的范圍指接觸病人粘膜、皮膚的醫(yī)療物品，如呼吸機、麻醉機、口腔科器械、纖維鼻咽鏡、喉鏡(纖維、動態(tài))、支氣管鏡、胃鏡、陰道窺器、體溫計等，損傷引起感染幾率相對較低，但對免疫機能低下者，則導(dǎo)致感染危險度增加。(2)消毒措施此類物品必須采用高效消毒劑，其中金屬器械(部分口腔科器械及內(nèi)窺鏡活檢鉗、鑷子等)可耐高溫、高壓的采用壓力蒸氣消毒，或用2戊二醛浸泡消毒，體溫表用0.5過氧乙酸消毒。3.低危物品消毒(1)低危物品范圍指與完整皮膚接觸或接觸不密切的醫(yī)療器

4、物。如便盆、血壓計、聽診器、床頭柜、墻面、地板等。(2)消毒措施一般只需采用低效消毒劑或清潔劑擦洗、浸泡即可，只有明顯致病微生物污染的醫(yī)療器物才需高水平消毒，傳染病人及需嚴格保護性隔離的病人使用的器材均須經(jīng)過滅菌處理。文件名消毒滅菌工作規(guī)范電子文件編碼YFGL-02-006頁碼9-3三、醫(yī)院消毒效果監(jiān)測的人員須經(jīng)過專業(yè)培訓，掌握消毒知識，具備熟練的檢驗技能，選擇合適的采樣時間(消毒后、使用前)，遵循嚴格的無菌操作，以保證監(jiān)測質(zhì)量。四、監(jiān)測方法1.壓力蒸氣滅菌效果的監(jiān)測方法(1)工藝監(jiān)測法(程序檢測)。即按滅菌工藝參數(shù)進行檢查，判斷滅菌有否按規(guī)定條件進行。檢查設(shè)備完好情況：儀表(溫度、壓力)、自

5、控設(shè)備有無故障，管道、夾層有無漏氣。蒸氣質(zhì)量：不飽和蒸氣、超熱蒸氣影響滅菌質(zhì)量。檢查物品包裝規(guī)格、每鍋裝載容量。詳細記錄每鍋的鍋號、壓力、溫度、時間、滅菌物品、操作者姓名或編號。(2)化學監(jiān)測法化學指示膠帶：將化學指示膠帶粘貼于每一待滅菌物品包外，觀察其顏色的改變，以指示是否經(jīng)過滅菌處理?；瘜W指示管(卡)：將既能指示溫度，又能指示溫度持續(xù)時間的化學指示管(卡)放入每一待滅菌的物品中央(下排氣壓力蒸氣滅菌鍋用121化學指示卡、管，預(yù)真空壓力蒸氣滅菌鍋用132指示卡、管)。經(jīng)滅菌后，據(jù)其顏色及性狀的改變判斷是否達到滅菌條件。極少數(shù)基層醫(yī)院仍在使用已淘汰的硫磺、苯甲酸作為指示劑)。實踐驗證，將上述指

6、示劑與生物指示劑監(jiān)測作對照，發(fā)現(xiàn)硫磺、苯甲酸漏查率達20%25%。監(jiān)測所用化學指示劑須經(jīng)衛(wèi)生部批準，并在有效期內(nèi)使用，化學指文件名消毒滅菌工作規(guī)范電子文件編碼YFGL-02-006頁碼9-4示膠帶不能替代化學指示管(卡)用于包內(nèi)作滅菌監(jiān)測。(3)生物監(jiān)測法。該方法是最可靠的滅菌效果監(jiān)測手段，但等待檢驗結(jié)果時間較長，需2448小時。最新研制的快速生物指示劑，13小時可出檢驗結(jié)果，大大提高了滅菌生物監(jiān)測速度。指示菌株：指示菌株為嗜熱脂肪芽胞桿菌(ATCC7953株或SSIK31)，菌片或帶培養(yǎng)基的生物培養(yǎng)指示劑，含菌量5.01055.0106cfu片，放置在熱力較難達到的點，大型滅菌器至少5片，溫

7、度1210.5，D值(殺滅90的細菌所需時間)為1.31.9分鐘，殺滅時間(KT值)19分鐘，存活時間(ST值)為3.9分鐘。滅菌后菌片直接常規(guī)培養(yǎng)有無細菌生長，或放入溴甲酚葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中562培養(yǎng)2448小時，觀察如原紫紅色不變，表示滅菌成功，如變黃色則提示細菌繁殖，滅菌失敗?？焖偕镏甘緞?FLASH)：檢測嗜熱脂肪芽胞桿菌的活芽胞產(chǎn)生的酸性代謝產(chǎn)物(a-D葡酸苷酶)，使PH值改變，通過在培養(yǎng)基質(zhì)中加入一種特殊的熒光物質(zhì)，使之顯示熒光，如滅菌后不能測到熒光即認為滅菌成功。有1小時、3小時兩種快速生物指示劑。壓力蒸氣滅菌技術(shù)指標壓力蒸氣滅菌器壓力(MPacm2)溫度()滅菌時間(mi

8、n)下排氣0.07115400.10512130預(yù)真空0.21013446注意：A.對含液體、玻璃制品裝的各種制劑不宜采用預(yù)真空滅菌器，以防爆炸，損壞滅菌器，宜采用下排氣滅菌器，按其特性，在確保不受損害的情況下，選用適當溫度與時間。文件名消毒滅菌工作規(guī)范電子文件編碼YFGL-02-006頁碼9-5B.預(yù)真空滅菌器：每晨消毒前需做B-D試驗，建議用B-D試紙(圖)，將其置于標準試驗包中央。C.BD試驗標準包制作：由3件平紋長袖手術(shù)衣、4塊小手術(shù)巾、2塊中手術(shù)巾、1塊大手術(shù)巾、30塊1010cm28層紗布敷料，外用平紋細布包裹，體積為253030cm3，檢測冷空氣排除效果。米字型3M膠帶檢測，固膠

9、帶間隙大，常出現(xiàn)冷凝氣團漏檢。D.壓力蒸氣滅菌分為下排氣、預(yù)真空兩種方法，有人對二類滅菌器按常規(guī)滅菌方法滅菌，用指示劑檢測對比研究，發(fā)現(xiàn)下排氣滅菌器合格率58.8，預(yù)真空滅菌器100達標。其原因為：a.設(shè)備老化、漏氣、儀表(壓力、溫度)失靈。b.蒸氣質(zhì)量不佳，不飽和，含濕過多或超熱蒸氣等影響滅菌質(zhì)量。c.操作失誤：冷空氣未排盡，消毒時間不足，包裝過大，裝載不當。d.容器不合格(無孔鋁盒、搪瓷盒)。2.紫外線表面消毒效果監(jiān)測。紫外線屬電磁波輻射，消毒滅菌使用多為C波紫外線，波長范圍200275nm，殺菌最強波段250270nm，采用等級品石英玻璃管，有拋光鋁板反光罩，平均每10m2面積配置一支3

10、0W燈管或按1.5Wm3配置。消毒適宜溫度2040，相對濕度低于60，否則應(yīng)適當延長相對時間。一般消毒時間每天不少于45分鐘。消毒效果評價方法包括以下幾種：(1)物理學檢測法：采用紫外線強度測定儀(標定有效期內(nèi))測試，距燈管垂直距離1米，室溫2025，220V普通30W管型紫外線燈，253.7nm紫外線輻射強反應(yīng)70Wcm2，否則必須更換。表面消毒接受輻射劑量文件名消毒滅菌工作規(guī)范電子文件編碼YFGL-02-006頁碼9-6應(yīng)達到殺滅目標微生物所需，對大腸桿菌8099或ATCC259n，照射劑量應(yīng)達到2萬Wscm2，對枯草桿菌黑色變種芽胞(ATCC9372)應(yīng)達到100000Wscm2。照射劑

11、量計算公式：劑量(Wscm2)強度(Wcm2)時間(S) (2)化學監(jiān)測法：將化學指示卡置于燈管下1米，圖案面朝上，照1分鐘，涂層正中白色變紫紅，與周圍相應(yīng)色塊比較，即可讀知該燈管的參考照射強度，簡單、方便，但不夠精確。(3)生物檢測法：采用載體定量消毒試驗，開啟紫外線燈5分鐘，將8個染菌玻片置于滅菌器皿中，水平放于適當距離照射，于不同間隔時間各取2個染菌玻片，分別投入2個盛有5ml洗脫液(1吐溫80脂蛋白胨的生理鹽水)試管中振打80次，稀釋后取0.5ml作平板傾注，每個染菌玻片接種兩個，置37培養(yǎng)箱48小時后作活菌計數(shù)。(陽性對照不作照射，模擬上述處置辦法活菌計數(shù))指示菌殺滅率()（陽性對照

12、回收菌數(shù)-試驗組回收菌數(shù)）/陽性對照回收菌數(shù)100(殺菌率99.9，認為消毒合格)3.液體消毒劑消毒效果監(jiān)測(1)消毒劑濃度有效成分監(jiān)測試紙法：將消毒液濃度檢測專用試紙在被檢消毒液中浸一下取出，觀察其色澤改變，與標志不同深度的標準板對比，得到被檢消毒液的濃度()或含量(mgL)，方法簡便、快速。如3M公司的戊二醛濃度測試試紙、軍事醫(yī)學科學院研究成功的G-1型濃度試紙可用于戊二醛、過氧乙酸、過氧化氫、部分含氯制劑的有效含量測試。文件名消毒滅菌工作規(guī)范電子文件編碼YFGL-02-006頁碼9-7a.濃消毒液需稀釋后測定，計算公式如下：濃消毒劑濃度()（比色值稀釋液ml數(shù)）/采樣濃消毒液數(shù)量(ml)

13、100b.固體消毒劑有效濃度()，需先配制溶液，再按下列公式計算：固體消毒劑濃度()（比色值稀釋液ml數(shù)）/取固體消毒劑g數(shù)100滴定法：根據(jù)不同消毒劑，采用不同試劑，經(jīng)各自檢測的操作步驟，得出結(jié)果，根據(jù)公式計算出各種消毒液有效含量，如戊二醛有效濃度測定：精確量取戊二醛1ml，置三角燒瓶中，加入0.25M亞硫酸氫鈉溶液20ml，放置5分鐘后，用滴定管滴加0.1M碘溶液，觀察五色溶液轉(zhuǎn)為黃色，又由黃色變成無色，繼續(xù)滴至再次出現(xiàn)黃色，并保持3分鐘以上，記錄消耗的碘溶液的毫升數(shù)。同樣用蒸餾水代替樣品做空白對照，按以下公式計算戊二醛含量：戊二醛(WV)M(V2-V1)100.12/（2S1000）10

14、0式中：M碘液的摩爾濃度V1樣品消耗碘酒毫升數(shù)V2空白消耗碘液的毫升數(shù)100.12戊二醛分子量S樣品毫升數(shù)(2)消毒劑生物學檢測：殘留藥物的去除方法和中和試驗：評價化學殺菌劑對微生物的殺滅作用，在試驗中必須采取去除殘留殺菌劑的措施，以便闡明測試的化合物有無殺滅微生物作用，以及不同濃度和不同作用時間的殺滅效果。不采用有效的去除殘留殺菌劑的消毒試驗和文件名消毒滅菌工作規(guī)范電子文件編碼YFGL-02-006頁碼9-8滅菌試驗是失敗的試驗?；瘜W中和劑的要求是：a.可以終止殺菌劑對試驗微生物的作用；b.對試驗微生物無殺滅或抑制作用；c.對培養(yǎng)基無不良影響。采樣量及方法：在無菌條件下，用無菌吸管吸取1ml

15、被檢樣液，加入9ml稀釋液中混勻。對于醇類與酚類消毒劑稀釋液用普通營養(yǎng)肉湯即可；對于含氯消毒劑、含碘消毒劑、過氧化物消毒劑，需在肉湯中加入0.1硫代硫酸鈉；對于洗必泰、季胺鹽類消毒劑，需在肉湯中加入3(WV)吐溫80和0.3%卵磷脂；對于醛類消毒劑，需在肉湯中加入0.3甘氨酸；對于含有表面活性劑的各種復(fù)方消毒劑，需在肉湯中加入3(WV)吐溫80，以中和被檢樣液的殘效作用。細菌菌落數(shù)檢查：用無菌滴管各吸取0.5ml樣品分別接種于二塊普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)平板上，置于361、28溫度下各培養(yǎng)3天、7天，觀察并計算菌落生長數(shù)。每ml污染菌數(shù)(cfuml)（兩塊平板上菌落數(shù)稀釋倍數(shù)）/（0.52）使用中消毒液細菌菌落總數(shù)lOOcfuml，致病微生物不得檢出。無菌器械保留液，必須達到無菌要求。4.一次性醫(yī)療用品質(zhì)量監(jiān)測制度根據(jù)衛(wèi)生部消毒管理辦法、醫(yī)院感染管理規(guī)范規(guī)定：一次性使用醫(yī)療、衛(wèi)生用品進入醫(yī)療市場必須持有省級以上衛(wèi)生行政部門的“生產(chǎn)許可證”、“衛(wèi)生許可證”、及“推銷員證”。并規(guī)定，一次性醫(yī)用器具使用后必須經(jīng)毀形和無害化處理，嚴禁重復(fù)使用和回流市場。文件名消毒滅菌工作規(guī)范電子文件編碼YFGL-02-006頁碼9-9(1)采購驗核“三證”，對各廠家設(shè)備條件、生產(chǎn)環(huán)境、產(chǎn)品聲譽、技術(shù)力量等