離心機(jī)的原理和使用課件

1、離心機(jī)的原理和使用 實驗?zāi)康模毫私怆x心機(jī)的原理和使用方法實驗原理：借助離心機(jī)旋轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的離心力，使不同大小和不同密度的物質(zhì)分離用途：細(xì)胞的收集、細(xì)胞碎片和沉淀的分離等常用離心分離超速離心技術(shù)已成為分離、純化、鑒別和各種生物大分子的重要手段之一 9/25/20221離心機(jī)的原理和使用 實驗?zāi)康模毫私怆x心機(jī)的原理和使用方法9/9/25/202229/24/20222一 離心機(jī)的種類與用途速度：常速（低速） 30000r/min 轉(zhuǎn)子：固定角轉(zhuǎn)子（Eixed-Angle-Rotor）主要用于分離沉降速度有明顯差異的顆粒樣品甩平轉(zhuǎn)子（Siwing-Bucket-Rotor）主要用于樣品作密度梯度離心

2、9/25/20223一 離心機(jī)的種類與用途速度：9/24/20223常速離心機(jī)1 常速離心機(jī)8000r/min, R.C.F1*104g用途：分離細(xì)胞、細(xì)胞碎片、培養(yǎng)基殘渣及粗結(jié)晶等較大顆粒9/25/20224常速離心機(jī)1 常速離心機(jī)9/24/20224高速離心機(jī)2高速離心機(jī)1*104g2.5*104 r/min ，R.C.F 1*104g105g用途：分離各種沉淀物、細(xì)胞碎片及較大的細(xì)胞器等高速冷凍離心機(jī)9/25/20225高速離心機(jī)2高速離心機(jī)9/24/20225超速離心機(jī)2.5*104g8*104 r/min ，R.C.F 5*105g或更高結(jié)構(gòu)：離心管帽、冷凍裝置和溫控系統(tǒng)、真空系統(tǒng)、

3、安全保護(hù)系統(tǒng)、制動系統(tǒng)、指示儀表等。按用途分：制備用超速離心機(jī)：分離純化生物大分子、細(xì)胞器和病毒等分析用超速離心機(jī)：測定樣品純度（根據(jù)紫外吸收率或折光率等判斷）、沉降系數(shù)、相對分子量9/25/20226超速離心機(jī)2.5*104g8*104 r/min ，R.C沉降系數(shù)S：單位離心力作用下粒子的沉降速度，以Svedberg表示，簡稱S。1S=1*10-13s9/25/20227沉降系數(shù)S：單位離心力作用下粒子的沉降速度，以Svedber沉降系數(shù)S與分子量M有對應(yīng)關(guān)系，測出離心機(jī)轉(zhuǎn)速、離心時間和粒子移動距離，可求出S，再得到M9/25/20228沉降系數(shù)S與分子量M有對應(yīng)關(guān)系，測出離心機(jī)轉(zhuǎn)速、離心

4、時間和粒二 離心方法的選擇對于常速和高速離心機(jī)，由于所分離的顆粒大小和密度相差較大，只要選擇好離心速度和時間，就能達(dá)到分離效果。超速離心的離心方法：差速離心、密度梯度離心和等密度梯度離心 9/25/20229二 離心方法的選擇對于常速和高速離心機(jī)，由于所分離的顆粒大小1 差速離心采用不同的離心速度和離心時間，使沉降速度不同的顆粒分批分離的方法。主要用于分離大小和密度差異較大的顆粒。9/25/2022101 差速離心9/24/2022102 密度梯度離心樣品在密度梯度介質(zhì)中進(jìn)行離心，使沉降系數(shù)比較接近的物質(zhì)得以分離的一種區(qū)帶分離方法。密度梯度系統(tǒng)：梯度介質(zhì)有足夠大的溶解度，不與分離組分反應(yīng)，不會

5、引起分離組分的凝集、變性或失活。常用介質(zhì)：蔗糖、甘油等。樣品鋪在密度梯度溶液表面，離心后形成若干條界面清楚的不連續(xù)區(qū)帶。9/25/2022112 密度梯度離心樣品在密度梯度介質(zhì)中進(jìn)行離心，使沉降系數(shù)比較9/25/2022129/24/2022123 等密度離心當(dāng)欲分離的不同顆粒的密度范圍在離心介質(zhì)的密度梯度范圍內(nèi)時，不同浮力密度的物質(zhì)顆粒在離心力作用下一直移動到與各自浮力密度相等的位置（等密度點），形成區(qū)帶。等密度離心常用的介質(zhì)：銫鹽，如CsCl，Cs2SO4，CsBr9/25/2022133 等密度離心當(dāng)欲分離的不同顆粒的密度范圍在離心介質(zhì)的密度梯三 離心條件的確定離心力（轉(zhuǎn)速）離心時間溫度pH值 真空9/25/202214三 離心條件的確定離心力（轉(zhuǎn)速）9/24/202214思考題1 名詞解釋 離心分離 相對離心力 沉降系數(shù)2 按離心機(jī)轉(zhuǎn)速分，離心機(jī)有哪些種類？各