灰黃霉素超聲波提取工藝研究

1、灰黃霉素超聲波提取工藝研究【摘要】目的探究超聲波提取灰黃霉素的優(yōu)化工藝條件。要領(lǐng)用紫外分光光度法(UV)測定灰黃霉素的含量。以灰黃霉素的提取率為評價指標(biāo)，在單一影響因素觀察的底子上，接納正交實(shí)行確定超聲波提取灰黃霉素的優(yōu)化工藝條件。效果超聲波提取灰黃霉素的優(yōu)化工藝條件為：10倍量的丙酮為提取溶劑，功率300，單次輻射時間3s，間歇時間5s，提取時間40in，灰黃霉素提取率為85.58%。通過驗(yàn)證明行表白，本實(shí)行所得工藝條件為優(yōu)化工藝條件。結(jié)論本實(shí)行所得工藝條件可行，具有必然的現(xiàn)實(shí)應(yīng)用代價?！娟P(guān)鍵詞】灰黃霉素超聲提取正交實(shí)行Studyntheultrasniextratinpressfgrise

2、fulvinKEYRDSGrisefulvin;Ultrasniextratin;rthgnalexperient灰黃霉素(grisefulvin)是1939年從灰黃青霉(Peniilliugrisefulvin)造就液中得到的一種含氯代謝產(chǎn)物，1958年開始用于臨床。1960年中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院抗生素研究所從我領(lǐng)泥土中得到灰黃霉素的消費(fèi)菌，并研究試制樂成灰黃霉素1?；尹S霉素黑白多烯類抗真菌抗生素，已普及用于治療皮膚及角質(zhì)層的真菌熏染。對赤色發(fā)癬菌、斷發(fā)癬菌、硫毛發(fā)癬菌、小孢子菌和絮狀表皮菌等有按捺作用1。臨床用于頭癬、迭瓦癬、皮膚癬及手(足，甲)癬等體表真菌熏染，特殊仇家癬的療效明顯，海內(nèi)治愈率

3、在90%以上2?；尹S霉素是存在于菌絲體內(nèi)部的抗生素。如今產(chǎn)業(yè)上接納溶劑一連浸泡干菌體的提取要領(lǐng)，溶劑大多為丙酮1，3，4。思量到通例提取所需時間較長，提取率較低，溶劑用量較大，本研究探究接納超聲波技能提取灰黃霉素的工藝，使用超聲波的空化5作用、熱效應(yīng)、機(jī)器作用粉碎菌體細(xì)胞壁，使溶劑易于滲出至細(xì)胞內(nèi)，有用身分更多的轉(zhuǎn)移到溶劑中，到達(dá)收縮提取時間，進(jìn)步提取率的目的68。1儀器與質(zhì)料1.1儀器1.2質(zhì)料2實(shí)行要領(lǐng)2.1尺度曲線的制備細(xì)密稱取灰黃霉素比較品25g，25l丙酮溶液定容，配制尺度溶液(初始濃度1.0g/l)。細(xì)密量取尺度溶液2l于25l容量瓶，用95%乙醇定容。取丙酮2l置于25l容量瓶中

4、，95%乙醇定容，作為空缺溶液。紫外光譜200400n全波長掃描，在326n處有最大汲取峰。A=14.782+0.0017r=0.99982.2灰黃霉素含量測定稱取灰黃霉素菌體(含水5%)1.0g置于250l燒瓶中，參加丙酮50l，磁力攪拌回流提取三次，每次1h。測得菌體中灰黃霉素含量為30.67%。2.3灰黃霉素超聲波提取影響因素觀察(1)超聲提取溶劑文獻(xiàn)報道3，9灰黃霉素易溶于二甲基甲酰胺、二氯乙烷(以上溶解度約為10%12%/v)，可溶于丙酮、氯仿、乙醇(在丙酮中溶解度為5.0%，氯仿為4.4%，乙醇為1.66%)，不溶于水和石油醚。思量到二甲基甲酰胺代價較高，二氯乙烷毒性較大，本實(shí)行重

5、要拔取丙酮、氯仿及95%乙醇為超聲提取溶劑。稱取灰黃霉素菌體5g，共3份，別離用丙酮、氯仿、95%乙醇50l溶解，超聲條件設(shè)定為：功率400，單次輻射時間3s，提取時間40in，室溫下舉行提取，別離測定灰黃霉素溶液的吸光度，提取率別離為83.71%、78.69%和28.95%。由于丙酮對灰黃霉素的提取率較高，因此本實(shí)行拔取丙酮作為超聲提取溶劑。(2)溶劑用量稱取灰黃霉素菌體5g，共6份，別離用4、8、10、12、16、20倍量丙酮溶解，超聲波條件穩(wěn)定。別離測定灰黃霉素溶液的吸光度，盤算提取率。溶劑4倍量時，提取液中結(jié)晶析出太多，故舍去該實(shí)行點(diǎn)。如Fig.1所示，在溶劑倍量為16時有最大提取率。

6、思量到用較少的溶劑得到較高的提取率，本實(shí)行確定溶劑倍量為10。(3)超聲波提取功率稱取灰黃霉素菌體5g，共3份，別離用丙酮50l溶解，超聲波條件設(shè)定為：功率別離為200、300和400，單次輻射時間3s，提取時間40in，室溫下舉行提齲別離測定灰黃霉素溶液的吸光度，盤算提取率。如Fig.2所示，在超聲功率為300時有最大提取率。(4)超聲波提取時間稱取灰黃霉素菌體5g，用丙酮50l溶解，超聲波條件設(shè)定為：功率400，單次輻射時間3s，間歇時間5s，室溫下舉行提齲從提取時間20in開始，每10in取樣一次，測定灰黃霉素溶液的吸光度，盤算提取率。如Fig.3所示，在提取時間為40in時有最大提取率

7、。(5)超聲波單次輻射時間稱取灰黃霉素菌體5g，共4份，別離用50l丙酮溶解，超聲波提取條件為：功率400，提取時間40in，間歇時間5s，單次輻射時間別離為1、3、5和8s，室溫下舉行提齲別離測定灰黃霉素溶液的吸光度，盤算提取率。如Fig.4所示，單次輻射時間5s以后，曲線趨于平緩。2.4正交實(shí)行在單一影響因素觀察的底子上，確定以10倍量丙酮為提取溶劑，拔取超聲波功率、單次輻射時間、提取時間作為觀察指標(biāo)，接納四因素三程度L9(34)的正交試驗(yàn)對灰黃霉素的超聲波提取工藝舉行優(yōu)化。由正交表，按照K值確定灰黃霉素超聲波提取的優(yōu)化工藝條件為：功率300，單次輻射時間3s，提取時間40in。按照R值斷

8、定，各因素對實(shí)行效果的影響巨細(xì)挨次為BA。2.5優(yōu)化工藝的驗(yàn)證明行按優(yōu)化工藝條件重復(fù)3次實(shí)行舉行驗(yàn)證，效果灰黃霉素的收率均勻值為85.58%，表白實(shí)行所確定的工藝條件為優(yōu)化工藝條件。2.6超聲波循環(huán)提取實(shí)行超聲波循環(huán)提取器中參加丙酮2200l(10倍)，開啟攪拌轉(zhuǎn)子，調(diào)治轉(zhuǎn)速為1000r/in。遲鈍參加菌體220g，待料液完全循環(huán)后，開啟超聲波發(fā)射器，按正交實(shí)行確定的優(yōu)化工藝條件(功率300，單次輻射時間3s，提取時間40in)舉行實(shí)行，所得提取率為87.65%，略高于驗(yàn)證明行所得提取率。循環(huán)放大實(shí)行表白該優(yōu)化工藝條件可應(yīng)用于灰黃霉素提齲3結(jié)論本研究通過正交方案實(shí)行，對灰黃霉素的超聲波提取工藝條件舉行了優(yōu)