沙苑子黃酮提取工藝研究

1、沙苑子黃酮提取工藝研究【摘要】目的優(yōu)選沙苑子黃酮提取工藝。方法采用堿水、堿醇和乙醇提取，考察提取溶媒對沙苑子總黃酮提取的影響；采用石油醚脫脂后乙醇提取和直接乙醇提取，比擬脫脂對沙苑子總黃酮提取的影響；并采用正交設(shè)計法優(yōu)選乙醇提取工藝。結(jié)果以乙醇為溶媒，提取所得總黃酮含量最高；脫脂對提取有較大影響，脫脂后乙醇提取所得沙苑子總黃酮含量較高；乙醇提取最正確工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)80%，料液比為116，提取時間為1.5h，沙苑子粒度為40目。結(jié)論優(yōu)選出的提取工藝具有操作簡便，可行性等特點(diǎn)。【關(guān)鍵詞】沙苑子；提取工藝；黃酮；正交實驗沙苑子為豆科植物扁莖黃芪AstragalusplanatusR.Br的種

2、子，具有溫補(bǔ)肝腎、固精、縮尿、益肝明目的功能；其性溫而不燥和平柔潤，補(bǔ)而不峻，平補(bǔ)肝腎，陰陽并補(bǔ)，唐代曾為上貢茶品。沙苑子主要含有黃酮類、三萜類、有機(jī)酸類、氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、甾醇、多糖及鐵、鋅、錳、銅等微量元素。藥理研究說明16，沙苑子具有保肝，降脂，降壓，抑制血小板聚集，改變血液流變學(xué)指標(biāo)，抗炎，增加非特異性特異性免疫功能、抗肝纖維化和抗腫瘤等作用，沙苑子黃酮為主要有效成分。該藥平安有效，是治療肝病很有前途的中藥。為進(jìn)一步開發(fā)利用沙苑子，本文以沙苑子苷A為對照品，比擬了不同溶媒對沙苑子總黃酮提取的影響，脫脂對提取的影響，并采取正交設(shè)計法優(yōu)選了沙苑子總黃酮乙醇提取的工藝條件，為更好地開發(fā)和

3、利用沙苑子提供實驗根據(jù)。2方法和結(jié)果2.1總黃酮含量測定72.1.1藥材總黃酮含量測定供試品溶液制備：準(zhǔn)確稱取沙苑子粉末(過20目篩)2.0g,置索氏提取器中,石油醚120l回流提取4h,藥渣揮干溶劑,置100l圓底燒瓶中,準(zhǔn)確參加80%乙醇60l,稱定重量,于水浴85加熱回流1.5h,取出放冷稱重,補(bǔ)充80%乙醇至原重量,混勻,放置,汲取上清液20l備用。對照品溶液制備：精細(xì)稱取沙苑子苷A對照品適量，加50%乙醇制成每毫升含沙苑子苷A100g的溶液，即得。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：準(zhǔn)確汲取沙苑子苷A對照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0l分別置25l容量瓶中，50%乙醇定容，于266

4、n處測定吸收度。以沙苑子苷A對照品溶液濃度為縱坐標(biāo)，吸收度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為:=29.5688A-0.8436，r=0.9999(n=6)。結(jié)果說明，沙苑子苷A在424g/l范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。含量測定：精細(xì)汲取供試品溶液0.5l,置25l容量瓶中,50%乙醇定容后,于266n處測定吸收度，以沙苑子苷A(28H3216)計算總黃酮含量。結(jié)果：本實驗用沙苑子藥材的總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.56。2.1.2提取物總黃酮含量測定取沙苑子提取物80.0g，精細(xì)稱定，置100l容量瓶中,加50%乙醇適量，微熱使溶解,冷卻后，定容至刻度。準(zhǔn)確汲取溶液5l，置50l容量瓶中，50%乙醇定容至刻度，濾

5、過，取續(xù)濾液，于266n處測定吸收度，以沙苑子苷A(28H3216)計算總黃酮含量和提取率。2.2提取溶媒的選擇2.2.1堿水提取準(zhǔn)確稱取沙苑子粗粉150.0g(40目),置圓底燒瓶中,參加2%NaH水溶液回流提取2次，2000l/次，1h，濾過，合并濾液，調(diào)pH值至中性后,減壓回收溶劑,真空枯燥。測定總黃酮含量和提取率。結(jié)果見表1。表1不同溶媒對沙苑子黃酮提取的影響略2.2.2堿醇提取將溶媒改為2%NaH乙醇溶液(乙醇含量50%),同法回流提取,測定總黃酮含量和提取率。結(jié)果見表1。2.2.3乙醇提取將溶媒改為80%乙醇溶液，同法回流提取,測定總黃酮含量和提取率。結(jié)果見表1。從表1可以看出，8

6、0%乙醇提取所得提取物沙苑子總黃酮含量和總黃酮量均最高，而堿水和堿醇提取不僅總黃酮含量和總黃酮量較低，而且干浸膏均為黑褐色硬膏狀。實驗結(jié)果說明，以乙醇為溶媒提取為佳。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.3脫脂對提取的影響2.3.1脫脂準(zhǔn)確稱取沙苑子粗粉150.0g(40目),置圓底燒瓶中，參加1500l石油醚回流脫脂1h后,濾過，濾渣揮干石油醚，參加80%乙醇回流提取2次，2000l/次，1h，濾過，合并濾液，減壓回收溶劑，真空枯燥。測定總黃酮含量和提取率。2.3.2不脫脂按上法，直接參加80%乙醇回流提取2次，測定總黃酮含量和提取率。結(jié)果見表2。表2脫脂對沙苑子總黃酮的影響略從表2可以看出，脫脂對沙苑

7、子總黃酮提取有較大影響，石油醚脫脂后乙醇提取，提取沙苑子總黃酮百分含量和總黃酮量較高。結(jié)果說明，沙苑子總黃酮的提取應(yīng)采用脫脂過程。2.4乙醇提取工藝優(yōu)選2.4.1方法根據(jù)預(yù)試驗結(jié)果確定沙苑子黃酮醇提工藝中考察的因素，以及各因素所取的程度范圍，選定L934正交表，對乙醇濃度A，料液比B，提取時間和粒度D4個因素進(jìn)展考察。見表34。準(zhǔn)確稱取沙苑子粗粉150.0g60目),置圓底燒瓶中,參加1500l石油醚回流脫脂1h，濾過，藥渣揮去石油醚后,按正交實驗表34的條件回流提取2次，濾過，合并濾液，減壓回收溶劑，真空枯燥。測定總黃酮含量和總黃酮量。2.4.2結(jié)果與分析結(jié)果見表34。表3因素程度，表4沙苑

8、子總黃酮提取實驗及結(jié)果分析略。根據(jù)表4，由極差分析結(jié)果得知，對總黃酮量：各因素的主次分別為DBA，最正確條件為:A3B32D3；對總黃酮含量：各因素的主次分別為ADB,最正確條件為A3B32D3。綜合這兩個指標(biāo)，并考慮到藥材粒度太小過濾困難等因素，得出的最正確條件為A3B32D2，即乙醇體積分?jǐn)?shù)為80%，料液比為116，提取時間為1.5h，粒度為40目，對總黃酮含量影響最小的是因素，把因素作為誤差相處理，以總黃酮量為指標(biāo)進(jìn)展方差分析。結(jié)果見表5。表5方差分析結(jié)果略2.4.3驗證性實驗根據(jù)上述結(jié)果所得乙醇提取最正確工藝條件：A3B32D3，即乙醇濃度為80%,料液比為116，提取時間為1.5h，

9、粒度為40目。為了驗證工藝的穩(wěn)定性，對最正確工藝條件進(jìn)展了3次驗證實驗。結(jié)果見表6。表6重復(fù)性實驗結(jié)果略由表6可知，所得乙醇提取最正確工藝條件的重復(fù)性較好，平均總黃酮含量為5.13，提取率為96.1，優(yōu)化工藝較為理想。3討論本研究結(jié)果，脫脂對沙苑子總黃酮的提取有較大影響，脫脂后沙苑子黃酮提取率明顯進(jìn)步；對提取溶媒的考察，結(jié)果乙醇提取優(yōu)于堿水和堿醇提??；通過正交實驗優(yōu)選的乙醇提取的工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)為80%，料液比為116，提取時間為1.5h，沙苑子粒度為40目，優(yōu)選工藝具有較好的重復(fù)性。黃酮類成分大多具有酚羥基，因此可用堿性水如碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、氫氧化鈣水溶液等或堿性稀醇50的乙醇浸出。本實驗結(jié)果堿水及堿醇提取法效率較低，可能與沙苑子黃酮的構(gòu)造有關(guān)