高效液相色譜法測(cè)定抗病毒膠囊中連翹苷的含量

1、高效液相色譜法測(cè)定抗病毒膠囊中連翹苷的含量【關(guān)鍵詞】抗病毒膠囊；,連翹苷；,高效液相色譜法摘要：目的建立抗病毒膠囊中連翹苷的含量測(cè)定方法。方法采用高效液相色譜法測(cè)定該藥中連翹苷的含量，色譜條件：DS18柱4.6250,5為色譜柱,乙腈水2872為流動(dòng)相；流速：0.8l/in；檢測(cè)波長：230n。結(jié)果連翹苷濃度范圍在4.9649.6g/l之間峰面積與濃度線性關(guān)系良好，r=0.9999,平均回收率為97.7%，RSD為1.77%;結(jié)論該方法準(zhǔn)確、可靠、專屬性強(qiáng)，可用于抗病毒膠囊的質(zhì)量控制。關(guān)鍵詞：抗病毒膠囊；連翹苷；高效液相色譜法DeterinatinfFrsythininAnti-virusap

2、sulebyHPLAbstrat：bjetiveTestablishaethdfrthedeterinatinffrsythininAnti-virusapsule.ethdsFrsythininFrutusFrsythiaeasdeterinedbyHPL.Thehratgraphinditinsere：DS-18(2504.6,5asanalytilun,aetnitrile-ater(2872)asbilephase,thedetetinavelengthassetat230nandtheflrateas0.8l/in.ResultsThelinearityffrsythininther

3、angef4.9649.6g/lasgd,r=0.9999,theaveragereveryas97.7%,RSD=1.77%.nlusinTheethdisaurate,reliableandspeifiandanbeusedfrthequalityntrlfAnti-virusapsule.Keyrds：Antivirusapsule；Frsythin；HPL抗病毒片處方來源于中華人民共和國國家藥品監(jiān)視管理局標(biāo)準(zhǔn)，由板藍(lán)根、石膏、蘆根、生地黃、郁金、知母、石菖蒲、廣藿香、連翹等九味中藥組成。板藍(lán)根、連翹清熱涼血，驅(qū)除外感邪毒；石膏、知母、蘆根、生地和郁金清肺熱，涼血熱兼解散肌表之熱；廣藿香

4、疏散表邪；石菖蒲主咳逆止氣。九味組方治內(nèi)熱感冒、上呼吸道感染等癥，可謂合理得當(dāng)。本品由抗病毒片改制而成，對(duì)上呼吸道感染、支氣管炎、流行性出血性結(jié)膜炎、腮腺炎有療效，對(duì)病毒性流感療效尤為顯著。為控制抗病毒膠囊的質(zhì)量，本文采用高效液相色譜法測(cè)定抗病毒膠囊中連翹苷的含量，結(jié)果說明：該方法準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可有效控制抗病毒膠囊的質(zhì)量。1儀器與試藥1.1儀器島津L10ATvp高效液相色譜儀，SPD10Avp紫外檢測(cè)器，島津18柱4.6250，梅特勒電子天平上海梅特勒托利多。1.2試劑與藥品連翹苷對(duì)照品中國藥品生物制品檢定所，抗病毒膠囊(安徽省華康醫(yī)藥科技開發(fā)公司提供)，甲醇、乙腈(色譜純),重蒸水自制。2

5、方法與結(jié)果2.1色譜條件固定相：DS18柱4.6250；流動(dòng)相：乙腈水2872；流速：0.8l/in；檢測(cè)波長：230n；柱溫：25；進(jìn)樣量：20l。2.2對(duì)照品溶液的制備精細(xì)稱取經(jīng)105枯燥至恒重的連翹苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每毫升中含連翹苷約15g的溶液，搖勻，即得。2.3供試品溶液的制備取本品精細(xì)稱定，置具塞錐形瓶中，精細(xì)參加甲醇25l，密塞，稱定重量，超聲功率35040in，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，于4中放置過夜，濾過，精細(xì)量取續(xù)濾液10l，蒸至近干，加硅膠0.5g拌勻，加于硅膠柱200300目，3g，內(nèi)徑11.5上，用氯仿甲醇40160l洗脫，棄去洗脫液，繼用氯

6、仿甲醇151洗脫，搜集10l洗脫液棄去，繼搜集70l洗脫液，濃縮至干，殘?jiān)眉状既芙廪D(zhuǎn)移至10l量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即得。2.4線性關(guān)系考察精細(xì)稱取連翹苷對(duì)照品9.92g，置100l量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精細(xì)量取0.5，1.0，2.0，3.0，5.0l分別至10l量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，按色譜條件進(jìn)展含量測(cè)定，以峰面積S對(duì)濃度作二元一次線性回歸，得回歸方程S=92697+19063(r=0.9999)。結(jié)果見表1。表1線性關(guān)系考察略結(jié)果說明：連翹苷濃度范圍在4.9649.6g/l之間峰面積與濃度線性關(guān)系良好。2.5精細(xì)度實(shí)驗(yàn)精細(xì)汲取上述供試品溶液2

7、0l，連續(xù)進(jìn)樣6次，按上述色譜條件測(cè)定，連翹苷峰面積積分值分別為1014021.1，1060035.9，1046227.8，1038431.3，1050578.5，1042934.9，RSD為1.67%，精細(xì)度良好。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.6溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精細(xì)汲取上述供試品溶液20l，分別在0，3，6，9，24，48h進(jìn)樣20l，按上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算得平均RSD=0.74%，即連翹苷在48h以內(nèi)穩(wěn)定。2.7重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)取同一批抗病毒膠囊樣品，按上述供試品溶液的制備的方法制備6份，按上述色譜條件測(cè)定。結(jié)果RSD=1.77%，重現(xiàn)性較好。2.8回收率實(shí)驗(yàn)采用加樣回收法，精細(xì)稱取連翹苷對(duì)照品，用

8、甲醇配成193.5g/l的對(duì)照品溶液，分別精細(xì)量取1l參加到五份含量的同一批樣品溶液中，按供試品溶液的制備方法制得供試品溶液，照上述色譜條件進(jìn)展測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果見表2。表2回收率試驗(yàn)結(jié)果略2.9樣品含量測(cè)定取不同批號(hào)的樣品，分別按供試品溶液的制備方法制備，按上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算出樣品中連翹苷的含量。結(jié)果見表3。表3樣品中連翹苷的含量測(cè)定略*為每丸中含量3討論3.1在該實(shí)驗(yàn)中，曾選用乙腈甲醇水體系作為流動(dòng)相，但柱壓太大，對(duì)色譜柱有損傷，后改用乙腈-水體系為流動(dòng)相，通過調(diào)節(jié)不同比例的流動(dòng)相實(shí)驗(yàn)，結(jié)果說明，以乙腈水2872為流動(dòng)相別離度好R1.5,而且保存時(shí)間適宜。3.2本法中供試品溶液制備的試驗(yàn)研究，原樣品采用甲醇超聲，濾過直接進(jìn)高效液相，結(jié)果雜質(zhì)含量測(cè)定有影響，別離度不合要求，將樣品進(jìn)展前處理再進(jìn)入高效液相，即將樣品過柱子，現(xiàn)對(duì)吸附劑進(jìn)展了考察，用氧化鋁作為吸附劑時(shí)極性大的成分多對(duì)主峰有影響，且峰出完時(shí)間長；用硅膠作為吸附劑，對(duì)其規(guī)格、用量及洗脫劑均作了考察，確定硅膠的粒度及用量；又對(duì)洗脫劑的選擇、配比及用量作了試驗(yàn)研究，經(jīng)過大量的挑選試驗(yàn)，以氯仿-甲醇體系不同比例洗脫，用氯仿-甲醇401洗脫，繼用氯仿甲醇151洗脫去除雜質(zhì)多且將測(cè)定成分連翹苷洗脫完全，能到達(dá)峰出完時(shí)間