HPLC法測定益氣溫陽膠囊中阿魏酸的含量

1、PAGE PAGE - 4 -HPLC法測定益氣溫陽膠囊中阿魏酸的含量【關(guān)鍵詞】益氣溫陽膠囊摘要:目的建立HPLC測定益氣溫陽膠囊中的有效成分其他阿魏酸含量的方法。方法采用色譜柱為C18柱，流動(dòng)相：甲醇水冰醋酸（體積比25750.35），檢測波長為320nm。結(jié)果阿魏酸在0.020.20g范圍內(nèi)與峰面積呈線性關(guān)系，膠囊中阿魏酸的平均回收率為98.8%，RSD=0.97%。結(jié)論方法簡便、穩(wěn)定，能有效地控制該制劑的質(zhì)量。關(guān)鍵詞:益氣溫陽膠囊；高效液相色譜法；阿魏酸Abstract:ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationofferulicacid

2、inYiqiwenyangcapsules.MethodSampleswereextractedwithethylacetate,andseparatedonaC18column（5m，250mm4.6mm）usingmethanol-wateraceticacid(2575035)asmobilephase.Thedetectionwavelengthwassetat320nm.ResultsThecalibrationcurveofferulicacidwaslinearintherangeof0.020.20g.Theaveragerecoverywas98.8%withRSD0.97%

3、(n=5).ConclusionsThemethodcouldbeusedforthequalitycontrolofYiqiwenyangcapsules.Keywords:Yiqiwenyangcapsules;HPLC;ferulicacid益氣溫陽膠囊系由黃芪、硫磺、當(dāng)歸、川芎等十三味藥材加工提取制得的制劑，具有溫陽益氣，活血通絡(luò)的功效。由于現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中沒有建立含量測定方法，不利于制劑的質(zhì)量控制。通過處方分析，我們選擇了測定方中臣藥當(dāng)歸、川芎的有效成分阿魏酸作為質(zhì)量控制的指標(biāo)。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，阿魏酸具有明顯擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈血管、增加冠脈流量、抑制ADP誘導(dǎo)的血小板凝聚、增強(qiáng)細(xì)胞吞噬功能的作用

4、1。本文采用HPLC法測定了阿魏酸的含量，為控制該產(chǎn)品的質(zhì)量提供了依據(jù)。1儀器與試藥SHIMADZUSPD10A型高效液相色譜儀；HW-2000工作站。阿魏酸對(duì)照品由中國藥品生物制品檢定所提供（07739910）；實(shí)驗(yàn)用水為重蒸餾水；甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純；益氣溫陽膠囊（廣州市花城制藥廠提供，批號(hào)20220501、20220803、20220902）。2方法與結(jié)果2.1色譜條件色譜柱為HypersilBDSC18柱（5m，250mm4.6mm），流動(dòng)相為甲醇水冰醋酸（25750.35），流速：1.0mL/min，檢測波長為320nm；柱溫為室溫。2.2溶液的制備2.2.1對(duì)照品溶液的

5、制備取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加甲醇配制成每1mL含阿魏酸0.01mg的溶液，即得。2.2.2供試品溶液的制備取本品30粒，傾出內(nèi)容物，研細(xì)，取6g，精密稱定，置索氏提取器中，加乙酸乙酯50mL，水浴中避光加熱回流至浸出溶液無色，放冷，取出，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至20mL棕色瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。2.3系統(tǒng)適用性試驗(yàn)22.3.1陰性對(duì)照液的制備按處方量稱取不含當(dāng)歸、川芎的各味藥材，按工藝制成制劑,再按供試品溶液制備方法配制陰性對(duì)照液。2.3.2系統(tǒng)適用性在上述色譜條件下，分別取阿魏酸對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照液各10L測定，供試品阿魏酸與相鄰雜質(zhì)

6、分離度大于1.5，陰性對(duì)照液在與阿魏酸對(duì)照品相同保留時(shí)間處未見色譜峰，認(rèn)為不干擾測定。理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。見圖1。2.4線性關(guān)系考察精密吸取對(duì)照品溶液（0.01mg/mL）2.0、5.0、100、15.0、20.0L，按上述色譜條件測定峰面積，以峰面積積分值（A）為縱坐標(biāo)，阿魏酸量（m）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明，峰面積與阿魏酸量呈良好線性關(guān)系，回歸方程為A=4595350m+2129.27，r=0.9998，阿魏酸量在0.020.20g范圍內(nèi)與峰面積呈線性關(guān)系。2.5精密度試驗(yàn)精密吸取同一對(duì)照品溶液（0.01mg/mL），依法連續(xù)進(jìn)樣6次，每次10L，峰面積結(jié)果分別為

7、466820、473352、467155、463808、471712、472915，平均值為469294，其RSD為0.83%。2.6穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一批樣品（批號(hào)：20220902）避光放置，在0、1、2、3、6、12h分別進(jìn)樣10L，依法測定含量，結(jié)果RSD為1.12%，表明供試品在避光放置條件下12h內(nèi)較穩(wěn)定。2.7回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，精密稱取已知含量的益氣溫陽膠囊，分別加入一定量的阿魏酸對(duì)照品溶液（0.01mg/mL），按樣品測定方法測定含量，結(jié)果見表1。表1阿魏酸回收率測定結(jié)果（略）2.8樣品含量測定取對(duì)照品溶液（0.01mg/mL）和供試品溶液，用045m微孔濾膜過濾,各進(jìn)樣1

8、0L，讀取峰面積,按外標(biāo)法計(jì)算含量，結(jié)果見表2。表23批益氣溫陽膠囊阿魏酸含量（略）3討論3.1有關(guān)制劑中阿魏酸的高效液相測定方法已有多篇文獻(xiàn)3-4報(bào)道。曾參照文獻(xiàn)4的方法，采用甲醇冰酸酸(體積比4555)為流動(dòng)相，結(jié)果供試品中阿魏酸與相鄰雜質(zhì)分離度小于1.5。本文將流動(dòng)相組成調(diào)整為甲醇水冰醋酸（體積比25750.35），供試品中阿魏酸與相鄰雜質(zhì)分離度大于1.5，阿魏酸峰峰形較好。3.2阿魏酸對(duì)光不穩(wěn)定，配成溶液后及樣品的制備過程中注意避光，否則會(huì)引起阿魏酸的含量降低。3.3用高效液相色譜法測定阿魏酸的含量，使用簡單的體系就達(dá)到分離測定的目的，方法穩(wěn)定，結(jié)果準(zhǔn)確，可作為本品的質(zhì)量控制方法。參考文獻(xiàn):1鄭虎占.中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用（第一卷）M.北京：學(xué)苑出版社，1997：910.2國家藥典