探析氣郁證動(dòng)物模型研究進(jìn)展

1、探析氣郁證動(dòng)物模型研究進(jìn)展絡(luò)氣郁滯是指絡(luò)氣輸布運(yùn)行障礙，升降出入之氣機(jī)失常。由于循行于體內(nèi)臟腑的臟腑隸下之絡(luò)已成為所在區(qū)域臟腑功能的重要組成局部，經(jīng)絡(luò)之氣也隨其分布區(qū)域而表達(dá)為所屬臟腑的功能。百病皆生于氣，生于郁，臨床上多由于情志抑郁不舒引起絡(luò)氣郁滯，絡(luò)氣郁滯主要是指肝主疏泄功能失調(diào)?；诮j(luò)氣郁滯、絡(luò)氣虛滯引起的絡(luò)脈自穩(wěn)狀態(tài)功能異常與血管內(nèi)皮功能障礙具有內(nèi)在一致性，均為脈絡(luò)-血管系統(tǒng)病的始動(dòng)因素并貫穿病變?nèi)^(guò)程，成為運(yùn)用絡(luò)病理論研究血管病變的切入點(diǎn)2。為了建立絡(luò)氣郁滯內(nèi)皮功能障礙病證結(jié)合模型，研究中絡(luò)氣郁滯的模型多為肝郁證的模型，現(xiàn)將近年來(lái)有關(guān)肝郁證的動(dòng)物模型研究作一綜述。1造模方法藥物造模法

2、艾葉煎液注射法現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，其成分艾葉油有擬腎上腺的作用，臨床口服大量艾葉可引起中毒性肝炎，還對(duì)中樞神經(jīng)有興奮作用。湖南醫(yī)學(xué)院選用的小鼠，腹腔注射艾葉煎液，用藥量為，用藥即出現(xiàn)肝郁病癥：小鼠活動(dòng)增加，興奮撕打，不易抓到3。腎上腺素皮下注射法和嵐等4用注射腎上腺素模擬氣滯復(fù)制急慢性血淤證模型，大劑量腎上腺素皮下注射，只體重次，小劑量腎上腺素皮下注射，只體重，次，連續(xù)。一次大劑量注射模擬機(jī)體暴怒狀態(tài)，屢次小劑量注射模擬較長(zhǎng)時(shí)間情感不舒，均造成了大鼠血黏度增高，紅細(xì)胞變形才能降低，易于聚集。情志刺激造模法頸部帶枷法模具法毛海燕、劉蓮等選用遠(yuǎn)交系雌性大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，用塊2的鋁片制成近似枷鎖型模具

3、，套在大鼠的脖子上，模具影響了大鼠日間理毛、撓癢等活動(dòng)，使其郁怒而不得發(fā)。在不影響其正常進(jìn)食、飲水的情況下，從而引起大鼠情志變化，帶枷大鼠在造模初期表現(xiàn)為煩躁不安，抓咬模具，碰撞籠具，易激惹，但無(wú)自立、嘶叫等過(guò)激反響。后，模型大鼠反響和行為緩慢，精神萎靡不振，皮毛枯黃，眼睛瞇小，有眼眵，甚至目赤，糞便干、少、小，倦怠食少，與臨床肝郁證的表現(xiàn)根本相符。夾尾激怒法須惠仁用夾尾刺激引發(fā)大鼠打斗的方法造模。他將雄性遠(yuǎn)交系大鼠，體重，只同置于一籠中，用以紗布包裹尖端的止血鉗夾住其中的一只大鼠的尾巴，令其與其他大鼠打斗，進(jìn)而激怒全籠大鼠，每次刺激，刺激次，刺激次。大鼠被激怒后身體豎立對(duì)峙，前肢離地，互相嘶

4、咬，隨刺激次數(shù)的增加，大鼠撕咬加劇，連續(xù)刺激后大鼠間劇烈撕打減弱，飲水和吃食也明顯減少，甚至不思飲食，多呈困倦狀態(tài)，毛發(fā)變暗、枯黃，體重下降。捆綁法呂志平8，9喬明琦10采用雄性大鼠，體重為，高蕭楓11用大鼠，用繃帶細(xì)帶束縛其四肢，使之行走困難，并裝入飼養(yǎng)籠內(nèi)，定時(shí)觀察并記錄大鼠狀態(tài)。初期大鼠表現(xiàn)為打斗、撕咬、尖叫等情緒過(guò)激行為。隨著造模時(shí)間的推移，上述過(guò)激行為逐漸減少，精神萎靡，胡須下垂，叫聲尖細(xì)，貼邊，扎堆及飲食、飲水量減少，伴大便稀溏，反響遲鈍，毛色失去光澤，明顯消瘦。趙益業(yè)等12、豐成功13用安康雄性昆明小鼠，體重，制作肝郁模型，用醫(yī)用膠布束縛小鼠四肢限制其自由活動(dòng)，放入自由活動(dòng)小鼠在

5、造?；\內(nèi)加強(qiáng)致郁，連續(xù)捆綁，肝郁證模型小鼠可見(jiàn)皮毛枯干，眼睛瞇小，有眼眵，糞便干，倦怠食少，爪甲紫暗，尾巴棕紅且有鱗片，活動(dòng)減少，叫聲變細(xì)，反響遲鈍。束縛盒熊振芳等14用束縛盒，用硬塑料特制的束縛筒。該筒呈管狀，長(zhǎng)約，筒口外徑，內(nèi)徑，筒內(nèi)前端置一直徑小于筒的內(nèi)徑，并可以前后調(diào)節(jié)的無(wú)底、圓嘴的玻璃瓶，其瓶口為通氣口，后端為開(kāi)關(guān)閘門(mén)。將大鼠單籠飼養(yǎng)，束縛于特制的束縛盒，共周，模型大鼠的蔗糖水?dāng)z取量減少。嚴(yán)燦等15選用大鼠，將造模大鼠置于自制的束縛制動(dòng)筒內(nèi)由大鼠固定儀改制而成，通過(guò)挪動(dòng)插片而逐步縮小大鼠的活動(dòng)空間，調(diào)節(jié)到其不產(chǎn)生強(qiáng)烈對(duì)抗的緊張程度，束縛制動(dòng)次，每日開(kāi)場(chǎng)時(shí)間及束縛制動(dòng)時(shí)間不同，第天為，

6、其后增加次，連續(xù)周。造模大鼠在制動(dòng)期間禁食、禁水。不可預(yù)知的慢性應(yīng)激刺激方法金光亮等以不可預(yù)知的慢性應(yīng)激刺激方法制作模型，刺激方法包括：斷食、水，各次；冰水游泳，共次；熱環(huán)境，共次；次程度震蕩，共次；夾尾刺激，共次；明暗顛倒，共次。上述刺激種，隨機(jī)安排，使動(dòng)物不能預(yù)知次日的刺激，刺激時(shí)間共周。金光亮7認(rèn)為用此方法比擬符合肝郁證的臨床發(fā)病學(xué)特征，蔗糖水消耗量減少可模擬肝郁證的核心病癥。藥物合情志刺激造模法此法結(jié)合前兩種方法，目前采用的多為夾尾加腎上腺素注射法。楊冬花8采用大鼠，雌雄各半，將大鼠用海綿鉗以海綿和膠布包裹的止血鉗，型號(hào)：彎夾住大鼠的尾巴尖部，激怒大鼠，使之與其它大鼠保持相斗狀態(tài)注意使

7、大鼠保持互相爭(zhēng)斗狀態(tài)后即可松開(kāi)海綿鉗，防止長(zhǎng)時(shí)間鉗夾損傷尾巴，并且海綿鉗夾尾巴產(chǎn)生的壓強(qiáng)以?shī)A住尾巴不脫落為宜，刺激，同時(shí)每周給予每只大鼠腎上腺素注射液皮下注射，造模時(shí)間為。鉗夾鼠尾后，大鼠前肢離地，與鄰近大鼠互相對(duì)峙，或追逐撕咬視野中所見(jiàn)大鼠或鼠籠，呼吸喘氣、豎耳、拱背、張牙舞爪，毛發(fā)豎起、小便失禁，毛發(fā)浸濕；后，飲水、攝食減少，毛發(fā)枯糙、尿黃、神情萎頓但易激怒尖叫、對(duì)峙；周后，活動(dòng)逐漸減少，精神萎靡不振，蜷臥，嗜睡，反響遲鈍。2肝郁證模型在循環(huán)、神經(jīng)內(nèi)分泌、免疫系統(tǒng)的病理改變陳家旭9認(rèn)為，肝郁證是在抑郁、焦慮、悲哀等負(fù)性情緒心理應(yīng)激狀態(tài)下，以高級(jí)神經(jīng)中樞調(diào)節(jié)機(jī)制紊亂為前提，神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫

8、、循環(huán)、消化、感覺(jué)、運(yùn)動(dòng)等多個(gè)系統(tǒng)的某些病理改變、病證表現(xiàn)的有機(jī)概括。肝郁證模型血液循環(huán)系統(tǒng)的病理改變血液的運(yùn)行和津液的輸布代謝有賴(lài)于氣的升降出入運(yùn)動(dòng)，氣機(jī)的郁結(jié)會(huì)導(dǎo)致血行的障礙。實(shí)驗(yàn)研究說(shuō)明，肝郁可以導(dǎo)致機(jī)體微循環(huán)障礙和血液流變學(xué)的改變。須惠仁7用夾尾法造肝郁模型中發(fā)現(xiàn)：肝郁大鼠的血小板的含量要比對(duì)照組高，全血粘度、血漿比粘度明顯高于對(duì)照組，復(fù)鈣時(shí)間明顯延長(zhǎng)，其相應(yīng)的粘度上升率、紅細(xì)胞比容那么明顯地減少，血沉顯著快于對(duì)照組。呂志平8，9用束縛法造模，測(cè)定大鼠模型血漿酮前列腺素明顯降低，血栓素明顯升高，比值明顯下降。李松濱等20用夾尾加腎上腺素的方法造模，發(fā)現(xiàn)模型組與生理鹽水組比擬，全血粘度與

9、血漿粘度及紅細(xì)胞聚集指數(shù)均明顯增高，說(shuō)明血液粘滯性增大，血液流動(dòng)性差。和嵐等4用注射腎上腺素模擬氣滯復(fù)制急慢性血淤證模型，注射后，紅細(xì)胞通過(guò)核孔濾膜時(shí)間延長(zhǎng)，變形才能下降，低切度率下全血粘度增加，紅細(xì)胞變形指數(shù)、聚集指數(shù)均增高。肝郁模型神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的病理改變毛海燕等5用頸部帶枷法造模，觀察周和周的肝郁證大鼠中樞神經(jīng)遞質(zhì)變化，發(fā)現(xiàn)造模周組各腦區(qū)無(wú)顯著變化，含量減少，造模周組各腦區(qū)的含量比正常對(duì)照組明顯增多，含量顯著升高，經(jīng)用逍遙散治療后降至正常。高蕭楓11用慢性束縛應(yīng)激造模，發(fā)現(xiàn)模型大鼠腦內(nèi)與的含量均明顯降低，應(yīng)用逍遙散和柴胡治療后、含量明顯升高。熊振芳等14用束縛筒造模，發(fā)現(xiàn)模型大鼠增高。朱

10、清靜等21用束縛應(yīng)激方法建立肝郁證動(dòng)物模型，發(fā)現(xiàn)應(yīng)激時(shí)，血漿和下丘腦內(nèi)啡肽均明顯升高，而柴胡疏肝散和腎氣丸均能降低應(yīng)激導(dǎo)致的大鼠血漿和下丘腦的程度。王希浩22、黃保民23用加尾刺激激怒法制作模型，發(fā)現(xiàn)大鼠血清，程度下降，程度升高。陳家旭24用慢性束縛應(yīng)激法，連續(xù)束縛后大鼠大腦皮層的開(kāi)場(chǎng)下降，至模型組與正常對(duì)照組相比均有顯著下降；連續(xù)束縛，后大鼠海馬區(qū)的與正常對(duì)照組相比積分光密度明顯降低。嚴(yán)燦等25用慢性束縛應(yīng)激法，發(fā)現(xiàn)模型大鼠血漿皮質(zhì)酮、以及下丘腦促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素含量升高，說(shuō)明下丘腦垂體腎上腺軸興奮性升高。嚴(yán)燦等26還發(fā)現(xiàn)應(yīng)激大鼠血漿和下丘腦，含量明顯降低，血漿，含量明顯升高，而下丘腦

11、含量無(wú)明顯變化。血漿，及下丘腦均明顯降低。加味四逆散可以升高應(yīng)激大鼠下丘腦和血漿中，含量，并能降低血槳中，含量，升高低丘腦和血漿以及血漿。腎氣丸、四君子湯及人參總皂苷雖然對(duì)有些指標(biāo)有影響，但對(duì)心理應(yīng)激的整體調(diào)節(jié)作用不如加味四逆散。3肝郁模型免疫系統(tǒng)的病理改變劉蓮6用頸部帶枷鎖法造模，在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)肝氣郁結(jié)證大鼠免疫器官重量明顯減輕，細(xì)胞亞群比例失衡；白細(xì)胞介素程度降低，血漿皮質(zhì)酮程度明顯升高。保神開(kāi)郁沖劑可以恢復(fù)肝郁所致大鼠的免疫抑制狀態(tài)，對(duì)維護(hù)神經(jīng)內(nèi)分泌免疫三大系統(tǒng)的功能穩(wěn)定起著重要作用。趙益業(yè)等12發(fā)現(xiàn)肝郁造模組的動(dòng)物捆綁法造模脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、溶血素程度低于正常組，白細(xì)胞介素產(chǎn)生才能明顯受

12、抑制。豐成功13用慢性束縛法制作肝郁證小鼠，發(fā)現(xiàn)、細(xì)胞數(shù)量減少，比值降低，血白細(xì)胞及淋巴細(xì)胞數(shù)量減少。楊冬花等18亦采用夾尾加腎上腺素注射法造模，在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)肝氣郁結(jié)證模型大鼠表達(dá)明顯降低，表達(dá)那么明顯升高，細(xì)胞因子處于失衡狀態(tài)，細(xì)胞向偏移。陳松27、許輝等28用夾尾加腎上腺素法制作肝郁證模型與脾虛證模型大鼠比擬，的程度無(wú)明顯變化，的程度均降低，但肝郁證降低得更為明顯，柴胡疏肝散對(duì)的程度沒(méi)有影響，四君子湯對(duì)肝郁證與脾虛證的程度均有一定的升高作用，肝郁證細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著升高，而柴胡疏肝散可使之恢復(fù)正常，四君子湯對(duì)其無(wú)明顯影響，脾虛證細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著降低，四君子湯可使之恢復(fù)正常，而柴胡疏肝散對(duì)其那么無(wú)

13、明顯影響，肝郁證細(xì)胞轉(zhuǎn)化率也表現(xiàn)為升高的趨勢(shì)，柴胡疏肝散和四君子湯均能使之恢復(fù)正常。3結(jié)語(yǔ)綜上所述，近年來(lái)肝郁證模型的研究獲得了較快的開(kāi)展，目前仍存在著幾個(gè)問(wèn)題需要解決：目前尚無(wú)肝郁證動(dòng)物模型的統(tǒng)一制作及斷定標(biāo)準(zhǔn)，不利于科學(xué)研究。中醫(yī)的證是疾病的病因、病位及病邪性質(zhì)的概括。藥物造模如艾葉油、腎上腺素等均造成了本質(zhì)性肝臟的急慢性損傷，有學(xué)者認(rèn)為不符合肝郁證的中醫(yī)理論，然而是否與臨床上藥物中毒或藥物的副作用或飲食、居注工作環(huán)境的污染所造成的氣機(jī)郁滯相似。隨著競(jìng)爭(zhēng)的劇烈，臨床上多為情志不暢郁而不發(fā)造成氣機(jī)郁滯，怒那么氣上與久怒成郁和情志不暢，郁而不發(fā)之間有什么不同。幾種造模方法所造成的動(dòng)物模型在神經(jīng)

14、、內(nèi)分泌、免疫、循環(huán)等系統(tǒng)方面是否存在差異。肝郁證已經(jīng)引起大鼠的循環(huán)、神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫等系統(tǒng)方面的改變，是否引起血管內(nèi)皮功能的改變，值得討論。肝郁證模型與氣滯血淤、肝郁脾虛證等模型存在哪些差異，特異性的指標(biāo)是什么。這些問(wèn)題均有待進(jìn)一步深化研究。筆者認(rèn)為，中醫(yī)證候動(dòng)物模型的研制方法應(yīng)以中醫(yī)的理論為指導(dǎo)，既要符合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)病因素的特點(diǎn)，又要符合臨床自然發(fā)病的過(guò)程。應(yīng)采取多種方法造模，研究各種造模方法之間的不同。制定出統(tǒng)一的肝郁證模型的造模方法和斷定標(biāo)準(zhǔn)，促進(jìn)科研程度的進(jìn)步。研究肝郁證與氣滯血淤證、肝郁脾虛等證之間的區(qū)別，利用藥物來(lái)反證模型的制作，為建立病證結(jié)合模型打下基?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1吳以嶺絡(luò)病

15、學(xué)北京：中國(guó)科技出版社，：2吳以嶺脈絡(luò)血管系統(tǒng)病新概念及其治療討論疑難病雜志，：3鄒移海，黃韌海，連至誠(chéng)，等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)廣州：暨南大學(xué)出版社，：4和嵐，蔣文躍，毛騰敏注射腎上腺素模擬氣滯復(fù)制急慢性血淤證模型初探中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，：5毛海燕，葉林，葉向榮肝郁證大鼠中樞神經(jīng)遞質(zhì)變化的觀察福建中醫(yī)藥，：6劉蓮保神開(kāi)郁沖劑對(duì)肝郁證大鼠免疫機(jī)制的影響遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，：7須惠仁肝郁證的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究激怒刺激對(duì)大白鼠血液流變學(xué)的影響中醫(yī)雜志，：8呂志平，劉承才肝郁大鼠血漿、程度與肝微循環(huán)變化及逍遙散作用中國(guó)微循環(huán)，：9呂志平，劉承才肝郁致淤機(jī)理討論中醫(yī)雜志，：10喬明琦，張惠云，陳雨振，等肝郁證動(dòng)物模型研究

16、的理論考慮中國(guó)中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，11高蕭楓，秦雪梅，王明軍逍遙散和柴胡對(duì)慢性束縛應(yīng)激肝郁模型大鼠腦內(nèi)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的影響中藥藥理與臨床，：12趙益業(yè)，劉承才肝郁證的免疫學(xué)討論山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，：13豐成功，張學(xué)智，劉庚信肝郁證免疫學(xué)變化及丹梔逍遙保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究中國(guó)中醫(yī)根底醫(yī)學(xué)雜志，：14熊振芳，朱清靜柴胡疏肝散對(duì)慢性束縛應(yīng)激性肝郁證大鼠的影響中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，：15嚴(yán)燦，徐志偉，李艷，等調(diào)肝健脾補(bǔ)腎方藥對(duì)反復(fù)心理應(yīng)激大鼠的中樞調(diào)節(jié)作用廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，3，202：14316金光亮，南睿，郭霞珍慢性應(yīng)激肝郁證大鼠模型的建立北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，：17金光亮，王勝蘭關(guān)于建立肝郁證動(dòng)物模型的考慮山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，：18楊冬花，李家邦，鄭愛(ài)華，等肝氣郁結(jié)證模型大鼠Th1/Th2細(xì)胞因子變化及柴胡疏肝散的干預(yù)作用湖南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，3，235：19陳家旭，楊維益神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)研究概況及其與中醫(yī)肝臟關(guān)系的討論北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，：20李松濱，楊麗珍，李寶龍.調(diào)肝湯對(duì)肝郁模型大鼠血液流變學(xué)的影響黑龍江中醫(yī)藥，2022，402：21朱清靜，羅欣拉，熊振芳柴胡疏肝散對(duì)慢性束縛應(yīng)激性肝郁證大下丘腦-垂體-腎上腺軸的調(diào)節(jié)作用湖北中醫(yī)雜志，2022，2511：22王希浩，黃保民，張關(guān)亭激怒雌性大鼠內(nèi)分泌的改變及中藥的干預(yù)作用四川中醫(yī)，：23黃保民，王希浩，苗利軍，等中藥舒肝調(diào)經(jīng)方