研究生分生基因調(diào)控

1、第一講基因表達(dá)與基因表達(dá)調(diào)控呂社民, Ph.DTel: 82657764Email: 12DNA replication 3第一節(jié) 基因表達(dá)的過程和特點(diǎn)第二節(jié) 環(huán)境對(duì)基因表達(dá)的影響第三節(jié) 原核生物基因表達(dá)的調(diào)控第四節(jié) 真核生物基因表達(dá)的調(diào)控第五節(jié) 基因表達(dá)調(diào)控異常與疾病4基因表達(dá)（gene expression） 是指基因所貯存的遺傳信息通過轉(zhuǎn)錄（transcription）和翻譯（translation）產(chǎn)生具有生物功能的多肽和蛋白質(zhì)的過程 5第一節(jié)基因表達(dá)的過程和特點(diǎn) 一、基因的轉(zhuǎn)錄RNA的合成 二、蛋白質(zhì)的生物合成翻譯6復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的區(qū)別模板原料酶產(chǎn)物配對(duì)兩股鏈均復(fù)制模板鏈轉(zhuǎn)錄dNTPNT

2、PDNA聚合酶RNA聚合酶子代雙鏈DNAmRNA, tRNA, rRNAA-T,G-CA-U,T-A,G-C復(fù) 制 轉(zhuǎn) 錄7復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的比較 多核苷酸鏈的合成方向都是53 在3-OH末端與加入的核苷酸形成磷酸二酯鍵不同點(diǎn)類似點(diǎn) 對(duì)于一個(gè)基因組來說，轉(zhuǎn)錄只發(fā)生在一部分基因， 而且每個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄都受到相對(duì)獨(dú)立的控制 轉(zhuǎn)錄是不對(duì)稱的 轉(zhuǎn)錄時(shí)不需要引物 RNA鏈的合成是連續(xù)的8 定義轉(zhuǎn)錄是以DNA為模板合成RNA的過程mRNA、tRNA、rRNA、小分子RNA 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物一、基因的轉(zhuǎn)錄9 1. 轉(zhuǎn)錄的體系 原核細(xì)胞 全酶（holoenzyme）2真核細(xì)胞 RNA聚合酶I RNA聚合酶II RNA聚合酶I

3、II 模板DNA 原料ATP、CTP、GTP、UTP RNA聚合酶（一）基因轉(zhuǎn)錄的基本方式10結(jié)構(gòu)基因模板鏈，反意義鏈，Waston 鏈編碼鏈，有意義鏈，Crick 鏈5335RNA合成中的 DNA模板11Transcription5 GATCTGACTGACATAGACATAGAT 3 coding (= non-template) strand3 CTAGACTGACTGTATCTGTATCTA 5 template strand5 GAUCUGACUGACAUAGACAUAGAU 3 mRNA 12E.coli RNA聚合酶全酶 (holoenzyme) 的結(jié)構(gòu)決定被轉(zhuǎn)錄的基因識(shí)別轉(zhuǎn)錄起

4、始點(diǎn)結(jié)合DNA模板與轉(zhuǎn)錄全過程有關(guān)核心酶13 RNA-pol I 核仁 45S-rRNA 不敏感 RNA-pol II 核質(zhì) hnRNA 低濃度敏感RNA-pol III 核質(zhì) 5S-rRNA,tRNA,snRNA 高濃度敏感Mt RNA-pol 線粒體 線粒體RNAs 不敏感 真核生物的RNA聚合酶種類 細(xì)胞內(nèi)定位 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 對(duì)抑制劑鵝膏 蕈堿反應(yīng)14 (二)轉(zhuǎn)錄的過程 1. 起始原核細(xì)胞RNA聚合酶與啟動(dòng)子相互作用真核細(xì)胞RNA聚合酶、反式作用因子與順式元件相互作用拼板理論15DNA原核生物啟動(dòng)子5335TTGACATATAAT10bp15bp Start of transcription

5、Pribnow boxRNA polymerase-35區(qū)-10區(qū)+116DNA5335真核生物啟動(dòng)子 Start of transcription TATA10bpTATA boxHogness boxCCAATGCGCCAAT boxGC box -70區(qū) -25區(qū) +1 RNA polymerase17 2.延伸核心酶催化 磷酸化的RNA聚合酶催化，核小體解聚原核細(xì)胞真核細(xì)胞183. 終止原核細(xì)胞真核細(xì)胞結(jié)合富含C的RNA區(qū)段，發(fā)揮ATP酶及解螺旋酶活性 轉(zhuǎn)錄終止的修飾點(diǎn)處切離并加尾依賴因子不依賴因子RNA 3 端形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)19RNA-pol53DNARNA polyC因子和RNA轉(zhuǎn)錄

6、產(chǎn)物結(jié)合RNA聚合酶構(gòu)象改變引起轉(zhuǎn)錄終止20（三）轉(zhuǎn)錄后加工原核細(xì)胞真核細(xì)胞tRNA和rRNA需加工，mRNA不需加工tRNA、rRNA和mRNA均需加工1. 原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的差異212. 真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工 5端加帽轉(zhuǎn)錄未終止時(shí)加入m7G5ppp，與穩(wěn)定mRNA及翻譯起始有關(guān)5pppG5pGppi5GpppGpppG pi甲基化酶mGpppG磷酸酶CH322核酸酶 poly(A)3-OH引入100-200bp A真核基因3端AATAA切除3尾1025堿基3端加尾加尾信號(hào)處切離,并加poly (A)，與穩(wěn)定mRNA及翻譯效率有關(guān)23 剪接（splicing） 由小分子細(xì)胞核內(nèi)核蛋

7、白顆粒（snRNP）去除核不均一RNA（hnRNA）中的內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄序列24 通過不同剪接方式選擇性使用外顯子，合成功能不同而結(jié)構(gòu)只有微小差異的蛋白質(zhì)選擇性剪接25 RNA編輯 （RNA editing） RNA編輯是對(duì)mRNA前體的序列進(jìn)行的改編，在mRNA前體分子的堿基序列中 C被U取代，A被G取代，使成熟mRNA的序列與基因組DNA序列不同26成熟mRNA蛋白質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞質(zhì)3. 真核生物成熟mRNA的運(yùn)輸信使核糖核蛋白顆粒(mRNP)27二、蛋白質(zhì)的生物合成翻譯 以特定核苷酸序列的mRNA為模板，合成相應(yīng)氨基酸序列的多肽鏈，即將帶有遺傳信息的核苷酸順序轉(zhuǎn)換為氨基酸順序的過程 組成蛋白質(zhì)的氨

8、基酸由其特定的tRNA攜帶和轉(zhuǎn)運(yùn)，在核蛋白體上按照模板mRNA所提供的編碼信息合成具有特定序列的多肽鏈28(一) 翻譯的體系(二) 翻譯的基本過程(三) 肽鏈翻譯后的加工修飾(四) 蛋白質(zhì)的分揀與轉(zhuǎn)運(yùn) 29(一) 翻譯的體系 模板 mRNA 氨基酸運(yùn)輸 tRNA肽鏈合成場(chǎng)所 核糖體（rRNA+蛋白質(zhì)）蛋白質(zhì)因子 起始、延長、終止因子原料 20種有遺傳密碼的氨基酸30 模板 mRNA mRNA是翻譯的直接模板 mRNA的壽命一般較短 編碼單個(gè)蛋白或多個(gè)蛋白 mRNA具有方向性，從5端到3端。 對(duì)應(yīng)肽鏈從氨基端到羧基端 3個(gè)核苷酸構(gòu)成1個(gè)密碼子，指令氨基酸31 連續(xù)性 簡并性 通用性 擺動(dòng)性 方向

9、性密碼子特點(diǎn)遺傳密碼表32由氨基酰-tRNA合成酶催化與氨基酸的連接 氨基酸運(yùn)輸 tRNATC 環(huán)反密碼子氨基酸臂額外環(huán) (可變的)DHU 環(huán)具有絕對(duì)專一性和校正功能運(yùn)輸氨基酸33肽鏈合成場(chǎng)所 核糖體（rRNA+蛋白質(zhì)）原核細(xì)胞真核細(xì)胞30S: 16S rRNA和21種蛋白質(zhì)50S: 5S、23S rRNA和34種蛋白質(zhì)） 40S: 18S rRNA和33種蛋白質(zhì) 60S: 5S、5.8S、28S rRNA和49種 蛋白質(zhì)70S80S34蛋白質(zhì)因子 名稱原核細(xì)胞真核細(xì)胞IF1, IF2, IF3eIFn (10余種)延長因子EFTu, EFTs, EFGEF1(, , ), EF2釋放因子RF

10、1, RF2, RF3eRF起始因子35 原料 20種有遺傳密碼的氨基酸原核細(xì)胞真核細(xì)胞起始氨基酸為N-甲酰蛋氨酸 （密碼子AUG、GUG、UUG）起始氨基酸為蛋氨酸（密碼子AUG）36氨基酸+ATP+tRNA氨基酰tRNA +AMP+PPi氨基酸的活化與轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酰tRNA的表示方法ala-tRNAalamet-tRNAemetarg-tRNAargmet-tRNAimet 真核細(xì)胞起始用蛋氨酰tRNA真核細(xì)胞延伸用蛋氨酰tRNAfmet-tRNAimet 原核細(xì)胞延伸用甲酰蛋氨酰tRNA37一種氨基酸可由2-6種tRNA特異地運(yùn)載tRNA的總數(shù)（40-50）大于氨基酸的數(shù)目氨基酰tRNA合成

11、酶具有高度特異性（副密碼子）氨基酰tRNA合成酶具有校讀活性真核生物攜帶蛋氨酸的tRNA有兩種，分別為tRNAimet和tRNAemet原核生物AUG只能辨認(rèn)甲酰化的蛋氨酸氨基酸的活化與轉(zhuǎn)運(yùn)特點(diǎn)38 （二）翻譯的基本過程1.起始 形成翻譯起始復(fù)合物2.延長 指每加一個(gè)氨基酸經(jīng)過進(jìn)位、成肽和轉(zhuǎn)位3.終止 原核細(xì)胞 RF1, RF2識(shí)別終止密碼，RF3激活轉(zhuǎn) 肽酶釋放肽鏈 真核細(xì)胞 eRF同時(shí)具有上述功能39大小亞基的拆分mRNA與小亞基結(jié)合fmet-tRNA的結(jié)合核糖體大亞基結(jié)合翻譯起始復(fù)合物形成過程1.起始4030SmRNAfMettRNAfmetGTPIF2 IF3IF1 +mRNA70S核

12、糖體+IF3+IF1 30S小亞基IF3 IF1+50S大亞基fMet tRNAfmet +GTP+IF2 fMettRNAfmetIF2GTP+ 50SIF2IF1IF3 GDP70SmRNAfMettRNAfmet70S 起始復(fù)合物的形成41 特異的起始tRNA2. mRNA有5端帽子結(jié)構(gòu)和3 尾巴。2種帽子結(jié)合 蛋白（CBP）參與mRNA與核蛋白體小亞基結(jié)合3. 起始階段,eIF2與met-tRNA及GTP結(jié)合形成復(fù) 合物， eIF2是翻譯所必須的因子真核生物翻譯起始4240S Met tRNAimet GTP80S核蛋白體+eIF3 40S小亞基eIF3 +60S大亞基MettRNAi

13、met +GTP+eIF2 MettRNAfmeteIF2GTP80S Met tRNAfmet mRNA80S 起始復(fù)合物40S mRNA Met tRNAimet GTPeIF4C+ mRNAeIF4A,4B,4E,4F+ 60SeIF2,3,4C,5eIF4D80S 起始復(fù)合物的形成432.延長進(jìn)位、成肽和轉(zhuǎn)位三個(gè)階段核糖體循環(huán)P位：給位或肽位 Donor site or Peptidyl siteA位：受位或氨基酰位 Acceptor site or Aminoacyl site進(jìn)位成肽轉(zhuǎn)位核糖體小亞基PAmRNAA U GU U AG G UC C CA A CA G CA U CU

14、 A C核糖體大亞基tRNAA A UtRNA蛋亮PAmRNAA U GU U CG G UC C CA A CA G CA U CU A CA A G蛋亮PAmRNAA U GU U CG G UC C CA A CA G CA U CA A G亮蛋443.終止釋放因子（RF）辨認(rèn)終止密碼RF3激活轉(zhuǎn)肽酶，催化P位上的肽與tRNA解離在釋放因子（RR）的作用下，tRNA，mRNA和RF從核糖體上解離，在IF的作用下核糖體自身分解為大小亞基。45（三）肽鏈翻譯后的加工修飾 1. 一級(jí)結(jié)構(gòu)修飾 去掉N-甲?；?、N-蛋氨酸或N端序列 個(gè)別氨基酸的修飾（羥化、磷酸化、 形成-S-S-等） 多蛋白（p

15、olyprotein）的水解修飾462. 空間結(jié)構(gòu)修飾 折疊成天然構(gòu)象 分子伴侶（molecular chaperon）幫助新生多 肽鏈折疊成高級(jí)結(jié)構(gòu)的一類蛋白質(zhì) 亞基聚合 輔基的結(jié)合（如糖基化等）47(四)蛋白質(zhì)的分揀與轉(zhuǎn)運(yùn) 1. 分揀（sorting） 分揀信號(hào)蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)或高級(jí)結(jié)構(gòu)中存在被分配到目的地的信息細(xì)胞核： 核定位信號(hào)（富含堿性氨基酸） 各種細(xì)胞器： 細(xì)胞器定位信號(hào) 分泌至細(xì)胞外：信號(hào)肽（signal peptide） 堿性氨基酸疏水氨基酸剪切位點(diǎn)48 翻譯轉(zhuǎn)運(yùn)同步（如多數(shù)分泌性蛋白） 翻譯后轉(zhuǎn)運(yùn)（如核DNA編碼的線粒體蛋白）2. 轉(zhuǎn)運(yùn)靶向運(yùn)輸分泌至胞外留在胞漿內(nèi)進(jìn)入核內(nèi)或其

16、他細(xì)胞器穿過合成所在的細(xì)胞到其它組織細(xì)胞去的蛋白質(zhì)為分泌性蛋白49蛋白質(zhì)合成的調(diào)節(jié)四環(huán)素類，抑制原核氨基酰tRNA與核糖體結(jié)合氯霉素類，阻斷延長，原核鏈霉素類，改變構(gòu)象，原核嘌呤霉素，競(jìng)爭(zhēng)抑制酪氨酰tRNA, 原核真核放線菌酮，抑制轉(zhuǎn)肽酶，真核50抑制蛋白質(zhì)合成的生物活性物質(zhì)白喉毒素(DT)：對(duì)EF2進(jìn)行修飾而失活干擾素(IF)：-IF,-IF,-IF 誘導(dǎo)并激活一種蛋白激酶，使eIF2磷酸化而失活,使病毒蛋白的合成受到抑制；此外，還可誘導(dǎo)產(chǎn)生一種RNA內(nèi)切酶，破壞病毒RNA51第二節(jié) 環(huán)境對(duì)基因表達(dá)的影響 一、外環(huán)境因素對(duì)基因表達(dá)的影響二、基因表達(dá)時(shí)空調(diào)控三、基因表達(dá)調(diào)控的基本原理 52一、

17、外環(huán)境因素對(duì)基因表達(dá)的影響 原核生物基因表達(dá) 環(huán)境壓力形成了特殊的表達(dá)方式 該表達(dá)方式對(duì)環(huán)境有高度適應(yīng)性應(yīng)變能力 53 大腸桿菌可以利用許多糖作為碳源，葡萄糖、乳糖、果糖等等 但大腸桿菌優(yōu)先利用葡萄糖。當(dāng)環(huán)境中的葡萄糖缺乏時(shí)，開始利用乳糖或其它糖。 1960年，法國科學(xué)家Jacob- Monod提出操縱元模型 乳糖操縱元（Lactose Operon )54 乳糖操縱子 組成結(jié)構(gòu)基因（z、y、a ）調(diào)控元件（啟動(dòng)子，操縱基因）調(diào)控方式葡萄糖充足時(shí)，阻遏物與操縱基因結(jié)合,阻礙RNA聚合酶對(duì)下游三個(gè)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。 葡萄糖不足時(shí)，利用乳糖去阻遏物,允許RNA聚合酶對(duì)下游三個(gè)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。55大腸

18、桿菌乳糖操縱子(lac operon) 的調(diào)節(jié)56真核生物基因表達(dá) 外環(huán)境比原核生物優(yōu)越 主要受內(nèi)環(huán)境變化的影響 (有些細(xì)胞的基因表達(dá)也會(huì)受到環(huán)境變化的影響)57二、基因表達(dá)的時(shí)空調(diào)控調(diào)控對(duì)象可調(diào)節(jié)基因（regulated gene），是特定時(shí)空條件下特異性表達(dá)的基因調(diào)控特點(diǎn)階段特異性（時(shí)間特異性）組織特異性（空間特異性）生物學(xué)意義分化與發(fā)育適應(yīng)環(huán)境58 多細(xì)胞生物不同組織細(xì)胞中的基因組是相同的 不同細(xì)胞表達(dá)不同基因 同一細(xì)胞不同的發(fā)育階段，表達(dá)不同基因 同一種細(xì)胞中不同基因表達(dá)水平不同 豐富mRNA(高豐度) 稀少mRNA(低豐度)基因差異表達(dá)特征基因差異表達(dá)是多細(xì)胞生物進(jìn)化的結(jié)果,是細(xì)胞活

19、動(dòng)分工的基礎(chǔ)59三、基因表達(dá)調(diào)控的基本原理基因表達(dá)調(diào)控的環(huán)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控蛋白質(zhì)合成的調(diào)控60DNA元件原核生物：啟動(dòng)序列、操縱序列 真核生物：啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、抑制子 順式作用元件特異DNA序列 基因表達(dá)調(diào)控的因素蛋白分子真核生物： 轉(zhuǎn)錄因子 原核生物：RNA聚合酶特異因子、 阻遏蛋白、激活蛋白轉(zhuǎn)錄因子反式作用因子基本轉(zhuǎn)錄因子增強(qiáng)子結(jié)合因子抑制子結(jié)合因子61第三節(jié) 原核生物基因表達(dá)的調(diào)控 特點(diǎn) 轉(zhuǎn)錄與翻譯緊密偶聯(lián)操縱子是主要調(diào)節(jié)機(jī)制多順反子mRNA阻遏蛋白介導(dǎo)的負(fù)性調(diào)節(jié)為主轉(zhuǎn)錄起始是調(diào)節(jié)的關(guān)鍵62調(diào)節(jié)層次 轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié) 起始調(diào)節(jié)是關(guān)鍵 依靠操縱子(operon)與阻遏蛋白(負(fù))、激活蛋 白(正

20、)的相互作用63阻遏蛋白對(duì)大腸桿菌乳糖操縱子的負(fù)調(diào)節(jié)64激活蛋白對(duì)阿拉伯糖啟動(dòng)子的正調(diào)節(jié) 無阿拉伯糖時(shí)，AraC同二聚體與O2和I1結(jié)合，BAD基因不發(fā)生轉(zhuǎn)錄 有阿拉伯糖時(shí)，AraC用另一種方式形成二聚體與I1和I2結(jié)合，從而激活BAD基因轉(zhuǎn)錄65轉(zhuǎn)錄終止調(diào)節(jié) 色氨酸操縱子trp operon依賴因子或者依賴轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物3 端發(fā)夾結(jié)構(gòu)， 使轉(zhuǎn)錄過早終止，稱為衰減（attenuation）66有色氨酸時(shí)，轉(zhuǎn)錄過早終止，只生成先導(dǎo)mRNA色氨酸操縱子（trp operon）表達(dá)的衰減缺色氨酸時(shí)，轉(zhuǎn)錄完全，生成全長mRNA67翻譯調(diào)節(jié) 稀有密碼子對(duì)翻譯影響 主要影響翻譯的速度 mRNA的5端或3端形成發(fā)

21、夾結(jié)構(gòu)，可防止被外切酶水解，延長其壽命 翻譯阻遏反義RNA（antisense RNA）阻礙核糖體與靶mRNA結(jié)合 mRNA穩(wěn)定性對(duì)翻譯的影響 調(diào)節(jié)蛋白競(jìng)爭(zhēng)mRNA的核糖體結(jié)合位點(diǎn)68Regulation of Gene Expression in Eukaryotes第四節(jié)真核基因表達(dá)調(diào)控691970年，猿猴病毒40(simian virus 40, SV40）的生命周期被確定為早、晚兩個(gè)階段，使它們成為基因表達(dá)調(diào)控的典型模型。 1975年D. Pribonow發(fā)現(xiàn)T7啟動(dòng)子序列。 1982年C. Benoist和P. Chambon揭示了SV40的早期啟動(dòng)子序列。 1983年，W.S.Dy

22、nan和R.Tjian分離、鑒定了真核轉(zhuǎn)錄因子AP1。1986年，J.Clarke和Chambon兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室同時(shí)報(bào)告了SV40增強(qiáng)子的多功能元件組成。 1990年代，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)-基因轉(zhuǎn)錄偶聯(lián)機(jī)制成為熱點(diǎn)課題。707172I.真核基因表達(dá)調(diào)控的特征Features of Eukaryotic Gene Regulation73一、順式作用元件是決定真核基因轉(zhuǎn)錄活性的關(guān)鍵因素之一exon1intron1exon nintron n上游下游轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)增強(qiáng)子沉默子啟動(dòng)子TATA盒GC盒CAAT盒增強(qiáng)子74（一） 啟動(dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合并啟動(dòng) 基因轉(zhuǎn)錄的特異DNA序列 真核基因的啟動(dòng)子指的是RNA聚合酶

23、（RNA polymerase，RNA Pol）識(shí)別、結(jié)合的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)中啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄的一段特異DNA序列，包含一組轉(zhuǎn)錄調(diào)控功能組件，其中每一個(gè)功能組件的DNA序列約720 bp。 75 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增強(qiáng)子 順式作用元件 結(jié)構(gòu)基因-GCGC-CAAT-TATA轉(zhuǎn)錄起始真核生物啟動(dòng)子保守序列761. 近起始點(diǎn)的TATA盒/起始子及CpG島 是真核生物啟動(dòng)子的核心序列真核細(xì)胞的啟動(dòng)子是包括轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)（transcription initiation site或transcription start site）在內(nèi)的、有通用轉(zhuǎn)錄因子及RNA聚合酶組裝、結(jié)合的一段DNA序列。 典

24、型的啟動(dòng)子核心序列（core sequences）是在轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游2535 bp處，有一保守的TATA序列，被稱為TATA盒（TATA box），真核細(xì)胞的TATA盒多為TATAAAA序列。TATA盒與原核細(xì)胞的啟動(dòng)子一樣，對(duì)RNA聚合酶II的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)起定位作用。 77一些真核細(xì)胞基因含有另一種啟動(dòng)子元件，稱為起始子(initiator,Inr)，決定啟動(dòng)子的強(qiáng)度。 起始子共有序列為：（5）Y-Y-A+1-N-T/A-Y-Y-Y（3）；Y代表胞嘧啶C或胸腺嘧啶T，N代表任意堿基，T/A代表T或A。 78有一些編碼蛋白質(zhì)基因的轉(zhuǎn)錄可有多個(gè)起始點(diǎn)，可產(chǎn)生含不同5末端的mRNA。它們不含TA

25、TA盒或起始子，多在起始位點(diǎn)上游約100 bp內(nèi)含有2050個(gè)核苷酸的CG序列，被稱做CpG島（CpG island）。 這些基因大多為低轉(zhuǎn)錄基因，編碼中間代謝酶的管家基因。79 2. 啟動(dòng)子中的上游元件協(xié)助真核基因調(diào)節(jié)GC盒(GC box) (GGGCGG)CAAT盒(CAAT box) (GCCAAT )啟動(dòng)子上游元件（promoter-proximal elements, 或upstream promoter elements）是一些位于TATA盒上游的DNA序列，與調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，調(diào)節(jié)通用轉(zhuǎn)錄因子與TATA盒的結(jié)合、RNA聚合酶與啟動(dòng)子的結(jié)合，以及轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成，從而決定基因的轉(zhuǎn)錄

26、效率與專一性。常見的序列是：80(二）增強(qiáng)子決定基因的時(shí)空特異性表達(dá)增強(qiáng)子（enhancer）是能夠結(jié)合特異基因調(diào)節(jié)蛋白，促進(jìn)鄰近或遠(yuǎn)隔特定基因表達(dá)的DNA序列；在酵母中，被稱為上游活化序列（upstream activator sequences, UASs）。增強(qiáng)子的作用通常與其所處的位置和方向無關(guān)。81增強(qiáng)子距轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的距離變化很大，從100 nt到50,000nt，甚至更大。但總是作用于最近的啟動(dòng)子。 增強(qiáng)子所處位置在所調(diào)控基因的上游或下游，但主要位于上游。下游內(nèi)含子當(dāng)中，乃至下游最后外顯子以外的序列也可含有增強(qiáng)子。很多哺乳動(dòng)物基因受一個(gè)以上的增強(qiáng)子調(diào)控。 82（三）沉默子阻遏基因

27、轉(zhuǎn)錄沉默子(silencer)是指某些真核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)中抑制或阻遏基因轉(zhuǎn)錄的一段（數(shù)百bp）DNA序列。沉默序列促進(jìn)局部DNA的染色質(zhì)形成致密結(jié)構(gòu)，從而阻止轉(zhuǎn)錄激活因子結(jié)合DNA，是基因轉(zhuǎn)錄的負(fù)性調(diào)節(jié)因素。83二、反式作用因子和順式作用蛋白 是真核基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白在真核細(xì)胞核中，有許多蛋白質(zhì)能夠幫助RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄RNA。這類蛋白質(zhì)統(tǒng)稱轉(zhuǎn)錄因子（transcription factors，TF）或轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白（transcription regulatory protein）。以反式作用方式調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子稱為反式作用因子（trans-acting factor），以順式作用方式調(diào)節(jié)

28、基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子稱為順式作用蛋白（cis-acting protein） 。84cDNAaDNA反式調(diào)節(jié)C順式調(diào)節(jié) mRNA C蛋白質(zhì)CBA mRNA蛋白質(zhì)AA85（一）Pol轉(zhuǎn)錄需要基本轉(zhuǎn)錄因子和特異 轉(zhuǎn)錄因子 * 基本轉(zhuǎn)錄因子(general transcription factors) 是RNA聚合酶結(jié)合啟動(dòng)子所必需的一組蛋白因子，決定三種RNA(mRNA、tRNA及rRNA)轉(zhuǎn)錄的類別。86* 特異轉(zhuǎn)錄因子(special transcription factors)為個(gè)別基因轉(zhuǎn)錄所必需，決定該基因的時(shí)間、空間特異性表達(dá)。轉(zhuǎn)錄激活因子轉(zhuǎn)錄抑制因子87 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子結(jié)構(gòu)DNA結(jié)合域轉(zhuǎn)錄

29、激活域TF蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)結(jié)合域（二聚化結(jié)構(gòu)域） 谷氨酰胺富含域酸性激活域脯氨酸富含域88（二）轉(zhuǎn)錄因子含有不同的DNA結(jié)合域螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋是轉(zhuǎn)錄因子中的常見的DNA結(jié)合域 同源異型域結(jié)構(gòu)與HTH結(jié)構(gòu)域類似 鋅指結(jié)構(gòu)是一類含鋅離子轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合域 亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域既可介導(dǎo)結(jié)合DNA又可介導(dǎo)蛋白質(zhì)二聚體化 堿性螺旋-環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)域也可同時(shí)介導(dǎo)結(jié)合DNA和蛋白質(zhì)二聚體化 89螺旋-回折-螺旋（helix-turn-helix，HTH） 同源異型域（homeodomain，HD）識(shí)別螺旋DNA大溝DNA小溝螺旋1N端DNA大溝螺旋390 鋅指結(jié)構(gòu)是一類含鋅的DNA結(jié)合蛋白質(zhì)模體C2H2型鋅指（

30、Zinc finger）91反向平行片層DNA大溝螺旋Zn292 亮氨酸拉鏈同時(shí)調(diào)節(jié)DNA結(jié)合與蛋白質(zhì)二聚體化LeuLeuLeuLeuLeuLeuLeuLeuDNA大溝DNA大溝亮氨酸拉鏈（leucine zipper）93 堿性螺旋-環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)也可調(diào)節(jié)DNA結(jié)合及蛋白質(zhì)二聚體化 堿性螺旋-環(huán)-螺旋（basic helix-loop-helix，bHLH） bHLH雙體DNA大溝螺旋螺旋環(huán)94（三）轉(zhuǎn)錄因子含有不同的轉(zhuǎn)錄激活域富含谷氨酰胺的轉(zhuǎn)錄激活域 富含脯氨酸的轉(zhuǎn)錄激活域 酸性氨基酸轉(zhuǎn)錄激活域 95三、正性調(diào)節(jié)占主導(dǎo)的真核基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制更加復(fù)雜*不同的DNA元件組合可產(chǎn)生多種類型的轉(zhuǎn)錄調(diào)

31、節(jié)方式；* 多種轉(zhuǎn)錄因子又可結(jié)合相同或不同的DNA元件；* 轉(zhuǎn)錄因子與DNA元件結(jié)合后，對(duì)轉(zhuǎn)錄激活過程所產(chǎn)生的效果各異，有正性調(diào)節(jié)或負(fù)性調(diào)節(jié)之分。96II. 真核基因表達(dá)的染色質(zhì)水平調(diào)控Chromosomal Regulation ofEukaryotic Gene Expression97 基因活化蛋白質(zhì)改變局部染色質(zhì)結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)（heterochromatin）是轉(zhuǎn)錄非活性的。 常染色質(zhì)（euchromatin）中的轉(zhuǎn)錄活性區(qū)域?qū)怂崦该舾?，特別是轉(zhuǎn)錄基因的5-側(cè)翼區(qū)1000 nt以內(nèi)是高敏感位點(diǎn)(hypersensitive sites)。很多高敏感位點(diǎn)是調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的結(jié)合序列，而這些區(qū)域

32、核小體的相對(duì)缺少也使得這些蛋白質(zhì)易于與之結(jié)合。 轉(zhuǎn)錄活化染色質(zhì)與非活化染色質(zhì)在結(jié)構(gòu)上有很大不同。 98轉(zhuǎn)錄活化染色質(zhì)與非活化染色質(zhì)的組蛋白共價(jià)修飾的方式也不相同。核小體的核心組蛋白（H2A，H2B，H3，H4）中賴氨酸殘基的非可逆性甲基化，絲氨酸與蘇氨酸殘基的磷酸化，乙?；约胺核鼗嗍寝D(zhuǎn)錄活性染色質(zhì)的特點(diǎn)。真核細(xì)胞DNA的CpG序列（CpG島）中的胞嘧啶被甲基化為5-甲基胞嘧啶是常見現(xiàn)象，但轉(zhuǎn)錄活性染色質(zhì)區(qū)域胞嘧啶被甲基化的程度降低。99染色質(zhì)重塑（chromatin remodeling） 基因活化蛋白質(zhì)可以通過改變基因的啟動(dòng)子和調(diào)節(jié)序列區(qū)域的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)來促進(jìn)轉(zhuǎn)錄開始。這種改變局部染色質(zhì)結(jié)

33、構(gòu)的過程被稱為染色質(zhì)重塑 。最主要的兩種方式： 組蛋白的共價(jià)修飾 核小體重塑（nucleosome remodeling）100染色質(zhì)重塑101組蛋白乙?；?位點(diǎn)：組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶（histone acetyl transferases, HATs），也稱組蛋白乙?；福╤istone acetylase）主要作用于核小體的核心組蛋白所富含的賴氨酸殘基，降低整個(gè)核小體對(duì)DNA的親和性。時(shí)間：基因活化蛋白質(zhì)結(jié)合在轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)區(qū)域后。102作用：使染色質(zhì)進(jìn)入轉(zhuǎn)錄活性狀態(tài)；還可能促進(jìn)或防止與其他轉(zhuǎn)錄或調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白的相互作用。逆轉(zhuǎn)：組蛋白脫乙?；?histone deacetylase， HDAC)減

34、少核小體的乙?；谷旧|(zhì)恢復(fù)轉(zhuǎn)錄非活性狀態(tài)。 103III.真核基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控Transcriptional Regulation of Eukaryotic Gene Expression104基因表達(dá)的多級(jí)調(diào)控:基因激活轉(zhuǎn)錄起始 轉(zhuǎn)錄后加工mRNA降解蛋白質(zhì)降解等蛋白質(zhì)翻譯翻譯后加工修飾105基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)基本要素:基因的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)細(xì)胞內(nèi)所存在的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白生物個(gè)體或細(xì)胞所處的內(nèi)、外環(huán)境106 真核細(xì)胞基因開關(guān)的分子機(jī)制比原核復(fù)雜基本共同點(diǎn)：轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)節(jié)是關(guān)鍵點(diǎn)根本不同點(diǎn)：原核生物：啟動(dòng)子在缺少轉(zhuǎn)錄因子情況下就具有天然活性 真核生物：強(qiáng)力啟動(dòng)子在缺少調(diào)節(jié)蛋白的情況下往往沒有活

35、性 107真核細(xì)胞基因及其調(diào)控區(qū)域受到染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的限制，轉(zhuǎn)錄的活化與轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域、轉(zhuǎn)錄區(qū)域內(nèi)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的諸多變化相關(guān)；正性調(diào)節(jié)是主要形式。因此，在轉(zhuǎn)錄的基本狀態(tài)受到制約的情況下，使得每個(gè)真核細(xì)胞基因需要活化才能被轉(zhuǎn)錄；真核細(xì)胞有更大、更為復(fù)雜、種類更多的調(diào)節(jié)蛋白。單一啟動(dòng)子可以被分散在DNA分子上、數(shù)量近乎無限的調(diào)節(jié)序列所控制。真核細(xì)胞對(duì)基因表達(dá)起始的調(diào)控至少在下面幾個(gè)方面與原核細(xì)胞存在不同： 108 一、轉(zhuǎn)錄起始調(diào)控發(fā)生在轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的組裝過程基因活化蛋白質(zhì)與增強(qiáng)子或UASs的結(jié)合；通用轉(zhuǎn)錄因子在啟動(dòng)子處的組裝；輔助激活子(coactivator)和/或中介子（medicator）在通用轉(zhuǎn)

36、錄因子/RNA聚合酶II復(fù)合物與基因活化蛋白質(zhì)之間的輔助和中介作用。 RNA聚合酶II與啟動(dòng)子的結(jié)合、啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄需要諸多蛋白質(zhì)因子的協(xié)同作用。這通常包括：109基因活化蛋白質(zhì)與增強(qiáng)子結(jié)合后，通過與全酶復(fù)合體中的中介子相互反應(yīng)，使全酶復(fù)合體在空間上更接近啟動(dòng)子并有效組裝。此外，多數(shù)全酶復(fù)合體中缺少一些通用轉(zhuǎn)錄因子，如TFIID與TFIIA，它們需要在啟動(dòng)子處分別組裝，最后形成穩(wěn)定的轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物（transcription initiation complex），啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。110TATA盒TF IIDRNA聚合酶II通用轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄方向中介子活化蛋白活化蛋白增強(qiáng)子增強(qiáng)子DNATF IIA111基因

37、活化蛋白與增強(qiáng)子結(jié)合后如何影響到遠(yuǎn)距離的RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)，有以下幾種模式： 通過扭曲作用使DNA鏈發(fā)生構(gòu)型變化，更適合于通用轉(zhuǎn)錄因子與RNA聚合酶結(jié)合, 并通過直接接觸或通過輔活化子/中介子而影響通用轉(zhuǎn)錄因子和RNA聚合酶的組裝。扭曲（twisting）112沿DNA滑動(dòng)，直到接觸另一個(gè)特異DNA序列結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子，發(fā)揮作用。利用DNA分子的柔曲性彎曲成環(huán)，使增強(qiáng)子區(qū)域與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)靠近，直接接觸或通過輔活化子/中介子而發(fā)揮作用。滑動(dòng)（sliding）成環(huán)（looping）113固醇類激素、甲狀腺激素、維甲酸類激素等激素與細(xì)胞核內(nèi)的特異性受體，即特異基因調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，形成的激素-受

38、體復(fù)合物結(jié)合到DNA特定的基因調(diào)節(jié)序列激素反應(yīng)元件(hormone response elements, HREs)，再通過與其他調(diào)節(jié)因子的相互作用，活化或抑制相鄰基因的表達(dá)。114幾種不同的激素反應(yīng)元件受體共同結(jié)合序列*男性激素（Androgen）GG(A/T)ACAN2TGTTCT糖皮質(zhì)激素 (Glucocorticoid)GGTACAN3TGTTCT維甲酸 (Retinoic acid)AGGTCAN5AGGTCA維生素D (Vitamin D)AGGTCAN3AGGTCA甲狀腺激素 (Thyroid hormone)AGGTCAN3AGGTCA類維生素A （Retinoid X）AGG

39、TCANAGGTCANAGGTCANAGGTCA115（一）mRNA 5端加帽和3端加尾修飾利于mRNA穩(wěn)定性和轉(zhuǎn)運(yùn)除組蛋白外，所有真核細(xì)胞mRNA都有5端的“帽”和3端的Poly(A)尾結(jié)構(gòu) 。5端的“帽”和3端的Poly(A)尾均有其特有的作用。二、轉(zhuǎn)錄后調(diào)控涉及修飾、剪接、編輯、定向轉(zhuǎn)運(yùn)多個(gè)環(huán)節(jié)1165加帽的作用在于： 有助于保護(hù)mRNA免于被核糖核酸酶降解；5帽結(jié)合蛋白復(fù)合體參與mRNA和核糖體的結(jié)合來起始翻譯 。促進(jìn)mRNA從細(xì)胞核運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞漿；協(xié)助mRNA的剪接。在剪接第一個(gè)外顯子時(shí)，剪接體的形成需要帽結(jié)合蛋白的參與；117poly(A)尾可結(jié)合一種或多種特殊蛋白，避免mRNA被酶

40、降解，并在翻譯過程中具有重要作用。許多原核mRNA也含有Poly(A)尾，但是此尾的功能是促進(jìn)mRNA降解，而不是保護(hù)mRNA免于被降解。poly(A)尾的作用：118（二）可變性剪接可使初始轉(zhuǎn)錄本產(chǎn)生不同的成熟mRNA許多初始轉(zhuǎn)錄本可以通過一種以上的選擇性剪接（alternative RNA splicing）方式，去除不同的內(nèi)含子而被加工形成不同的mRNAs，因而形成不同的多肽。 119人視黃醛還原酶mRNA的選擇性剪接mRNAPre-mRNA同種異型mRNA120初始轉(zhuǎn)錄本含有所有選擇性加工途徑所需要的分子信號(hào)。一種細(xì)胞偏好何種選擇性加工途徑取決于加工因子RNA結(jié)合蛋白的特異性。 負(fù)調(diào)節(jié)

41、：抑制蛋白質(zhì)可以通過與原始轉(zhuǎn)錄本的結(jié)合來防止剪接復(fù)合體切除內(nèi)含子序列。選擇性剪接可以被正負(fù)調(diào)節(jié)分子調(diào)節(jié)：正調(diào)節(jié)：而不能正常剪接的剪接復(fù)合體可以在活化蛋白的幫助下發(fā)揮剪接功能。121（三）編輯加工可增加mRNA分子信息的內(nèi)涵某些mRNAs在翻譯前被編輯(editing)。結(jié)果：轉(zhuǎn)錄后編輯過程插入了4個(gè)U殘基，從而改變了轉(zhuǎn)錄本的翻譯讀碼框。機(jī)制：尚不清楚。研究人員已經(jīng)發(fā)現(xiàn)線粒體轉(zhuǎn)錄一類特殊的RNA分子，其3端有一段 poly(U), 其5端序列與mRNAs被編輯的區(qū)域互補(bǔ)，被稱為引導(dǎo)RNA（guide RNA）。引導(dǎo)RNA可能作為編輯過程的模板，并將其3端的U轉(zhuǎn)移給被編輯的mRNAs。 122 （

42、四）調(diào)解成熟mRNA的核外輸出也會(huì)影響基因表達(dá)現(xiàn)象：估計(jì)有1/5的核內(nèi)成熟mRNAs能進(jìn)入細(xì)胞漿。留在核內(nèi)的mRNAs約在1小時(shí)內(nèi)降解。mRNA通過核膜的過程是一個(gè)主動(dòng)運(yùn)輸過程，常常需要借助于核輸出受體(nuclear export receptors)才可穿過9nm的核孔通道。 機(jī)制：調(diào)控RNA從核運(yùn)輸至細(xì)胞漿的機(jī)制還不很清楚。 123（五）某些mRNA定位于細(xì)胞質(zhì)的特殊區(qū)域現(xiàn)象：一些mRNA分子攜帶有信息，可以在翻譯開始前自我導(dǎo)向定位于細(xì)胞內(nèi)的特定位置。 作用：在細(xì)胞的特定部位集中產(chǎn)生所需要的大量蛋白質(zhì)。 124機(jī)制：導(dǎo)向信號(hào)存在于mRNA的3端非翻譯區(qū)（3untranslated reg

43、ion, 3UTR）。 mRNA被連接在附著于細(xì)胞骨架上的動(dòng)力蛋白（motor proteins）上，利用其水解ATP所提供的能量沿著骨架成分朝目的方向移動(dòng)，最終在目的地被錨蛋白（anchor proteins）固定。mRNA在細(xì)胞漿中隨機(jī)擴(kuò)散并被不斷地降解，只有碰上錨蛋白才能得到保護(hù)。mRNA通過在細(xì)胞漿中的隨機(jī)擴(kuò)散，在其定位處被錨蛋白捕捉、固定。第二種情況第三種情況第一種情況125mRNA分子的3種不同定位過程126（六）通過改變mRNA分子的穩(wěn)定性 調(diào)控基因表達(dá) 意義：降解途徑保證mRNA不在細(xì)胞中累積并避免合成過多的蛋白質(zhì)。不同真核基因的mRNA的降解速率大不相同。 暫時(shí)需要的基因產(chǎn)物

44、：半衰期可能僅為幾分鐘、甚至幾秒鐘。 經(jīng)常需要的基因產(chǎn)物：其mRNA 可在多代細(xì)胞中穩(wěn)定存在。 127真核細(xì)胞mRNA降解有兩種途徑，是由每種mRNA分子的序列所決定。 Poly(A)的逐漸短縮：最常見的途徑mRNA分子一旦進(jìn)入細(xì)胞漿中，核酸外切酶會(huì)使Poly(A)末端逐步短縮，當(dāng)剩下約30個(gè)A時(shí)，5端發(fā)生脫帽，mRNA分子被迅速降解。一些mRNA分子的3UTR的特殊序列有助于特殊蛋白質(zhì)的結(jié)合，增加或降低Poly(A)短縮的速度。 128可將Poly(A)直接從mRNA分子上切除。這種切除也有賴于mRNA分子的3UTR特殊序列可以被內(nèi)切酶識(shí)別。 另一個(gè)途徑始于特殊內(nèi)切酶的作用 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(t

45、ransferrin receptor, TfR) mRNA分子 3UTR柄環(huán)（stem-loop）結(jié)構(gòu)鐵反應(yīng)元件(iron-response element，IRE)。例如：129 IRE-BP對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體mRNA穩(wěn)定性的調(diào)節(jié)低鐵狀態(tài)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體mRNA5編碼區(qū)活化的IRE-BP3Poly(A)n翻譯TfR蛋白IRE高鐵狀態(tài)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體mRNA5編碼區(qū)鐵失活的IRE-BP3Poly(A)nmRNA降解IRE130（七）mRNA分子細(xì)胞質(zhì)中添加Poly(A) 控制蛋白翻譯在一些情況下，特殊的Poly(A)尾端可以在細(xì)胞漿得以延伸。 例：正在成熟中的卵母細(xì)胞與卵細(xì)胞 一些存在于細(xì)胞漿的mRNA

46、分子的3末端只有1030個(gè)腺苷酸（A），它們并不翻譯。在卵母細(xì)胞成熟和受精后的一個(gè)特定時(shí)段，當(dāng)需要這些mRNA所編碼的蛋白質(zhì)時(shí)，Poly(A)被添加到這些選定的mRNA分子，大大促進(jìn)它們翻譯的開始。131（八）無義變化介導(dǎo)的mRNA降解是真核mRNA的監(jiān)視系統(tǒng)無義變化介導(dǎo)的mRNA降解 (Nonsense-mediated mRNA decay, NMD）當(dāng)在同一閱讀框架內(nèi)的翻譯終止密碼子UAA、UAG或UGA提前出現(xiàn)在最后兩個(gè)外顯子交界處上游約50 nt處時(shí)，mRNA被迅速降解。這些錯(cuò)位終止密碼子被稱為成熟前終止密碼子（premature termination codons, PTC），可

47、以來自突變、重組、不完全或不正確剪接。 132無義變化介導(dǎo)的mRNA的降解133意義：可以使某些異常的mRNA在被有效地翻譯成蛋白質(zhì)前得到清除 ，這個(gè)mRNA監(jiān)視系統(tǒng)可以防止非正常截短的蛋白質(zhì)的合成 。NMD在進(jìn)化過程中發(fā)揮了重要作用，使真核細(xì)胞更容易探究由于DNA重排、突變或不同剪接方式所形成的新基因。免疫系統(tǒng)細(xì)胞的發(fā)育過程中也很重要，重排基因產(chǎn)生的這類mRNA被NMD系統(tǒng)迅速降解，避免了截短蛋白質(zhì)的細(xì)胞毒作用。134（九）RNA干涉是一種基因轉(zhuǎn)錄后沉默機(jī)制 RNA干涉 在高等真核生物中發(fā)現(xiàn)有一類小RNAs (small RNAs)介導(dǎo)的特殊基因的沉默。這是由于此類小RNAs與mRNAs（經(jīng)

48、常是3UTR）相互作用，導(dǎo)致mRNA降解或者翻譯抑制，使mRNA及其相應(yīng)基因無法表達(dá)而沉默（silence）。 控制至少某些生物體的適時(shí)發(fā)育。它也是一種保護(hù)生物體免受RNA病毒侵襲和控制轉(zhuǎn)座子活性的機(jī)制 。意義：135700bp左右RNA前體配對(duì)堿基DICER2025bpmiRNA5RISC靶mRNA未配對(duì)區(qū)域靶mRNA降解導(dǎo)入的雙鏈RNA片段siRNARDE-1DICERRISCRISCRISC5靶mRNA靶mRNA被核酸內(nèi)切酶切割靶mRNA被核酸外切酶降解 miRNA 與siRNA使靶mRNA沉默機(jī)制136IV. 真核基因表達(dá)的翻譯水平調(diào)控Translational Regulation of Eukaryotic Gene Expression137一、翻譯起始因子-2的磷酸化調(diào)節(jié) 蛋白質(zhì)翻譯條件變化活化了特殊的蛋白質(zhì)激酶，使翻