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文檔簡介
1、教材基本實驗(二)二、物質(zhì)的提取、分離及鑒定 2022/10/1教材基本實驗(二)二、物質(zhì)的提取、分離及鑒定 2022/9/1、生物體內(nèi)物質(zhì)的提取2022/10/1he2生物組織中還原性糖、蛋白質(zhì)的鑒定葉綠體色素的提取、分離DNA的粗提取和鑒定如何選材?提取的方法?鑒定原理?實驗現(xiàn)象?1、生物體內(nèi)物質(zhì)的提取2022/9/27he2生物組織中還原總結(jié):物質(zhì)的提取、分離和鑒定實驗選材破碎細胞組織樣液提純或分離鑒定物質(zhì)含量高避免材料本身顏色干擾過濾或離心 層析 鹽析 萃取溶解度差異 試劑反應(yīng)條件 現(xiàn)象研磨滲透加洗滌劑榨汁總結(jié):物質(zhì)的提取、分離和鑒定實驗選材破碎細胞組織樣液提純或分2、化合物的分離(1
2、)紙層析法溶解度大?。?)鹽析例如:蛋白質(zhì)的析出(3)萃取不同溶劑中溶解度不同(4)離心分子大?。ㄙ|(zhì)量不同)(5)電荷電泳?2022/10/1he42、化合物的分離(1)紙層析法溶解度大小2022/9/22022/10/1he52022/9/27he5胡蘿卜素(橙黃色)葉黃素(黃色)葉綠素a(藍綠色)葉綠素b(黃綠色)胡蘿卜素(橙黃色)葉黃素(黃色)葉綠素a(藍綠色)葉綠素b(實驗原理光合色素的提取和分離(1)提?。荷啬軌蛉芙庠赺中,因此可以用 作為色素的提取液。(2)分離:各種色素在 中的溶解度不同,溶解度 擴散得快,反之則慢。試劑:碳酸鈣: ;二氧化硅: ;無水乙醇: ;層析液: 。 有
3、機溶劑無水乙醇幫助充分研磨防止色素被破壞提取色素分離色素層析液 高 實驗原理光合色素的提取和分離(1)提取:色素能夠溶解在_3、化合物的鑒定2022/10/1he83、化合物的鑒定2022/9/27he8(NH2-CO-NH-CO-NH2 ) (雙縮脲)NHHCONHCONHHNHHCONHH+NHHCONHH(NH3 )(NH2-CO-NH-CO-NH2 )NHHCONHCONHDNA粗提取和鑒定實驗雞全血破碎細胞藍色析出DNA粘稠物析出DNA絲狀物溶解、鑒定雞血細胞液靜置或離心加蒸餾水、攪拌細胞核物質(zhì)過濾溶解核物質(zhì)2mol/LNaCI加蒸餾水溶解DNA粘稠物2mol/LNaCI破碎細胞,獲
4、得勻漿香蕉或菜花研磨SDS:破壞細胞膜 使蛋白質(zhì)變性EDTA:保護DNA1.5mol/LNaCI:溶解DNA濾液:含DNA過濾、離心冷酒精NaCI、二苯胺DNA粗提取和鑒定實驗雞全血破碎細胞藍色析出DNA粘稠物析出實驗專題復(fù)習(物質(zhì)的提取分離鑒定)三、調(diào)查與模擬實驗教材基本實驗(三)三、調(diào)查與模擬實驗教材基本實驗(三)1、遺傳學調(diào)查群體調(diào)查、家系分析注意:(1)調(diào)查時,除了記錄人群中 的發(fā)病率還要記錄不同性別人群的發(fā)病率;(2)要隨機取樣,所調(diào)查群體要足夠大;(3)在群體調(diào)查的基礎(chǔ)上,還需要在取得患者同意后,進行家系調(diào)查,以了解遺傳病的類型。調(diào)查目的、對象、方法、注意事項、結(jié)果或數(shù)據(jù)的處理和分
5、析1、遺傳學調(diào)查群體調(diào)查、家系分析注意:(1)調(diào)查時,除了(10海南卷)某城市兔唇畸形新生兒出生率明顯高于其他城市,研究這種現(xiàn)象是否由遺傳因素引起方法不包括 A.對正常個體與畸形個體進行基因組比較研究 B.對該城市出生的雙胞胎進行相關(guān)的調(diào)查統(tǒng)計分析 C.對該城市出生的兔唇畸形患者的血型進行調(diào)查統(tǒng)計分析 D.對兔唇畸形患者家系進行調(diào)查統(tǒng)計分析答案C調(diào)查目的:兔唇畸形新生兒出生率明顯高于其他城市的原因是 遺傳因素還是環(huán)境因素A分子水平分析遺傳物質(zhì)的不同;B遺傳物質(zhì)相同的情況下考查環(huán)境因素的影響;D家系分析,尋找遺傳規(guī)律(10海南卷)某城市兔唇畸形新生兒出生率明顯高于其他城市,研人類遺傳病的研究方法
6、1、家譜法也稱家系分析法2、雙生兒法探討遺傳和環(huán)境對個體表型 的影響3、數(shù)理統(tǒng)計方法人類遺傳病的研究方法1、家譜法也稱家系分析法2、生態(tài)學調(diào)查種群層次種群密度 樣方法、標志重捕法群落層次豐富度和優(yōu)勢種生態(tài)系統(tǒng)層次2、生態(tài)學調(diào)查種群層次種群密度實驗專題復(fù)習(物質(zhì)的提取分離鑒定)實驗專題復(fù)習(物質(zhì)的提取分離鑒定)(10海南卷)某同學擬調(diào)查一個面積為100 hm2草地上某種雙子葉草本植物的種群密度,設(shè)計了四個調(diào)查方案,其中最可行的是A計數(shù)該草地上該種植物的全部個體數(shù)目B設(shè)置1個1 m2樣方,計數(shù)樣方中該種植物的個體數(shù)目C隨機設(shè)置1 m2樣方若干,計數(shù)每個樣方中該種植物的個體數(shù)目D在該種植物密集處設(shè)置
7、1m2樣方若干,計數(shù)每個樣方中該種植物的個體數(shù)目植物種群密度調(diào)查方法樣方法注意事項:隨機取樣、多個樣本、平均值答案:C(10海南卷)某同學擬調(diào)查一個面積為100 hm2草地上某種(10江蘇)科研人員對江蘇某地沿海灘涂米草群落和裸露泥灘的大型底棲(土壤)動物豐富度進行了對比研究。在相同取樣條件下,利用一種常用底泥采樣器(50cm 50cm 30cm)采得各動物類群的物種數(shù)和個體總數(shù)如下表。下列有關(guān)本研究的敘述,正確的有招潮蟹類厚蟹類沙蠶類泥螺類蛤類物種數(shù)個體總數(shù)物種數(shù)個體總數(shù)物種數(shù)個體總數(shù)物種數(shù)個體總數(shù)物種數(shù)個體總數(shù)裸露泥灘518114212110214米草群落312290011000A裸露泥灘
8、的大型底棲動物物種豐富度高于米草群落B米草群落的大型底棲動物種群密度高于裸露泥灘C改用另一規(guī)格的常用底泥采樣器會影響對比研究的結(jié)論D改變采樣的時間會影響采集到的物種數(shù)和個體總數(shù)116答案:AD(10江蘇)科研人員對江蘇某地沿海灘涂米草群落和裸露泥灘的大3、模擬實驗3、模擬實驗斐林試劑檢測還原糖斐林試劑:0.1g/ml的NaOH(甲)2ml和0.05g/ml的CuSO4(乙)4滴混合,生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。反應(yīng):CH2OH-(CHOH)4-CHO +2Cu(OH)2 CH2OH-(CHOH)4-COOH + Cu2O+ 2H2O顏色變化:淺藍色磚紅色檢測方法:現(xiàn)配斐林試劑,取葡萄糖溶液
9、加入斐林試劑,加熱煮沸2022/10/1221斐林試劑檢測還原糖斐林試劑:0.1g/ml的NaOH(甲本尼迪特(BENEDICT)試劑 配制:173克檸檬酸鈉和100克無水碳酸鈉溶解于800毫升水中。再取17.3克結(jié)晶硫酸銅溶解在100毫升水中,慢慢將此溶液加入上述溶液中,最后用水稀釋到1升,當溶液不澄清時可過濾之。 2022/10/1231本尼迪特(BENEDICT)試劑 配制:173克檸檬酸鈉和1反應(yīng)原理與斐林試劑略有差別。利用斐林試劑鑒定時,斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應(yīng)生成Cu(OH)2,Cu(OH)2和可溶性還原糖反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀。本尼迪特試劑中Cu(OH)2的產(chǎn)生卻是這樣的:檸檬
10、酸鈉和碳酸鈉均為強堿弱酸鹽,在水中它們均可水解產(chǎn)生OH-,當檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液和CuSO4溶液混合時,Cu2+和OH-結(jié)合,生成Cu(OH)2,Cu(OH)2與葡萄糖中的醛基反應(yīng)生成磚紅色沉淀。 2022/10/1241反應(yīng)原理與斐林試劑略有差別。2022/9/27241雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)雙縮脲試劑:0.1g/ml的NaOH(甲), 0.01g/ml的CuSO4(乙)雙縮脲反應(yīng):H2NOC-NH-CONH2能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因而能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)檢測方法:取蛋清溶液依次加入2mlNaOH和4滴CuSO42022/10/1251雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)雙縮脲試劑:0.1g/ml的NaOH蘇丹和染液脂肪的檢測蘇丹紅即蘇丹染液,為一種工業(yè)染料,具有致癌作用。蘇丹染料還有、和名稱的由來與“蘇丹”國沒有直接關(guān)系,推測是100多年前科學家發(fā)明
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