生殖道標(biāo)本課件

1、生殖道標(biāo)本 Lower Genital Tract Specimens 涉及內(nèi)容一、生殖道標(biāo)本的正常菌群、病原菌及標(biāo)本采集注意事項(xiàng)二、淋病奈瑟菌感染的檢查三、軟下疳性病的檢查四、性病淋巴肉芽腫的檢查五、細(xì)菌性陰道病的檢查六、性傳播衣原體感染的檢查七、性傳播支原體感染的檢查一、全面了解機(jī)體的正常菌群細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定的結(jié)果評價(jià)：正常人群的無菌體液中檢測到細(xì)菌，應(yīng)考慮細(xì)菌為感染的病原體。存在正常菌群的標(biāo)本檢測到細(xì)菌，應(yīng)結(jié)合細(xì)菌的量考慮是否為致病菌。如臨床表現(xiàn)支持感染，但培養(yǎng)陰性，應(yīng)考慮為標(biāo)本不合格、培養(yǎng)不恰當(dāng)?shù)纫蛩?。直接鏡檢找到病原體，而培養(yǎng)陰性，應(yīng)考慮有L細(xì)菌、厭氧菌或苛氧菌感染。宮頸或?qū)m頸內(nèi)部

2、：淋病奈瑟菌，沙眼衣原體，人乳頭瘤病毒陰道高位拭子：酵母菌，陰道毛滴蟲，細(xì)菌性陰道感染肛門或直腸拭子：淋病奈瑟菌，B群鏈球菌（+陰道拭子）女性下生殖道標(biāo)本采集男性的生殖道致病菌與女性絕大部分一致；尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起；可能并發(fā)于生殖器潰瘍；男性生殖道標(biāo)本：淋病奈瑟氏菌感染 擠壓尿道或直接獲取尿道口分泌物； 直接涂片 如果培養(yǎng)，須直接接種溫暖的篩選性平板，保溫并即刻送微生物室培養(yǎng)。任何不能及時(shí)送檢的生殖道標(biāo)本，都應(yīng)采用運(yùn)送培養(yǎng)基采樣保存。禁止冷藏早發(fā)B群鏈球菌病 1%的新生兒因母親定植（10-30%的孕婦）發(fā)展為EOD（早發(fā)疾?。?50%病死率 25%的美國女性在L&D期

3、間得到預(yù)防 長期病癥包括：在30%以上的新生兒中產(chǎn)生嚴(yán)重精神運(yùn)動發(fā)展障礙Adriaanse et al. Neonatal early onset group B streptococcal infection: a nine-year retrospective study in a tertiary care hospital. J Perinat Med. 1996;24:531538在孕期3537周時(shí)的普查培養(yǎng)陰道和直腸拭子肉湯過夜增菌接種于血平板上再孵育過夜和鑒定可疑菌落任何有GBS菌尿的患者需要在分娩期做好預(yù)防分娩時(shí)快速檢測敏感性不夠二、淋病奈瑟菌感染的檢查 (一)微生物檢驗(yàn)1.用

4、無菌棉拭子取尿道膿液或?qū)m頸膿液和分泌物。抵抗力極低易自溶，應(yīng)立即送檢或床旁自接接種2.取分泌物標(biāo)本涂片染色鏡檢，為革蘭陰性雙球菌，特別是見白細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌，有助于診斷3.抗原檢測 可用EIASA及免疫熒光技術(shù)檢測抗原，對診斷較有幫助。4核酸檢測 PCR檢測DNA片段，快速敏感特異，但要注意假陽性，需結(jié)合臨床進(jìn)行診斷。5分離培養(yǎng)與鑒定 在選擇培養(yǎng)基上見典型菌落鏡檢，氧化酶、糖發(fā)酵等生化試驗(yàn)，熒光抗體試驗(yàn)鑒定確證。6淋病奈瑟菌培養(yǎng)是目前實(shí)驗(yàn)室的金標(biāo)準(zhǔn)。(二)臨床意義1淋病奈瑟菌所致淋病，常見于男性淋菌 性尿道炎(急性和慢性)、附睪炎，前列 腺炎等；女性淋菌性尿道炎、宮頸炎、 陰道炎等；女孩陰道炎和尿道

5、炎，主要 由直接或間接傳染。亦可發(fā)生全身性淋 病(淋菌性菌血癥、淋菌性眼炎和咽炎等)2淋病是目前世界上發(fā)病率最高的性病， 女性易受感染，易發(fā)生在性活躍的中青年。三、軟下疳性病的檢查軟下疳性病是由杜克嗜血桿菌感染引起生殖器疼痛性潰瘍及所屬淋巴結(jié)化膿性病變的性傳播疾病。 (一)采集潰瘍膿液或分泌物為標(biāo)本。 (二)微生物檢驗(yàn) 1標(biāo)本直接涂片染色，呈鏈狀或“魚 群狀排列G-菌，可初步診斷。2PCR 檢測病原菌核酸、快速敏感特異、有助于診斷。 3分離培養(yǎng)與鑒定 可選用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，可見典型菌落。再經(jīng)涂片染色鏡檢和生化反應(yīng)鑒定，可明確診斷。4軟下疳實(shí)驗(yàn)室檢查的金標(biāo)準(zhǔn)為培養(yǎng)加PCR檢測。(三)臨床意義1本

6、病性交傳染，間接傳染少見。多見 于女性，男女比1：2，但男性病人癥 狀重。病變多在外生殖器，也可播散 到其他部位的皮膚和粘膜。2軟下疳發(fā)生12周后，有1030 患者出現(xiàn)一側(cè)腹股溝淋巴結(jié)炎和淋巴 結(jié)周圍炎稱橫痃。四、性病淋巴肉芽腫的檢查(一)微生物檢驗(yàn) 性病淋巴肉芽腫的病原體是性病淋巴肉芽腫衣原體。實(shí)驗(yàn)室的金標(biāo)準(zhǔn)是分離培養(yǎng)加PCR。1.取淋巴結(jié)膿液或?qū)m頸和直腸拭子或活檢材料為標(biāo)本：2.標(biāo)本直接涂片作Giemsa染色檢查衣原體及其包涵體；熒光抗體(DFA)染色檢測細(xì)胞內(nèi)衣原體包涵體3抗原檢測 用熒光抗體(DFA)染色檢測抗原 酶免疫檢測(EIA)衣原體可溶抗原4PCR檢測沙眼衣原體DNA敏感性、特

7、異性達(dá)100和93，可用于早期診斷;5分離培養(yǎng) 可用雞胚培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)和動物接種方法,分離培養(yǎng)病原體，涂片染色鏡檢，免疫熒光檢測、生化反應(yīng)作鑒定;6抗體檢測 檢測補(bǔ)體結(jié)合抗體，效價(jià)達(dá)l：64有診斷意義；微量免疫熒光試驗(yàn)可測抗體，滴度1：512有意義。(二)臨床意義 這是一種由衣原體引起的人類的接觸性感染的性病。主要發(fā)生在熱帶及近熱帶地區(qū)。最普遍的癥狀是腹股溝腺炎的病灶。慢性癥狀為直腸炎，可以引起直腸狹窄，肛門和陰道瘺管膿腫。在發(fā)病的過程中出現(xiàn)全身癥狀，發(fā)熱、頭痛、發(fā)冷。 五、細(xì)菌性陰道病的檢查(一)微生物檢驗(yàn)1.由陰道加特納菌引起的生殖道性傳播疾病。2.采集陰道分泌物及感染部位的標(biāo)本3.直接涂

8、片染色鏡檢，可觀察到線索細(xì)胞，有大量多形性G-桿菌,實(shí)驗(yàn)室檢查的金標(biāo)準(zhǔn)。4陰道分泌物pH和胺試驗(yàn) pH45；標(biāo)本中滴加10KOH 1滴即可發(fā)出魚腥味為陽性。5分離培養(yǎng)與鑒定 將陰道分泌物接種于人血平板作培養(yǎng)，48h后觀察菌落特征，同時(shí)作生化試驗(yàn)等進(jìn)行鑒定。(二)臨床意義1主要是陰道內(nèi)乳酸桿菌受抑制，厭氧菌大量生長繁殖，而發(fā)生混合性感染的細(xì)菌性陰道病。可分解氨基酸產(chǎn)胺而發(fā)生魚腥味，亦使pH上升。2主要引起細(xì)菌性陰道病，也可引起產(chǎn)后感染，流產(chǎn)等婦科疾病。3分離培養(yǎng)一般不用，因20- 40正常婦女陰道中也可檢出此菌，應(yīng)結(jié)合臨床。六、性傳播衣原體感染的檢查(一)微生物檢驗(yàn)?zāi)壳皩?shí)驗(yàn)室檢查衣原體的金標(biāo)準(zhǔn)是

9、培養(yǎng)加PCR。1.用無菌棉拭子采集宮頸、男性尿道分泌物或病變部位活檢標(biāo)本。2.直接顯微鏡檢查 涂片Giemsa染色鏡檢，見上皮細(xì)胞包涵體有診斷價(jià)值，原體呈紫紅色或紅色，始體為藍(lán)色或暗藍(lán)色。免疫熒光檢查：用直接法熒光抗體(DFA)染色檢查細(xì)胞內(nèi)有典型的衣原體包涵體；3.抗原檢測 ELISA檢測衣原體特異性抗原。具有快速敏感特異性高的特點(diǎn)。4核酸檢測 PCR和LCR法：檢查分泌物和尿標(biāo)本中衣原體DNA片斷，快速敏感特異。5分離培養(yǎng)與鑒定 有細(xì)胞培養(yǎng)(Hela細(xì)胞)、雞胚卵黃囊和小白鼠(腹腔、腦內(nèi)、鼻腔內(nèi))接種三種方法，取培養(yǎng)細(xì)胞涂片、Giemsa和碘染色鏡檢、熒光抗體染色、ELISA、PCR等進(jìn)是

10、測特異性抗體，也可對分離出的病原體進(jìn)行血清學(xué)分型。(三)臨床意義1沙眼衣原體沙眼生物變種有18個血清型，D-K型引起NGU (非淋球菌性尿道炎) ；A、D、B引起沙眼。2由衣原體引起的性傳播疾病，發(fā)病率呈明顯上升趨勢，引起全世界重視，并將此列為獨(dú)立的性傳播疾病。?？梢鹋圆辉?、男性不育癥。此病常臨床癥狀輕或隱性感染。七、性傳播支原體感染的檢查(一)微生物檢驗(yàn)1.取宮頸分泌物、男性分泌物和無菌中段尿或感染部位標(biāo)本。2.將標(biāo)本涂片、革蘭染色或Giemsa染色鏡檢。因支原體無固定形態(tài),故意義不大。3.PCR檢測支原體DNA,敏感性特異性均高，且快速，但應(yīng)避免假陽性。4.支原體營養(yǎng)要求高，選用選擇培

11、養(yǎng)基培養(yǎng),可見典型呈“油煎蛋狀”菌落，為陽性。目前實(shí)驗(yàn)室檢查的金標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)菌培養(yǎng)。(二)臨床意義1解脲脲原體為條件致病菌，故應(yīng)結(jié)合臨床考慮診斷和治療。2NGU(非淋球菌性尿道炎)并非都由沙眼衣原體和支原體所引起，還有其他微生物可引起，因此應(yīng)結(jié)合臨床考慮診斷及治療。3.支原體所致的STD（性傳播疾病）呈上升趨勢，應(yīng)引起重視。也引起女性不孕、習(xí)慣性流產(chǎn)不育等危害。正確評價(jià)細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果女性陰道與宮頸分泌物標(biāo)本不常規(guī)接種血平板做普通細(xì)菌培養(yǎng)因?yàn)橐鹋陨车栏腥镜牟≡w多數(shù)不能通過普通的細(xì)菌培養(yǎng)獲得應(yīng)根據(jù)臨床癥狀選擇相應(yīng)的檢測方法 -膿性白帶（淋?。毫懿∧紊囵B(yǎng)； -稀薄、淡黃色、泡沫樣白帶（滴蟲性陰道病）：鏡檢觀察蟲體 -外陰搔癢，豆腐渣樣分泌物（真菌性陰道?。喊讕хR檢查真菌 孢子和菌絲 -乳白色均質(zhì)分泌物（細(xì)菌性陰道?。?：鏡檢線索細(xì)胞，生化檢查細(xì)菌培養(yǎng)的意義培養(yǎng)陽性感