血液學(xué)檢驗基礎(chǔ)培訓(xùn)課件

1、一、基本概念血液學(xué)（Hematology）是研究造血組織及血細(xì)胞的發(fā)生、演化的病理和生理過程的科學(xué)。2. 臨床血液學(xué)檢驗（Clinic Hematology）：研究血液系統(tǒng)病的病理改變和血液病實驗診斷的科學(xué)。一、基本概念血液學(xué)（Hematology）是研究造血組織及血血液的基本組成 紅細(xì)胞 血細(xì)胞 白細(xì)胞 (45%) 血小板血液 固體成分 血 漿 (55%) 水 分血液的基本組成三系3三系3血細(xì)胞發(fā)育成熟形態(tài)變化規(guī)律胞體:大小:由大變小，只有巨核細(xì)胞相反，越成熟胞體越大，早幼粒細(xì)胞也可較原粒細(xì)胞大。外形：紅細(xì)胞系始終呈圓形；粒細(xì)胞及淋巴經(jīng)胞系始終保持圓形或橢圓形；單核細(xì)胞系由圓形或橢圓形變?yōu)椴?/p>

2、規(guī)則形；巨核細(xì)胞系由圓形變?yōu)槊黠@不規(guī)則形。4血細(xì)胞發(fā)育成熟形態(tài)變化規(guī)律胞體:4胞核大?。河纱笞冃?。巨核細(xì)胞則由小變大；成熟紅細(xì)胞則無核。核形：一般由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。紅系由圓形最后脫核消失；粒系由圓形到一側(cè)出現(xiàn)凹陷，最后為桿狀或分葉狀；淋巴及漿細(xì)胞系核形保持不變；單核細(xì)胞則由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形；巨核細(xì)胞核逐漸增大并分葉，呈不規(guī)則堆疊。血細(xì)胞發(fā)育成熟形態(tài)變化規(guī)律5胞核血細(xì)胞發(fā)育成熟形態(tài)變化規(guī)律5染色質(zhì)：由細(xì)致疏松變?yōu)榇植诿芗?，其著色隨DNA含量增加而藍變?yōu)闇\紅色；淋巴洗胞及單核細(xì)胞系保持淺藍或灰藍色不變；漿細(xì)胞系則由灰藍色變?yōu)樯钏{色。顆粒：從無到有，由非特異性到特異性。粒系統(tǒng)原始階段一般無顆粒，早

3、幼階段出現(xiàn)非特異性嗜天青顆粒，中幼以后各階段為大量特異性顆粒；淋巴細(xì)胞顆粒較少，部分細(xì)胞可含少量非特異性顆粒；紅細(xì)胞系胞漿內(nèi)無顆粒。胞核與胞漿體積之比: 一般由大到小。 血細(xì)胞發(fā)育成熟形態(tài)變化規(guī)律6染色質(zhì)：由細(xì)致疏松變?yōu)榇植诿芗?，其著色隨DNA含量增加而藍變紅細(xì)胞檢查紅細(xì)胞計數(shù)及血紅蛋白測定紅細(xì)胞形態(tài)檢查紅細(xì)胞比容測定紅細(xì)胞平均指數(shù)計算網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)紅細(xì)胞檢查紅細(xì)胞計數(shù)及血紅蛋白測定 紅細(xì)胞的起源、發(fā)育及衰亡 原紅 早幼紅 中幼紅 晚幼紅 網(wǎng)織紅 RBC 衰亡72h48h120d衰亡的RBC珠蛋白鐵膽色素參與再造血參與膽紅素代謝 紅細(xì)胞的起源、發(fā)育及衰亡 原紅 血紅蛋白的結(jié)構(gòu) 原卟啉 血紅素

4、（亞鐵） 鐵離子血紅蛋白 鏈（2條） 珠蛋白 非鏈（2條）血紅蛋白的結(jié)構(gòu) 參考值： 血紅蛋白（Hb） 紅細(xì)胞（RBC） 男: 120160 g/L （4.05.5)1012/L 女: 110150 g/L （3.55.0)1012/L新生兒: 170200 g/L (6.07.0)1012/L紅細(xì)胞和血紅蛋白的檢測10參考值：紅細(xì)胞和血紅蛋白的檢測10臨床意義：（一）紅細(xì)胞和血紅蛋白增多（1）相對性RBC增多： 連續(xù)嘔吐，反復(fù)腹瀉，大面積燒傷。（2）絕對性RBC增多： 繼發(fā)性：代償性增生：生理因素、精神因素、高山居民和登山運動員、重體力勞動者及長期多次獻血者、慢性肺心病、嚴(yán)重的肺氣腫、紫紺型、

5、先天性心肺病發(fā)非代償性增生：某些腫瘤、腎病患者 原發(fā)性：真性RBC增多癥11臨床意義：（一）紅細(xì)胞和血紅蛋白增多11 輕度：男：120g/LHb90g/L 女：110g/LHb90g/L； 中度：90g/LHb60g/L； 重度：60g/LHb30g/L； 極重度：Hb30g/L。（1）生理性： （2）病理性： 妊娠中后期的孕婦 生成減少 6個月至2歲的嬰幼兒 破壞過多 老年人（造血功能減退） 失血（二）紅細(xì)胞和血紅蛋白減少 貧血12 （二）紅細(xì)胞和血紅蛋白減少 貧血12貧血發(fā)病機制和病因分類紅細(xì)胞生成減少性貧血造血干祖細(xì)胞異常造血調(diào)節(jié)異常造血原料不足利用障礙 紅細(xì)胞破壞過多貧血失血性貧血溶血

6、性貧血出凝血性疾病非出凝血性疾病貧血發(fā)病機制和病因分類紅細(xì)胞生成減少性貧血造血干祖細(xì)胞正常紅細(xì)胞14正常紅細(xì)胞14二紅細(xì)胞的異常形態(tài)檢查 （一）紅細(xì)胞大小改變： 1小紅細(xì)胞：缺鐵性貧血、 遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。2大紅細(xì)胞：溶血性貧血及巨幼紅細(xì)胞性貧血。3巨紅細(xì)胞和超巨紅細(xì)胞 ：巨幼細(xì)胞貧血。4紅細(xì)胞大小不均： 嚴(yán)重的增生性貧血。15二紅細(xì)胞的異常形態(tài)檢查 （一）紅細(xì)胞大小改變： 15紅細(xì)胞大小異常16紅細(xì)胞大小異常16紅細(xì)胞大小不均17紅細(xì)胞大小不均17（二）紅細(xì)胞形態(tài)改變：1.球形紅細(xì)胞：見于遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。2.橢圓形紅細(xì)胞：見于遺傳性橢圓紅細(xì)胞增多癥。3.口形紅細(xì)胞：遺傳性口形R

7、BC增多癥、DIC、酒精中毒。 4.靶形紅細(xì)胞：缺鐵性貧血、地中海貧血5.鐮形紅細(xì)胞：存在異常Hb(HbS)。6.紅細(xì)胞形態(tài)不整：常見于巨幼細(xì)胞性貧血。7.棘細(xì)胞：見于脂蛋白缺乏的病人。8.裂片細(xì)胞：DIC、溶血性貧血、重型地中海貧血9.緡錢狀形成：原發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥18（二）紅細(xì)胞形態(tài)改變：1.球形紅細(xì)胞：見于遺傳性球形紅細(xì)胞增球形、橢圓形、口形、棘形RBC19球形、橢圓形、口形、棘形RBC19裂片、淚滴、棘形、盔形、鐮形RBC20裂片、淚滴、棘形、盔形、鐮形RBC20靶形、半島形、半月形、拖鞋形、環(huán)形 21靶形、半島形、半月形、拖鞋形、環(huán)形 21 紅細(xì)胞聚集 緡錢狀聚集 22 紅細(xì)

8、胞聚集 緡錢狀聚集 22（三）紅細(xì)胞內(nèi)的異常結(jié)構(gòu)：1、堿性點彩紅細(xì)胞：見于鉛中毒2、染色質(zhì)小體：巨幼貧、溶貧及脾切除后3、卡波氏環(huán)：溶貧、巨幼貧、鉛中毒等4、有核紅細(xì)胞：溶貧及珠蛋白生成障礙性貧血23（三）紅細(xì)胞內(nèi)的異常結(jié)構(gòu)：1、堿性點彩紅細(xì)胞：見于鉛中毒23染色質(zhì)小體、卡波氏環(huán)、嗜堿點彩紅細(xì)胞24染色質(zhì)小體、卡波氏環(huán)、嗜堿點彩紅細(xì)胞24有核紅細(xì)胞(NRBC)：25有核紅細(xì)胞(NRBC)：25EoBaMoNeLyNRBC修正的WBC修正后WBC#&NRBC扣除扣除修正WBC修正分類扣除26EoBaMoNeLyNRBC修正的WBCNRBC扣除扣除修正缺鐵性貧血27缺鐵性貧血27巨幼性貧血28巨幼

9、性貧血28溶血性貧血29溶血性貧血29再生障礙性貧血30再生障礙性貧血30網(wǎng)織紅細(xì)胞（Ret）的檢測： 成人：0.0050.015 ( 0.5%1.5% ) 絕對值：(2484)109 / L新生兒： 0.030.06 ( 3%6% )31網(wǎng)織紅細(xì)胞（Ret）的檢測： 成人：0.0050.015(一)網(wǎng)織紅細(xì)胞測定:1反映骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)造血情況： Ret增多:見于溶血性貧血、急性失血性貧血； Ret降低:見于再生障礙性貧血。 2貧血療效觀察： 治療有效網(wǎng)織紅細(xì)胞增多； 治療無效網(wǎng)織紅細(xì)胞無增長。 3結(jié)合紅細(xì)胞數(shù)量、血紅蛋白量以及紅細(xì)胞形 態(tài)，可初步作出貧血的形態(tài)學(xué)診斷。32(一)網(wǎng)織紅細(xì)胞測定

10、:1反映骨髓紅細(xì)胞系統(tǒng)造血情況：32MFRHFRLFRPLT-ORBC-ORETWBCRET 散點圖SFLFSCMFRHFRLFRPLT-ORBC-ORETWBCRET 散(二)網(wǎng)織紅細(xì)胞的擴展參數(shù)34(二)網(wǎng)織紅細(xì)胞的擴展參數(shù)34網(wǎng)織紅細(xì)胞報告參數(shù)RET%: 網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比RET#: 網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)IRF: 未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比LFR: 低熒光強度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率MFR: 中熒光強度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率HFR: 高熒光強度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率RET-He網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量PLTO 光學(xué)血小板數(shù) RBCO 光學(xué)紅細(xì)胞數(shù)IPF 幼稚血小板比率網(wǎng)織紅細(xì)胞報告參數(shù)RET%: 網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比紅細(xì)胞比容和有

11、關(guān)參數(shù)的應(yīng)用（一）HCT/PCV紅細(xì)胞在血液中所占體積的百分比【參考值】 男：0.400.50 (40%50% ) 女：0.370.47 (37%47% )【臨床意義】1紅細(xì)胞比積增多：真紅、血液濃縮。2紅細(xì)胞比積下降：各種貧血。3臨床上常以紅細(xì)胞數(shù)、Hb量來計算幾種紅細(xì)胞的平均值，有助于貧血和鑒別診斷。36紅細(xì)胞比容和有關(guān)參數(shù)的應(yīng)用（一）HCT/PCV紅細(xì)胞在血（二）三種紅細(xì)胞平均值的計算：1紅細(xì)胞平均體積（MCV） MCVPCVRBC2紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MCH） MCHHbRBC3紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC） MCHCHbPCV37（二）三種紅細(xì)胞平均值的計算：1紅細(xì)胞平均體積（

12、MCV）3【臨床意義】貧血的形態(tài)學(xué)分類類型RBCHGBHCTMCVMCHMCHC病因正C正色素NNNAA、急性失血、溶血、白血病等大C正色素 NN巨幼細(xì)胞貧血小C正色素N/ N慢性炎癥、尿毒癥、肝病、腎病小C低色素N/ 缺鐵貧、珠蛋白生成障礙性貧血等38【臨床意義】貧血的形態(tài)學(xué)分類類型RBCHGBHCTMCVMC（三）紅細(xì)胞體積分布寬度39（三）紅細(xì)胞體積分布寬度394040（二）臨床意義：用于貧血的鑒別診斷 1、小細(xì)胞貧血 2、大細(xì)胞貧血 3、正細(xì)胞性貧血 41（二）臨床意義：用于貧血的鑒別診斷 1、小細(xì)胞貧血 2、大42424343RBC/PLT通道 雙鞘流 浮動界標(biāo)RDW-SD 假設(shè)峰值

13、高度為100%，在20%頻率水平上的分布寬度即為RDW-SD。單位用fL 表示。RDW-CV 點L1和L2在總分布區(qū)域中的出現(xiàn)頻率為68.26%，使用下列方程計算RDW-CV=（L2 - L1）/（L2 +L1）HCT由脈沖信號累積計算得出MCV/MCH/MCHC為計算參數(shù)44RBC/PLT通道RDW-SDRDW-CVHCT由脈沖信號累血細(xì)胞直方圖的臨床應(yīng)用45血細(xì)胞直方圖的臨床應(yīng)用45（二）紅細(xì)胞體積分布直方圖顯示范圍：24360fL（MCV：80100fL）相關(guān)參數(shù)：MCV、RDW幾種貧血的圖形變化：1、缺鐵性貧血：小C非均一性2、珠蛋白生成障礙性貧血：小C均一性3、鐵粒幼細(xì)胞性貧血、缺鐵

14、貧治療后：雙峰4、巨幼貧：大C非均一性5、混合性營養(yǎng)性貧血：RDW明顯增高46（二）紅細(xì)胞體積分布直方圖顯示范圍：24360fL（MCV（三）血小板直方圖分布范圍：220fL反映參數(shù)：PLT、MPV、PDW、PCV高位干擾：小RBC、大血小板聚集低位干擾：電流、塵埃等47（三）血小板直方圖分布范圍：220fL47病例討論：患者女性、31歲，在過去5年中反復(fù)發(fā)生貧血，曾間斷輸血。肌肉內(nèi)鐵劑注射治療前后，見血象如下圖。RBC 3.05; HGB 58; HCT 0.199; MCV 65.4; MCH 19.0; MCHC 291; PLT 757.0RBC 4.15; HGB 93; HCT 0

15、.289; MCV 69.6; MCH 22.4; MCHC 322; PLT 248.048病例討論：患者女性、31歲，在過去5年中反復(fù)發(fā)生貧血，曾WBC的檢測： （一）白細(xì)胞計數(shù)：成人： （410）109/ L 兒童： （512）109/ L 新生兒：（1520）109/ L 中性桿狀核細(xì)胞： 1 5% (0.040.5)109/ L 中性分葉核細(xì)胞：50 70% （2.07.0）109/ L 淋巴細(xì)胞： 20 40% （0.84.0）109/ L 單核細(xì)胞： 3 8% （0.120.8）109/ L 嗜酸粒細(xì)胞： 0.5 5% （0.050.5）109/ L 嗜堿粒細(xì)胞： 0 1% （0

16、0.1）109/ L 49WBC的檢測： （一）白細(xì)胞計數(shù)：成人： （410）1白細(xì)胞分類50白細(xì)胞分類50 骨髓(10-12d) 血液 組織10-12h1-3d組織衰亡中性粒細(xì)胞動力學(xué)原粒早 幼粒中幼粒晚 幼粒桿狀核分 葉核循環(huán)池邊緣池成熟池分裂池貯備池生長成熟池干細(xì)胞池 骨髓(10-12d) （二）中性粒細(xì)胞：1中性粒系統(tǒng)增多：反應(yīng)性增多： 急性感染 中毒 嚴(yán)重的組織損傷 惡性腫瘤 急性大出血、溶血 器官移植等異常增生性增多：血液病生理性增多：分娩、運動后、溫度刺激52（二）中性粒細(xì)胞：1中性粒系統(tǒng)增多：522 中性粒系統(tǒng)減少：某些感染：G-桿菌、病毒感染造血功能異常：AA化學(xué)藥品及放射損

17、害：自身免疫性疾?。篠LE單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)功能亢進：脾亢532 中性粒系統(tǒng)減少：某些感染：G-桿菌、病毒感染533中性粒系統(tǒng)的核象變化：核左移-外周血中中性桿狀核粒細(xì)胞增多（0.06），甚至出現(xiàn)晚幼粒，中幼粒、早幼粒、原粒等更幼稚的細(xì)胞。核右移-正常人血中中性粒細(xì)胞以三葉核者為主，若五葉核以上者超過3，或中性分葉過多，大部分以4-5葉或更多。543中性粒系統(tǒng)的核象變化：核左移-外周血中中性桿狀核粒核左移55核左移55左移程度WBCNEU粒細(xì)胞形態(tài)診斷輕度輕度輕度桿狀C 6%感染較輕抵抗力強中度桿狀C10%伴中、晚幼粒C感染嚴(yán)重重度或不桿狀C25%感染更嚴(yán)重如類白血病易見于嬰幼兒56左移程度W

18、BCNEU粒細(xì)胞形態(tài)診斷輕度輕度輕度桿狀C 核右移 常伴白細(xì)胞總數(shù)下降，為骨髓造血功能衰退或缺乏造血物質(zhì)所致。 常見于巨幼紅細(xì)胞貧血、惡性貧血、抗代謝藥物應(yīng)用后。 若在疾病進行期出現(xiàn)核右移，則提示預(yù)后不良。57核右移 常伴白細(xì)胞總數(shù)下降，為骨髓造血功能衰退或缺乏造血物質(zhì)4中性粒細(xì)胞形態(tài)異常：1、中毒性改變： 1）細(xì)胞大小不均：慢性炎癥 2）中毒顆粒 3）空泡形成 4）杜勒小體 5）核變性2、巨多分葉核中性粒細(xì)胞：巨幼貧、 應(yīng)用抗代謝藥物后3、棒狀小體：急性白血病4、其他：與遺傳相關(guān)的異常變化584中性粒細(xì)胞形態(tài)異常：1、中毒性改變：581、嗜酸粒細(xì)胞增多：過敏性疾病 寄生蟲病 皮膚病 血液病某

19、些惡性腫瘤 某些傳染病 其它：腎上腺皮質(zhì)功能減低 2、嗜酸粒細(xì)胞減少： 見于傷寒、副傷寒、嚴(yán)重?zé)齻?、休克及?yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺皮質(zhì)激素后。（三）嗜酸粒細(xì)胞（EOS）591、嗜酸粒細(xì)胞增多：（三）嗜酸粒細(xì)胞（EOS）59EOS計數(shù)可應(yīng)用于以下方面：1、觀察急性傳染病的預(yù)后： 急性感染：腎上腺皮質(zhì)激素增加，EOS減少；感染恢復(fù)：腎上腺皮質(zhì)激素減少，EOS增加。2、觀察手術(shù)和燒傷病人的預(yù)后： 術(shù)后（或燒傷）4小時后嗜酸粒細(xì)胞 下降，甚至消失，48小時后上升。3、測定腎上腺皮質(zhì)功能。60EOS計數(shù)可應(yīng)用于以下方面：1、觀察急性傳染病的預(yù)后：60（四）嗜堿性粒細(xì)胞（BASO）1、嗜堿性粒細(xì)胞增多

20、：（1）過敏性疾?。?）血液?。?）惡性腫瘤（4）其他：DM、傳染病等2、嗜堿性粒細(xì)胞減少：無臨床意義61（四）嗜堿性粒細(xì)胞（BASO）1、嗜堿性粒細(xì)胞增多：61（五）淋巴細(xì)胞（LYM）：1、LYM增多：感染性疾病腫瘤性疾病急性傳染病恢復(fù)期移植排斥反應(yīng)2、LYM減少：62（五）淋巴細(xì)胞（LYM）：1、LYM增多：623、異形淋巴細(xì)胞：a.型 泡沫型 b.型 不規(guī)則型 c.型 幼稚型633、異形淋巴細(xì)胞：a.型 泡沫型 b.型 不規(guī)則型 （六）單核細(xì)胞（MONO）:1、MONO增多：生理性：嬰幼兒某些感染：某些血液病：2、MONO減少：無臨床意義64（六）單核細(xì)胞（MONO）:64類白血病與慢粒

21、的鑒別類白血病反應(yīng)慢粒明確病因有無臨床表現(xiàn)原發(fā)病癥狀明顯消瘦、乏力、低熱、脾大WBC計數(shù)及分類30100*109/L、分葉、桿狀居多、原粒少見常100*109/L、可見各階段細(xì)胞，與骨髓象相似BASO、EOS不增多常增多粒細(xì)胞中毒性改變常明顯不明顯RBC、PLT無明顯變化早期RBCPLT后期均骨髓象無明顯變化極度增生、粒系增生顯著中性粒堿性磷酸酶積分顯著增高積分顯著降低，甚至為0Ph染色體無可見于90%以上病例65類白血病與慢粒的鑒別類白血病反應(yīng)慢粒明確病因有無臨床表現(xiàn)原發(fā)DIFF通道4DL 完全溶解紅細(xì)胞血小板 在白細(xì)胞膜上打孔有大分子有機酸增強EOS染色4DS 對核酸染色縱坐標(biāo)：側(cè)向熒光（

22、SFL） 反應(yīng)核酸含量橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（SSC） 反應(yīng)細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度檢測參數(shù)：WBCD，NB,，L ,， MO ,，EO L, ,，66DIFF通道檢測參數(shù)：WBCD，NB,，L ,，WBC/BASO通道STROMATOLYSER-FB 低滲、強酸溶血素完全溶解紅細(xì)胞除嗜堿細(xì)胞以外的白細(xì)胞溶解為裸核嗜堿細(xì)胞保持原狀檢測參數(shù)：WBCBBASO，縱坐標(biāo)：前向散射光（FSC） 反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（SSC） 反映細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度嗜堿其他WBC67WBC/BASO通道嗜堿其他WBC67原理IG可報告參數(shù) IG#/% 通過美國FDA批準(zhǔn)IG: 未成熟粒細(xì)胞 Promelocyte, M

23、yelocyte, Metamyelocyte68原理IG可報告參數(shù) IG#/% 通過美國FDA批準(zhǔn)68Conventional AlgorithmNew AlgorithmIG 檢測區(qū)域固定的門可變的門IG檢測原理69Conventional AlgorithmNew AlgoHPC可報告參數(shù)HPC#HPC: Hematopietic progenitor cellFDA clearedIMI-ch70HPC可報告參數(shù)HPC#70 幼稚粒細(xì)胞表面脂質(zhì)含量比成熟粒細(xì)胞少 成熟粒細(xì)胞更易被表面活性劑破壞 幼稚粒細(xì)胞部分受損，含硫氨基酸進入細(xì)胞形成保護層成熟粒細(xì)胞幼稚粒細(xì)胞Lipid- Cholesterol- Phospho Lipid- Glyco LipidSuper SurfactantAmino AcidHPC檢測原理IMI通道 （1）試劑原理 幼