病理學第二章4植物病毒與類病毒課件

1、2 植物病毒與類病毒2.1 植物病毒公元10世紀（北宋），人工免疫預防天花（中國）；1798，英國人Edward Jenner發(fā)明牛痘疫苗；1576 荷蘭人Charles de Lieclase描述郁金香雜色；1886 Mayer, 傳毒實驗（TMV）；1892 Ivanovski (俄) 發(fā)現(xiàn)TMV的致病因子能穿過細菌過濾器；1898 Beijerinch(荷蘭)，病毒學之父，提出病原不是細菌，而是“可過濾性病毒” 1935 Stanley TMV蛋白結(jié)晶，獲諾貝爾獎。病理學第二章4植物病毒與類病毒2 植物病毒與類病毒2.1 植物病毒病理學第二章4植物病毒與病理學第二章4植物病毒與類病毒病理

2、學第二章4植物病毒與類病毒2 植物病毒與類病毒2.1 植物病毒1991年，Matthews將其定義為： 病毒是包被在蛋白或脂蛋白保護性衣殼中，只能在適合的寄主細胞內(nèi)完成自身復制的一個或一套基因組的核酸分子。根據(jù)寄主不同，病毒可以分為植物病毒、動物病毒以及噬菌體。病理學第二章4植物病毒與類病毒2 植物病毒與類病毒2.1 植物病毒病理學第二章4植物病毒與2.1 植物病毒病毒又稱分子寄生物，具有以下特點：（1）形體微小，缺乏細胞結(jié)構(gòu)；（2）基因組只含有一種核酸（DNA或RNA）；（3）依靠自身的核酸進行復制；（4）缺乏完整的酶和能量系統(tǒng)；（5）嚴格寄生性的細胞內(nèi)專性寄生物。病毒是一種非細胞形態(tài)的生物

3、。病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒病毒又稱分子寄生物，具有以下特點：病理學第二2.1 植物病毒2.1.1病毒的形態(tài)和化學組成2.1.1.1 形態(tài)一個完整的病毒稱作病毒粒體。主要有3種類型： 線條狀、球狀和桿狀。少數(shù)為彈狀、桿菌狀和雙聯(lián)體狀。病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.1病毒的形態(tài)和化學組成病理學第二章4線狀病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒線狀病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒彈狀病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒彈狀病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒聯(lián)體病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒聯(lián)體病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.1.

4、2 化學組成核酸（RNA/DNA）+蛋白質(zhì)病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.1.2 化學組成病理學第二章4植物病病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.2 病毒的生物學特性2.1.2.1 能增殖 病毒只能在寄主活細胞內(nèi)利用寄主的合成系統(tǒng)、原料和能量來完成它的增殖。增殖需兩個步驟：（1）病毒核酸的復制，從親代向子代病毒傳送核酸性狀的過程，即病毒的基因傳遞；（2）病毒核酸信息的表達，即按照信息RNA的序列來合成病毒專化性蛋白的過程。病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.2 病毒的生物學特性病理學第二章4植病毒粒體侵入寄

5、主細胞脫蛋白質(zhì)外殼復制子代RNARNA+RNA-RNA+RNA+RNA+誘導外殼形成RNA與外殼組裝成新病毒粒體病理學第二章4植物病毒與類病毒病毒粒體侵入寄主細胞脫蛋白質(zhì)外殼復制子代RNARNA+RNA2.1 植物病毒2.1.2.2 具遺傳性和變異性自然發(fā)生人工誘發(fā)：物理輻射或化學誘變等。病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.2.2 具遺傳性和變異性病理學第二章2.1 植物病毒2.1.2.3 具抗原性 抗原（antigens）：一切能在動物體內(nèi)誘導產(chǎn)生抗體的物質(zhì)，都叫抗原。蛋白、蛋白降解物、多糖等?？贵w（antibody）：是動物抵抗外來的抗原而產(chǎn)生的一種物質(zhì)?？寡澹╝nti

6、serum）:含有抗體的血清。血清反應：相應的抗原和抗體在體外相遇時 發(fā)生的凝集反應（團集成絮狀或羽狀）或沉淀反應。專化性 ：A抗原只誘導產(chǎn)生A抗體 A抗原只與A抗體發(fā)生血清反應病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.2.3 具抗原性病理學第二章4植物病2.1 植物病毒2.1.3 病毒的理化特性2.1.3.1失毒溫度（鈍化溫度） 指在10分鐘內(nèi)使病毒失去活力的最低溫度.如:TMV，90-95；CMV，60-702.1.3.2 稀釋終點 指病毒汁液保持有致病力的最大稀釋倍數(shù)。TMV：100000倍 CMV：10000倍2.1.3.3 體外保毒期 指病組織汁液在室溫（ 20-22）下

7、保持侵染力的最長時間。TMV：30天以上 CMV：3-4天病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.3 病毒的理化特性病理學第二章4植物2.1 植物病毒2.1.4 病毒的分類和命名 2.1.4.1 分類地位 病毒界（非細胞生物界）病毒分類的依據(jù)：（1）構(gòu)成病毒基因組的核酸類型（DNA或RNA);（2）核酸是單鏈還是雙鏈；（3）病毒粒體是否存在脂蛋白包膜；（4）病毒形態(tài)；（5）核酸分段狀況。病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.4 病毒的分類和命名病理學第二章4植2.1 植物病毒2.1.4.2 病毒的命名俗名法、數(shù)碼法、拉丁雙名法俗名法：寄主英文俗名 + 癥狀 + 病

8、毒二字香蕉花葉病毒：Banana mosaic virus，BMV黃瓜花葉病毒：Cucumber mosaic virus， CMV病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.4.2 病毒的命名病理學第二章4植物2.1 植物病毒2.1.5 病毒的移動和傳播 植物病毒從一株植物轉(zhuǎn)移或擴散到其它植物的過程稱為傳播，而從植株的一個局部到另一局部的過程成為移動。2.1.5.1 病毒的移動 大部分植物病毒的長距離移動是通過植物的韌皮部進行。病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.5 病毒的移動和傳播病理學第二章4植系統(tǒng)侵染的病毒在葉片組織中的分布是不均勻的。一般來講植物旺盛生長的

9、分生組織很少含有病毒，如莖尖、根尖。病理學第二章4植物病毒與類病毒系統(tǒng)侵染的病毒在葉片組織中的分布是不均勻的。一般來講植物旺盛2.1 植物病毒2.1.5.2 病毒的傳播方式（1） 機械傳染（汁液接觸傳染） 部分花葉型病毒。（2） 媒介昆蟲傳染 刺吸式口器昆蟲，如：蚜蟲、葉蟬、飛虱、木虱 根據(jù)獲得傳毒能力需要的時間和保持傳毒能力的時間，可將由昆蟲傳染的病毒分為三類：病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.5.2 病毒的傳播方式病理學第二章42.1 植物病毒非持久性病毒：所需得毒飼育時間短。 口針上唾液 小于4小時 一些花葉型以及易用汁液摩擦方法接種的病毒。半持久性病毒：得毒飼育時間

10、長可以提高傳毒能力，并且得毒的昆蟲需要經(jīng)過一定的循廻期才能傳毒。循廻期：從病毒進入昆蟲口器到昆蟲唾液中出現(xiàn)病毒所需要的時間。 口針中腸 血淋巴唾液腺唾液中 10100小時，多是黃化或卷葉型病毒持久性病毒：與半持久性病毒相似，昆蟲可終身或經(jīng)卵傳毒。 唾液中長于100小時病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒非持久性病毒：所需得毒飼育時間短。病理學第二2.1 植物病毒（3） 種子傳播 豆科、葫蘆科、菊科的種子可以帶毒。（4） 土壤傳播 線蟲：矛線目 真菌：壺菌目和根腫菌目（5） 菟絲子傳播 寄生性種子植物（6） 嫁接傳播 只要寄主能進行嫁接的均可傳播，尤其是對于果樹。病理學第二章4植物病毒

11、與類病毒2.1 植物病毒（3） 種子傳播病理學第二章4植物病毒與類病2.1 植物病毒2.1.6 病害癥狀2.1.6.1 病害癥狀特點（1） 無病征，多數(shù)是系統(tǒng)性侵染。（2） 抑制性病狀 花葉、黃化、矮縮、皺縮、蕨葉病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.6 病害癥狀病理學第二章4植物病毒與病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類

12、病毒2.1 植物病毒（3） 壞死性病狀 斑點、斑紋、頂芽壞死病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒（3） 壞死性病狀病理學第二章4植物病毒與類病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒番木瓜環(huán)斑病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒番木瓜環(huán)斑病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.6.2 病害癥狀類型根據(jù)癥狀和傳染方式劃分（1） 花葉類型病毒病A 表現(xiàn)花葉癥狀 B 可機械傳染，絕大多數(shù)可由蚜蟲傳染 C 存在于寄主薄壁細胞組織中病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.6.2 病害癥狀

13、類型病理學第二章4病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒（2）黃化類型病毒病A 不表現(xiàn)花葉癥狀B 不可機械傳染，主要由葉蟬、飛虱、木虱 傳染C 存在于寄主韌皮部病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒（2）黃化類型病毒病病理學第二章4植物病毒與2.1 植物病毒2.1.7 植物病毒的診斷2.1.7.1 癥狀觀察（1）外部癥狀：花葉型，黃花型 鑒別寄主：指用來鑒別某一病毒或其株系的具有特定反應的植物。 凡是病毒侵染后能產(chǎn)生快而穩(wěn)定、并具有特征性癥狀的植物都可作為鑒別寄主。組合使用幾種或一套鑒別寄主稱為鑒別寄主譜。病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物

14、病毒2.1.7 植物病毒的診斷病理學第二章4植物2.1 植物病毒（2）內(nèi)部癥狀：內(nèi)含體和結(jié)晶體 植物病毒基因組的翻譯產(chǎn)物（病毒編碼的復制酶、病毒的外殼蛋白、運動蛋白、傳播輔助蛋白、蛋白酶等）會與病毒的核酸、寄主的蛋白等物質(zhì)聚集起來，形成一定的大小和形狀，稱內(nèi)含體病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒（2）內(nèi)部癥狀：內(nèi)含體和結(jié)晶體病理學第二章42.1 植物病毒（3）癥狀變化 環(huán)境條件可以改變或抑制癥狀的表現(xiàn)。 煙草花葉病毒病在35以上或10以下不呈現(xiàn)花葉病癥狀。隱癥現(xiàn)象： 因環(huán)境條件不適，癥狀暫時消失的現(xiàn)象。病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒（3）癥狀變化病理學第二章4植物病

15、毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.7.1 病原鑒定 （1）植物病毒粒體的穩(wěn)定性 對汁液傳播的病毒，可通過病株汁液的體外性狀（鈍化溫度、稀釋限點和體外存活期）來測定。（2）電鏡觀察 電鏡觀察時，病毒樣品須經(jīng)過負染處理，使病毒粒體表面附著一層重金屬離子，置于特殊的載網(wǎng)和支持膜上，放入電鏡真空樣品室中進行觀察。病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒2.1.7.1 病原鑒定 病理學第二章4植物2.1 植物病毒（3）血清學檢測 利用植物病毒外殼蛋白的抗原特性，制備特異性的抗血清。利用抗原抗體特異性結(jié)合可以鑒定病毒。 A 瓊脂雙擴散法 B 酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme Lnked Immuno S

16、orbent Assay,ELISA）（4） 分子生物學檢測 A 聚合酶鏈式反應（PCR） B 核酸雜交：DNARNA堿基互補關(guān)系。 利用根據(jù)已知序列合成或制備的核苷酸片斷探針是否能與待測核酸雜交，判斷與已知片斷是否有同源性。病理學第二章4植物病毒與類病毒2.1 植物病毒（3）血清學檢測病理學第二章4植物病毒與類病2.2 類病毒 類病毒： 存在于植物中，分子量為1105 Da左右的，具有很高堿基配對的單鏈環(huán)狀植物致病RNA。1971年 首次報道馬鈴薯紡錘塊莖?。≒STVd）病理學第二章4植物病毒與類病毒2.2 類病毒 類病毒：病理學第二章4植物病毒與類病毒2.2 類病毒2.2.1 主要特性（1

17、） 只有核酸，無蛋白質(zhì)外殼；（2） 分子量低； 馬鈴薯紡錘形塊莖病類病毒(PSTV)：359個核苷酸， 草矮生類病毒(HSV)：290300個核苷酸 柑桔裂皮病類病毒(CEV)：371個核苷酸。 （3） 耐高溫 70-90，有些可達100-110。 病毒：50-60。病理學第二章4植物病毒與類病毒2.2 類病毒2.2.1 主要特性病理學第二章4植物病毒與類2.2 類病毒2.2.2 病害癥狀特點 畸形、壞死、變色。（1） 木本： 樹皮開裂、脫落，卷葉或全株呈萎縮狀（2) 草本 多為隱癥，或呈卷葉、矮化狀病理學第二章4植物病毒與類病毒2.2 類病毒2.2.2 病害癥狀特點病理學第二章4植物病毒柑橘

18、裂皮病病理學第二章4植物病毒與類病毒柑橘裂皮病病理學第二章4植物病毒與類病毒菊花矮化類病毒Chrysanthemum stunt viroid病理學第二章4植物病毒與類病毒菊花矮化類病毒Chrysanthemum stunt vir2.2 類病毒2.2.3 傳播方式2.2.3.1 種子、繁殖材料 種子帶毒率很高。2.2.3.2 接觸傳染，未發(fā)現(xiàn)蟲媒病理學第二章4植物病毒與類病毒2.2 類病毒2.2.3 傳播方式病理學第二章4植物病毒與類2.2 類病毒2.2.4 命名命名規(guī)則類似于病毒：寄主英文俗名 + 癥狀 + 類病毒類病毒voroid縮寫為Vd，病毒virus縮寫為V。馬鈴薯紡錘塊莖類病毒（

19、Potato spindle tuber viroid，PSTVd） 菊花矮化類病毒 (Chrysanthemum stunt viroid)病理學第二章4植物病毒與類病毒2.2 類病毒2.2.4 命名病理學第二章4植物病毒與類病毒3 植物病原原核生物原核生物：（1）由細胞壁和細胞膜或只有細胞膜包圍細胞質(zhì)的單細胞微生物；（2）遺傳物質(zhì)分散在細胞質(zhì)內(nèi)。沒有核膜包圍而成的細胞核；（3）細胞質(zhì)中含有小分子的核蛋白體（70 S），沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體和葉綠體等細胞器。引起園藝植物病害的原核生物：細菌、植原體和螺原體。病理學第二章4植物病毒與類病毒3 植物病原原核生物原核生物：病理學第二章4植物病毒與類病

20、毒3 植物病原原核生物3.1 植物病原細菌 3.1.1 病原細菌的一般性狀3.1.1.1 形態(tài) 球狀、桿狀、螺旋狀 植物病原細菌大多數(shù)為短桿狀，具有鞭毛。病理學第二章4植物病毒與類病毒3 植物病原原核生物3.1 植物病原細菌 病理學第二章4植物鞭毛的數(shù)目和著生位置是細菌分類的一個重要依據(jù)。病理學第二章4植物病毒與類病毒鞭毛的數(shù)目和著生位置是細菌分類的一個重要依據(jù)。病理學第二章43.1.1.2 繁殖: 裂殖病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1.1.2 繁殖: 病理學第二章4植物病毒與3.1 植物病原細菌3.1.2 癥狀特點3.1.2.1 病狀（1）壞死性病狀： 萎焉、腐爛、葉斑、葉枯（2）促進性

21、病狀： 腫瘤3.1.2.2 病征 膿狀物病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.2 癥狀特點病理學第二章4植物病病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.3 診斷方法檢查病組織中有無大量細菌存在： 切取病組織浸泡在清水中，數(shù)分鐘后觀察有無大量細菌從切口處涌出。病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.3 診斷方法病理學第二章4植物病病理學

22、第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.4 細菌的分類 原核生物界， 4個門，7個綱，35個組群薄壁菌門（Phylum Gracilicutes）、厚壁菌門（Phylum Firmicutes）、軟壁菌門（Phylum Tenericutes）、疵壁菌門（Phylum Mendosicutes） 細菌分類專著：伯克氏細菌鑒定手冊 分類依據(jù)：形態(tài)特征、營養(yǎng)型及生活方式、培養(yǎng)特性、生理生化特性、病害癥狀以及革蘭氏染色等。病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.4 細菌的分類病理學第二章4植物薄壁菌門厚壁菌門軟壁菌門疵壁菌門（古細菌）細胞壁

23、肽聚糖810%78nm肽聚糖5080%1050nm無壁壁中無胞壁酸和肽聚糖GGG形態(tài)球，卵圓，短桿、絲狀螺旋形球，桿或不規(guī)則桿狀，絲狀球或橢圓形對四環(huán)素敏感營養(yǎng)型光或化能化能對營養(yǎng)要求苛刻，有的在培養(yǎng)基上形成煎蛋狀菌落化能病理學第二章4植物病毒與類病毒薄壁菌門厚壁菌門軟壁菌門疵壁菌門（古細菌）細胞壁肽聚糖81病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒 鞭毛 革蘭氏染色 菌落 癥狀 假單胞桿菌屬 Pseudomonas2-多根極鞭 陰性 灰白色 萎焉 腐爛黃單胞桿菌屬Xanthomonas單根極鞭 陰性 黃色 葉斑 葉

24、枯歐氏桿菌屬Erwinia周生鞭毛 陰性 白色 腐爛 土壤桿菌屬Agrobacterium1-4根周鞭 陰性 灰白色 腫瘤 棒狀桿菌屬Clavibacter無 陽性 乳黃色 萎焉3.1.5 植物病原細菌的主要類群病理學第二章4植物病毒與類病毒 鞭毛 革蘭氏染色 菌落 3.1 植物病原細菌3.1.5.1 假單胞桿菌屬（Pseudomonas）： 革蘭氏染色反應陰性，極生2-多根鞭毛。在人工培養(yǎng)基上，菌落灰白色，有的呈熒光。DNA中G+C含量為58 mol%70 mol%。引起細菌性角斑病。 病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.5.1 假單胞桿菌屬（Pseud病理學第二章4植

25、物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.5.2黃單胞桿菌屬Xanthomonas 革蘭氏染色反應陰性，極生一根鞭毛。在人工培養(yǎng)基上，菌落為黃色。DNA中G+C含量為63mol%70 mol%。 引起桃細菌性穿孔病、菜豆細菌性疫病、姜瘟病、辣椒瘡痂病、水稻白葉枯病、棉花角斑病等。 病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.5.2黃單胞桿菌屬Xanthom病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.5.3 歐氏桿菌屬Erwinia 革蘭氏染色反應陰

26、性，周生多根鞭毛。在人工培養(yǎng)基上，菌落為白色。DNA中G+C含量為50mol%58 mol%。引起園藝植物的軟腐病等。 病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.5.3 歐氏桿菌屬Erwinia病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.5.4 土壤桿菌屬Agrobacterium 革蘭氏染色反應陰性，少數(shù)沒有鞭毛，有鞭毛的為周生1-4根；在人工培養(yǎng)基上菌落為灰白色至白色。DNA中G+C含量為57mol%63 mol%。引起蘋果毛根病和果樹、花卉的根癌病。 病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.5.4 土壤桿菌屬Agrobac病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.5.5 棒狀桿菌屬Clavibacter 革蘭氏染色反應陽性，多數(shù)沒有鞭毛，少數(shù)有極鞭。在人工培養(yǎng)基上菌落呈奶黃色。DNA中G+C含量為 67mol%78 mol%。 引起馬鈴薯環(huán)腐病。病理學第二章4植物病毒與類病毒3.1 植物病原細菌3.1.5.5 棒狀桿菌屬Claviba病理學第二章4植物病毒與