臨床常用免疫學檢查課件1

1、臨床常用免疫學檢查 臨床常用免疫學檢查(1)1臨床常用免疫學檢查 臨床常用免疫學檢查(1)1臨床常用免疫學檢查血清免疫球蛋白（immunglobulin，Ig）測定血清補體測定細胞免疫檢測感染免疫檢測自身免疫檢查肝炎病毒標志物檢測腫瘤標志物檢測臨床常用免疫學檢查(1)2臨床常用免疫學檢查血清免疫球蛋白（immunglobulin血清免疫球蛋白分類Ig通常是指具有抗體活性和（或）抗體樣結構的球蛋白。應用免疫電泳與超速離心分析可將Ig分5類： IgG、IgA、IgM、 IgD、 IgE。IgG：含量最多或最主要的Ig（75%），唯一能夠通過胎盤的Ig。主要由脾臟和淋巴結中的漿細胞合成與分泌。IgA

2、：約占10%，SIgA在局部免疫中起重要作用。主要由腸系淋巴組織中的漿細胞產(chǎn)生。臨床常用免疫學檢查(1)3血清免疫球蛋白分類Ig通常是指具有抗體活性和（或）抗體樣結構血清免疫球蛋白IgM：分子量最大，由5個IgM單體通過J鏈連接。是最早出現(xiàn)的Ig，是抗原刺激后最早出現(xiàn)的抗體，其殺菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比IgG高5001000倍。測定方法：單向免疫擴散法（RID）或免疫比濁法。臨床常用免疫學檢查(1)4血清免疫球蛋白IgM：分子量最大，由5個IgM單體通過J鏈連血清免疫球蛋白測定參考值參考值： IgG：7.616.6g/L （RID法） IgA：7103350mg/L IgM ：0.

3、482.12 g/L 臨床常用免疫學檢查(1)5血清免疫球蛋白測定參考值參考值： IgG：7.616.臨床意義 免疫球蛋白增高多克隆增高:常見于各種慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病，如SLE、類風濕關節(jié)炎等。單克隆增高:主要見于免疫增殖性疾病，如多發(fā)性骨隋瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥等。 臨床常用免疫學檢查(1)6.臨床意義臨床常用免疫學檢查(1)6免疫球蛋白降低：常見于各類先天性免疫缺陷病、獲得性免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病及長期使用免疫抑制劑的病人。血清IgD測定 免疫擴散法：062mg/L 已發(fā)現(xiàn)有些抗核抗體、抗基底膜抗體、抗甲狀腺抗體和抗“O”抗體等均屬IgD，但活性甚低

4、。 臨床常用免疫學檢查(1)7免疫球蛋白降低：常見于各類先天性免疫缺陷病、獲得性免疫缺陷 血清IgE：主要由鼻咽部、支氣管、胃腸道等粘膜固有層的漿細胞分泌，為親細胞抗體，能與肥大細胞、嗜堿性粒細胞膜上的FceR結合，產(chǎn)生I型變態(tài)反應。 ELASA：0.10.9mg/L 臨床意義： 1. I型變態(tài)反應 2. IgE型骨髓瘤、寄生蟲感染等 3. 慢性肝炎、SLE、類風濕性關節(jié)炎等。臨床常用免疫學檢查(1)8 血清IgE：主要由鼻咽部、支氣管、胃腸道等粘膜固有層的 是一種單克隆B淋巴細胞異常增殖時產(chǎn)生的IgG分子或片段，一般不具有抗體活性。參考值：蛋白電泳法，免疫電泳法：陰性意義：1.多發(fā)性骨髓瘤（

5、MM），占35%65%，其中IgG型占60%左右； IgA型占20%左右； 輕鏈型占15%左右； IgD、 IgE型罕見。2.巨球蛋白血癥。3.重鏈?。℉CDs）。4.半分子病。5.惡性淋巴瘤。6.良性M蛋白血癥。血清M蛋白測定（M protein，monoclonal immunoglobulins）臨床常用免疫學檢查(1)9 血清M蛋白測定（M血清補體測定補體是具有酶活性的一種不耐熱球蛋白，分3組：9種補體成分（C1C9）；B、D、P、H、I 因子；補體調(diào)節(jié)蛋白，如C1抑制物、C4結合蛋白、促衰變因子等?？傃a體溶血活性（CH50）測定參考值 試管法：50000100000U/L 意義：增高

6、 見于急性炎癥、急性組織損傷、惡性腫瘤及妊娠。降低 見于急性腎小球腎炎、自身免疫性疾病、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、慢性肝病、肝硬化、AIDS、嚴重燒傷等。臨床常用免疫學檢查(1)10血清補體測定補體是具有酶活性的一種不耐熱球蛋白，分3組：9種 血清補體測定血清C3：主要由巨噬細胞和肝臟合成，在經(jīng)典激活途徑與旁路激活途徑中發(fā)揮重要作用。 參考值：免疫比濁法0.851.70g/L 增高 作為急性時相蛋白，在急性炎癥、傳染病早期、急性組織損傷、惡性腫瘤、抑制物排斥反應時增高。降低 補體合成能力降低；合成原料不足；消耗或丟失太多；先天性補體缺乏。臨床常用免疫學檢查(1)11 血清補體測定血清C3：主要由巨

7、噬細胞和肝臟合成，在經(jīng)典激活 血清補體測定血清C4測定：由肝臟、吞噬細胞合成，參與補體的經(jīng)典激活途徑。參考值：單向免疫擴散法：0.197+/-0.109/L。臨床意義基本與C3相似，降低還見于多發(fā)性骨髓瘤、IgA腎病、遺傳性C4缺乏癥等。臨床常用免疫學檢查(1)12 血清補體測定血清C4測定：由肝臟、吞噬細胞合成，參與補體的血清補體測定補體C1q測定參考值：0.1790.04g/L 臨床意義：與C3相似，降低還見于活動性混合性結締組織病、重度營養(yǎng)不良、腎病綜合征、重度聯(lián)合免疫缺陷病等。B因子測定-C3激活劑前體臨床常用免疫學檢查(1)13血清補體測定補體C1q測定臨床常用免疫學檢查(1)13細

8、胞免疫檢查淋巴細胞表面標志物檢測 T淋巴細胞表面標志物檢測：E玫瑰花形成試驗、免疫熒光法（IFA）、熒光激活細胞分類法（FACS）、免疫金銀法以及免疫酶染色法等。E玫瑰花形成試驗 SRBC+CD2參考值 Et 64.4%6.7%免疫熒光法臨床常用免疫學檢查(1)14細胞免疫檢查淋巴細胞表面標志物檢測臨床常用免疫學檢查(1)1T淋巴細胞表面標志物檢測意義 可用于T淋巴細胞計數(shù)， T淋巴細胞亞群的分類以及判斷T淋巴細胞的活化程度。CD3 分子表達于所有成熟T淋巴細胞的表面，是總T淋巴細胞的重要標志，CD3+ 常見于甲狀腺功能亢進、淋巴細胞性甲狀腺炎、重癥肌無力以及器官移植后排斥反應。 CD3+ 主

9、要見于免疫缺陷病，如AIDS、先天性胸腺發(fā)育不全綜合征以及聯(lián)合免疫缺陷病等。亦可見于惡性腫瘤、SLE、免疫抑制劑治療等。臨床常用免疫學檢查(1)15T淋巴細胞表面標志物檢測意義 可用于T淋巴細胞計數(shù)， T淋T細胞分化抗原測定白細胞分化抗原（cluster differentiation，CD）CD3代表總T淋巴細胞，CD4是輔助、誘導T細胞的標志，CD8是抑制、殺傷性T細胞的標志。應用單抗和熒光標記二抗反應在熒光顯微鏡下或流式細胞儀中計數(shù)CD的百分率。參考值 ：免疫熒光法（IFA）： CD3為63.1%10.8%； CD4 為42.8%9.5%；CD8 19.6%5.9%；CD4 /CD8為（

10、2.20.7）/1。流式細胞術：CD3 61%85%；CD4 28%58%；CD8 19%48%；CD4 /CD80.92.0/1。臨床常用免疫學檢查(1)16T細胞分化抗原測定白細胞分化抗原（cluster diffeT細胞分化抗原測定臨床意義CD3CD4+T細胞下降 常見于某些病毒感染性疾病，如AIDS、MCV、嚴重創(chuàng)傷、全身麻醉、大手術、應用免疫抑制劑等； 升高見于類風濕性關節(jié)炎活動期。CD8+ T細胞下降 常見于類風濕性關節(jié)炎、Sjogren綜合征、重癥肌無力、DM（II型）以及膜型腎小球腎炎等； 升高見于傳染性單核細胞增多癥急性期、MCV以及慢性乙肝。CD4 +/CD8+比值下降，常

11、見于AIDS、瘤型麻風病、惡性腫瘤進行期和復發(fā)時。也見于部分感染性疾病如傳染性單核細胞增多癥、MCV、血吸蟲病等；增高見于類風濕性關節(jié)炎活動期、SLE、Sjogren綜合征、重癥肌無力、膜型腎小球腎炎以及器官移植后排斥反應等。臨床常用免疫學檢查(1)17T細胞分化抗原測定臨床意義臨床常用免疫學檢查(1)17淋巴細胞功能檢測T細胞轉化試驗形態(tài)學法： T細胞轉化率60.1%7.6%3H-TdR摻入法：培養(yǎng)淋巴細胞用液體閃樂爍儀測量，記錄每分鐘脈沖數(shù)（cpm）。SI（刺激指數(shù)）=PHA刺激管cpm均值/對照管cpm均值SI2為有意義，2為淋巴細胞轉化率降低。臨床常用免疫學檢查(1)18淋巴細胞功能檢

12、測T細胞轉化試驗臨床常用免疫學檢查(1)18T細胞轉化試驗臨床意義判斷機體細胞免疫功能水平，降低常見于細胞免疫缺陷或細胞免疫功能低下者，如惡性腫瘤、淋巴瘤、重癥結核、肝硬化等。增高常見于Down綜合征。估計疾病的療效與預后臨床常用免疫學檢查(1)19T細胞轉化試驗臨床意義臨床常用免疫學檢查(1)19B淋巴細胞表面標志物檢測表面抗原：CD19、CD20、CD21、CD22和CD40等表面受體：B細胞抗原受體（BCR）、細胞因子受體（CKR）、補體受體（CR）與Fc受體等。B細胞表面免疫球蛋白（BCR，SmIg）是B細胞的特征性表面標志。將熒光標記的抗不同類型Ig的單克隆抗體進行檢測，可將B細胞分

13、為SmIgG、SmIgM、 SmIgA、 SmIgD、 SmIgE。臨床常用免疫學檢查(1)20B淋巴細胞表面標志物檢測表面抗原：CD19、CD20、CDB淋巴細胞表面標志物檢測參考值：免疫熒光法（羊抗人）（以攜帶該標志的細胞百分數(shù)表示）SmIg+細胞總數(shù)：均值21%（16%28%）SmIgG+ 細胞：均值7.1%（4%13%）SmIgM+細胞：均值8.9%（7%13%）SmIgA+細胞： 均值2.2%（1%4%）SmIgD+細胞： 均值6.2%（5%8%）SmIgE+細胞： 均值0.9%（0%1.5%）臨床常用免疫學檢查(1)21B淋巴細胞表面標志物檢測參考值：免疫熒光法（羊抗人）（以攜B淋

14、巴細胞表面標志物檢測臨床意義SmIg+細胞增高 ：常與B細胞惡性增殖有關，主要見于慢淋、毛細胞白血病以及巨球蛋白血癥等。SmIg+細胞減低：主要與體液免疫缺陷有關，常見于性聯(lián)丙種球蛋白缺乏癥、嚴重聯(lián)合免疫缺陷病等。臨床常用免疫學檢查(1)22B淋巴細胞表面標志物檢測臨床意義臨床常用免疫學檢查(1)2B淋巴細胞表面標志物檢測B細胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22測定參考值：FACS：CD19+細胞 11.74%3.73%臨床意義 CD19為全部B細胞共有的表面標志，增高見于B細胞系統(tǒng)的惡性種瘤，減低見于體液免疫缺陷病。臨床常用免疫學檢查(1)23B淋巴細胞表面標志物檢測B細胞分化抗

15、原CD19、CD20、CNK細胞活性測定NK細胞能直接殺傷效應細胞，具有抗腫瘤、抗感染和和免疫調(diào)節(jié)等功能，亦參與移植物排斥反應、自身免疫病和超敏反應的發(fā)生。LDH釋放法 參考值 細胞毒指數(shù)：27.5%52.5%51Cr釋放法參考值 NK細胞活性（自然殺傷率）：47.6%76.8%臨床常用免疫學檢查(1)24NK細胞活性測定NK細胞能直接殺傷效應細胞，具有抗腫瘤、抗感NK細胞活性測定臨床意義活性升高 常見于病毒感染的早期，Down綜合征，接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增強劑治療患者?；钚越档?常見于惡性腫瘤、重癥聯(lián)合免疫缺陷病，AIDS和免疫抑制劑治療者等。腫瘤療效觀察及預后評價免疫調(diào)節(jié)功

16、能 NK細胞可釋放INF-、INF-和GM-CSF等細胞因子。臨床常用免疫學檢查(1)25NK細胞活性測定臨床意義臨床常用免疫學檢查(1)25乙型肝炎病毒血清標記物檢測HBeAg，Anti-HBe或抗HbeHBeAg，Anti-HBc或抗Hbc 測定方法：ELASA，RIAHBsAg，Anti-HBs或抗HBs臨床常用免疫學檢查(1)26乙型肝炎病毒血清標記物檢測HBeAg，Anti-HBe或抗H乙型肝炎病毒血清標記物檢測HBsAg（+）表示肝中有HBV見于：乙型肝炎潛伏期和急性期。 慢性遷延性肝炎，慢性活動性肝炎，肝硬化，肝癌。 慢性HBsAg攜帶者。 Anti-HBs或抗HBs：中和抗體臨

17、床常用免疫學檢查(1)27乙型肝炎病毒血清標記物檢測HBsAg（+）表示肝中有HBV臨乙型肝炎病毒血清標記物檢測HBeAg：有乙型肝炎，是病毒復制活躍，傳染性強的指標；持續(xù)陽性易轉變?yōu)槁愿窝祝?HBeAg+和 HBsAg+可垂直傳播。Anti-HBe或抗Hbe：出現(xiàn)于急性感染的恢復期，持續(xù)時間較長。意味著HBV部分被清除或抑制，復制減少，傳染性降低。臨床常用免疫學檢查(1)28乙型肝炎病毒血清標記物檢測HBeAg：有乙型肝炎，是病毒復制 乙型肝炎病毒血清標記物Anti-HBc或抗HBc：反映肝細胞受到HBV侵害的一種指標，主要包括IgM、IgG、IgA?？笻Bc IgM陽性是最早出現(xiàn)的特異性

18、抗體，是診斷急性乙型肝炎和判斷病毒復制活躍的指標，并提示病人的血液有強傳染性。也見于慢性活動性肝炎。抗HBc IgG 其陽性滴度高，表明患有乙型肝炎，指正在感染；低滴度為既往感染指標，體內(nèi)時間長。臨床常用免疫學檢查(1)29 乙型肝炎病毒血清標記物Anti-HBc或抗HBc乙型肝炎病毒血清標記物HBV-DNA定性和定量測定：目前定量測定范圍為102 108 拷貝/ml。與血清免疫學結果的綜合評價HBsAg和Anti-HBsHBeAg，Anti-HBe ，Anti-HBc5項標志物的變化和聯(lián)合檢測的臨床意義臨床常用免疫學檢查(1)30乙型肝炎病毒血清標記物HBV-DNA定性和定量測定：目前定量丙

19、型肝炎病毒標志物檢測抗-HCV（ELISA）抗-HCV IgM陽性 常見于急性HCV感染，是診斷丙肝的早期敏感指標；是HCV活動的指標，是判斷HCV傳染性的指標。 抗-HCV IgGHCV-RNA測定測定方法 逆轉錄巢式PCR法，熒光定量PCR法（第三代試劑抗原包括C、NS3、NS4、NS5；丙肝病毒易發(fā)生變異，抗-HCV陽轉時間差異較大）臨床常用免疫學檢查(1)31丙型肝炎病毒標志物檢測抗-HCV（ELISA）臨床常用免疫學血清抗鏈球菌溶血素“O”測定參考值： 乳膠凝集法（LAT）：500U 意義：增高 常見于A組溶血鏈球菌感染相關疾病，如扁桃腺炎、感染性心內(nèi)膜炎、風濕熱、鏈球菌感染后腎小球

20、腎炎等。ASO 在A組溶血鏈球菌感染后1周開始升高，46周達高峰，可持續(xù)幾個月或幾年。假陽性與假陰性臨床常用免疫學檢查(1)32血清抗鏈球菌溶血素“O”測定參考值： 乳膠凝集法（LAT）：傷寒、副傷寒沙門菌免疫測定肥達（Widal）反應參考值O凝集價1：80傷寒H凝集價1：160副傷寒A、B、C凝集價1：80傷寒、副傷寒沙門菌抗體IgM測定參考值 ELASA法：陰性或滴度1：20。臨床常用免疫學檢查(1)33傷寒、副傷寒沙門菌免疫測定肥達（Widal）反應臨床常用免疫傷寒、副傷寒沙門菌免疫測定臨床意義O升高，H正常H正常，O升高O升高，H升高O升高，A、B、C任何一項升高臨床常用免疫學檢查(1

21、)34傷寒、副傷寒沙門菌免疫測定臨床意義臨床常用免疫學檢查(1)3 血清C-反應蛋白（CRP）測定C-反應蛋白是一種由肝臟合成的，能與肺炎雙球菌C多糖體起反應的急性時相反應蛋白，具有激活補體，促進吞噬和免疫調(diào)理作用。參考值：8.2mg/L（免疫比濁法）意義 組織損傷，如大手術，嚴重創(chuàng)傷，燒傷，心肌梗死等，發(fā)病后數(shù)小時迅速增高，病情好轉后又迅速下降。又復升高提示繼發(fā)感染或深部靜脈血栓形成。風濕熱活動期，可達200mg/L以上。細菌性感染常明顯升高，病毒性感染升高不明顯或輕度升高。惡性腫瘤，器官移植后排斥反應，妊娠等可見明顯升高可在發(fā)病后數(shù)小時迅速增高，病情好轉后又迅速下降至正常。臨床常用免疫學檢

22、查(1)35 血清C-反應蛋白（CRP）測定C-反應蛋白是一種由肝臟合成腎綜合征出血熱病毒抗體檢測參考值IFA，ELASA：陰性特異性IgM-感染后23天檢出，710天達高峰。特異性IgG感染后兩周出現(xiàn)，可持續(xù)多年。臨床常用免疫學檢查(1)36腎綜合征出血熱病毒抗體檢測參考值臨床常用免疫學檢查(1)36艾滋病血清學檢查檢測抗HIV（I型或II型）是AIDS診斷的一個主要指標?？乖瓰镠IV感染的T細胞株的病毒抗原（HLA-DR抗原污染可出現(xiàn)假陽性） 。方法：初篩試驗ELASA ，乳膠凝集法，免疫印跡法，斑點免疫滲透法。 確認試驗 可選用蛋白印跡試驗（WB）， PCR法檢查HIV病毒DNA。HIV

23、抗原檢測 P24抗原（病毒衣殼蛋白，具群特異性）。 HIV核酸檢測 DNA-PCR；RNA-PCR臨床常用免疫學檢查(1)37艾滋病血清學檢查檢測抗HIV（I型或II型）是AIDS診斷的 梅毒血清學檢查是由梅毒螺旋體梅毒亞種所致的一種性傳播疾病。梅毒螺旋體抗體檢測：非密螺旋體抗原試驗和密螺旋體抗原試驗，前者為篩選試驗和治療效果監(jiān)測，后者為確診診斷。暗視野顯微鏡檢查梅毒螺旋體PCR檢測臨床常用免疫學檢查(1)38 梅毒血清學檢查是由梅毒螺旋體梅毒亞種所致的一種性傳播疾病。甲胎蛋白（AFP）測定參考值 CLIA，RIA，ELASA：血清25g/L臨床意義原發(fā)性肝癌明顯升高，AFP300 g/L病毒

24、性肝炎、肝硬化患者不同程度AFP升高但常 300 g/L。生殖腺胚胎性腫瘤血清AFP升高妊娠小扁豆凝集素（LCA）結合型AFP25%提示原發(fā)性肝癌。臨床常用免疫學檢查(1)39甲胎蛋白（AFP）測定參考值 CLIA，RIA，ELASA自身抗體檢查自身免疫性疾?。ˋID）AID-器官特異性和非器官特異性（抗原為細胞核或胞漿成分）及中間型?？购丝贵w（ANA）：是以細胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱。間接免疫熒光檢查有四種熒光圖譜：均質型（抗dsDNA抗體和抗組蛋白抗體）；周邊型（抗dsDNA抗體）；斑點型或顆粒型（抗U1-RNP、抗Sm、抗Scl-70、抗SS-B/La、抗SS-A/Ro等）；核

25、仁型（核糖體、U3-RNP、RNA聚合酶）。臨床常用免疫學檢查(1)40自身抗體檢查自身免疫性疾病（AID）臨床常用免疫學檢查(1)自身抗體檢查抗核抗體（ANA）檢查：抗各種細胞核成分（脫氧核糖核蛋白-DNP、DNA、可提取的核抗原-ENA和RNA等）。參考值：IFA法陰性，血清滴度1：40為陽性見于SLE（80%100%）、MCTD（100%）、原發(fā)性膽汁性肝硬化95%100%）、DM （30%50%）、RA等。臨床常用免疫學檢查(1)41自身抗體檢查抗核抗體（ANA）檢查：抗各種細胞核成分（脫氧核自身抗體檢查抗DNA抗體分為：抗ds-DNA、抗ss-DNA、抗z-DNA 抗z-DNA 對S

26、LE有特異性，檢出率在90%以上?？筪sDNA抗體測定的臨床意義見于SLE活動期，陽性率70%90%。特異性教高（95%）敏感性較低-診斷與治療監(jiān)控。另外參與SLE發(fā)病機制。抗Sm抗體測定：為SLE所特有，疾病特異度達99%，且能反應疾病活動的程度，靈敏度較低，平均為20%。與CNS、腎病、肺纖維化及心膜炎有一定關系。臨床常用免疫學檢查(1)42自身抗體檢查抗DNA抗體分為：抗ds-DNA、抗ss-DNA自身抗體檢查抗組蛋白抗體（AHA）測定臨床意義：50%70%的SLE及95%以上的藥物誘導性狼瘡可出現(xiàn)，主要靶抗原為H2A-H2B DNA復合物，與SLE活動有關?？购颂呛说鞍祝≧NP）抗體測

27、定臨床意義：抗U1-RNP抗體主要與MCTD相關，在30%40%的SLE病人中可檢測到，并常與Sm抗體相伴出現(xiàn)。常與下列臨床表現(xiàn)有關，腎臟較少累及、雷諾現(xiàn)象、手腫脹、食管運動不良等。臨床常用免疫學檢查(1)43自身抗體檢查抗組蛋白抗體（AHA）測定臨床常用免疫學檢查(1自身抗體檢查抗SS-A/Ro抗體測定干燥綜合征有三種不同的自身抗體：SSA、SSB、SSC（RANA），前兩者僅見于原發(fā)性干燥綜合征，后者見于伴類風濕性關節(jié)炎的繼發(fā)性干燥綜合征。SS-A/Ro抗體見于干燥綜合征（SjS）（靈敏度88%96%），RA（3%10%），SLE（24%60%）。其他疾?。簛喖毙云つw性狼瘡（70%90%），新生兒狼瘡（90%），補體C2/C